目录 | 第1-9页 |
CONTENTS | 第9-14页 |
摘要 | 第14-17页 |
Abstract | 第17-21页 |
第一章 文献综述 | 第21-48页 |
·甘薯病毒病研究进展 | 第21-34页 |
·甘薯病毒病发生概况 | 第21-22页 |
·几种主要甘薯病毒的研究进展 | 第22-34页 |
·甘薯病毒检测方法研究进展 | 第34-40页 |
·症状学诊断法 | 第34页 |
·生物学检测法 | 第34页 |
·电子显微镜技术 | 第34-35页 |
·血清学检测法 | 第35-36页 |
·实时荧光定量PCR技术 | 第36-40页 |
·植物种传病毒研究进展 | 第40-45页 |
·种子传毒的危害及国内外研究概况 | 第40-41页 |
·种传病毒的类型和机理 | 第41-43页 |
·种子传毒率检测研究 | 第43-44页 |
·影响种子传毒的因素 | 第44-45页 |
·本研究的目的和意义 | 第45-48页 |
第二章 甘薯褪绿矮化病毒西非株系中国分离物基因组全序列测定及分子变异研究 | 第48-64页 |
·材料 | 第48-51页 |
·甘薯病毒样品的采集 | 第48-49页 |
·带毒烟粉虱 | 第49页 |
·主要试剂 | 第49页 |
·引物设计及合成 | 第49-51页 |
·方法 | 第51-57页 |
·基本的分子生物学方法 | 第51-55页 |
·SPCSV-WA基因组全长序列的克隆策略 | 第55-56页 |
·SPCSV-WA基因组近全长序列的克隆方法 | 第56-57页 |
·SPCSV-WA江苏分离物(SPCSV-WA-JS)基因组全长序列的克隆与分析 | 第57页 |
·结果与分析 | 第57-62页 |
·SPCSV-WA4个分离物基因组近全长序列的克隆与序列测定 | 第57-58页 |
·SPCSV-WA-JS基因组全长序列的克隆与序列测定 | 第58-59页 |
·SPCSV-WA-JS基因组全长序列的分析与比较 | 第59-61页 |
·SPCSV-WA不同分离物的分子变异分析 | 第61-62页 |
·小结与讨论 | 第62-64页 |
第三章 甘薯羽状斑驳病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用 | 第64-79页 |
·材料 | 第64-65页 |
·质粒和甘薯病毒材料 | 第64-65页 |
·主要试剂与仪器 | 第65页 |
·引物和探针的设计与合成 | 第65页 |
·方法 | 第65-69页 |
·NCM-ELISA检测 | 第65-66页 |
·实时荧光定量PCR方法的建立 | 第66-69页 |
·实时荧光定量PCR的初步应用 | 第69页 |
·实时荧光定量PCR产物的克隆和序列测定 | 第69页 |
·结果与分析 | 第69-77页 |
·重组质粒标准品的制备 | 第69-70页 |
·引物、探针浓度及循环条件的优化 | 第70-72页 |
·标准曲线的建立 | 第72页 |
·荧光定量PCR与常规PCR检测方法的灵敏度比较 | 第72-73页 |
·特异性试验 | 第73-74页 |
·重复性试验 | 第74-75页 |
·荧光定量PCR方法的初步应用 | 第75-77页 |
·荧光定量PCR扩增产物的鉴定 | 第77页 |
·小结与讨论 | 第77-79页 |
第四章 甘薯褪绿矮化病毒西非株系实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用 | 第79-93页 |
·材料 | 第79-80页 |
·质粒和甘薯病毒材料 | 第79-80页 |
·主要试剂与仪器 | 第80页 |
·引物和探针的设计与合成 | 第80页 |
·方法 | 第80-83页 |
·NCM-ELISA检测 | 第80-81页 |
·SPCSV-WA CP基因的克隆与序列测定 | 第81页 |
·实时荧光定量PCR方法的建立 | 第81-83页 |
·实时荧光定量PCR的初步应用 | 第83页 |
·实时荧光定量PCR产物的克隆和序列测定 | 第83页 |
·结果与分析 | 第83-91页 |
·标准质粒的制备 | 第83-84页 |
·引物、探针浓度及反应条件的优化 | 第84-86页 |
·标准曲线的建立 | 第86页 |
·荧光定量PCR与常规PCR检测方法的灵敏度比较 | 第86-87页 |
·特异性试验 | 第87-88页 |
·重复性试验 | 第88-89页 |
·实时荧光定量PCR的初步应用 | 第89-91页 |
·实时荧光定量PCR产物的克隆和序列测定 | 第91页 |
·小结与讨论 | 第91-93页 |
第五章 甘薯褪绿矮化病毒西非株系的寄主范围研究 | 第93-99页 |
·材料 | 第93-94页 |
·烟粉虱 | 第93页 |
·毒源植物 | 第93-94页 |
·供试植物 | 第94页 |
·主要试剂与仪器 | 第94页 |
·方法 | 第94-95页 |
·烟粉虱传毒试验 | 第94-95页 |
·实时荧光定量PCR检测 | 第95页 |
·实时荧光定量PCR产物的克隆与序列测定 | 第95页 |
·胡萝卜的回传实验 | 第95页 |
·结果与分析 | 第95-97页 |
·供试植物的症状观察 | 第95-96页 |
·实时荧光定量PCR检测结果 | 第96页 |
·实时荧光定量PCR产物的克隆和序列测定 | 第96-97页 |
·胡萝卜回传实验结果 | 第97页 |
·小结与讨论 | 第97-99页 |
第六章 甘薯褪绿矮化病毒与甘薯羽状斑驳病毒的种传效率研究 | 第99-111页 |
·材料 | 第99-100页 |
·试验材料 | 第99-100页 |
·主要试剂与仪器 | 第100页 |
·方法 | 第100-103页 |
·病毒接种及感病甘薯植株种子的繁育 | 第100页 |
·感病烟草植株种子的获得 | 第100页 |
·种子播种及苗期调查 | 第100-101页 |
·NCM-ELISA检测 | 第101页 |
·甘薯实生苗中SPCSV与SPFMV的实时荧光定量PCR检测 | 第101页 |
·种子不同部位病毒检测 | 第101-102页 |
·花器不同部位病毒检测 | 第102-103页 |
·实时荧光定量PCR产物的克隆与序列测定 | 第103页 |
·结果与分析 | 第103-108页 |
·SPCSV在烟草上的种传效率 | 第103-104页 |
·甘薯种子传播SPCSV和SPFMV的研究 | 第104-107页 |
·SPCSV与SPFMV在甘薯种子及花器上的分布 | 第107-108页 |
·荧光定量PCR扩增产物的鉴定 | 第108页 |
·小结与讨论 | 第108-111页 |
结论 | 第111-113页 |
参考文献 | 第113-135页 |
致谢 | 第135-136页 |
攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第136页 |