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甘薯病毒病害(SPVD)病原的基因组测序、检测及种传效率研究

目录第1-9页
CONTENTS第9-14页
摘要第14-17页
Abstract第17-21页
第一章 文献综述第21-48页
   ·甘薯病毒病研究进展第21-34页
     ·甘薯病毒病发生概况第21-22页
     ·几种主要甘薯病毒的研究进展第22-34页
   ·甘薯病毒检测方法研究进展第34-40页
     ·症状学诊断法第34页
     ·生物学检测法第34页
     ·电子显微镜技术第34-35页
     ·血清学检测法第35-36页
     ·实时荧光定量PCR技术第36-40页
   ·植物种传病毒研究进展第40-45页
     ·种子传毒的危害及国内外研究概况第40-41页
     ·种传病毒的类型和机理第41-43页
     ·种子传毒率检测研究第43-44页
     ·影响种子传毒的因素第44-45页
   ·本研究的目的和意义第45-48页
第二章 甘薯褪绿矮化病毒西非株系中国分离物基因组全序列测定及分子变异研究第48-64页
   ·材料第48-51页
     ·甘薯病毒样品的采集第48-49页
     ·带毒烟粉虱第49页
     ·主要试剂第49页
     ·引物设计及合成第49-51页
   ·方法第51-57页
     ·基本的分子生物学方法第51-55页
     ·SPCSV-WA基因组全长序列的克隆策略第55-56页
     ·SPCSV-WA基因组近全长序列的克隆方法第56-57页
     ·SPCSV-WA江苏分离物(SPCSV-WA-JS)基因组全长序列的克隆与分析第57页
   ·结果与分析第57-62页
     ·SPCSV-WA4个分离物基因组近全长序列的克隆与序列测定第57-58页
     ·SPCSV-WA-JS基因组全长序列的克隆与序列测定第58-59页
     ·SPCSV-WA-JS基因组全长序列的分析与比较第59-61页
     ·SPCSV-WA不同分离物的分子变异分析第61-62页
   ·小结与讨论第62-64页
第三章 甘薯羽状斑驳病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用第64-79页
   ·材料第64-65页
     ·质粒和甘薯病毒材料第64-65页
     ·主要试剂与仪器第65页
     ·引物和探针的设计与合成第65页
   ·方法第65-69页
     ·NCM-ELISA检测第65-66页
     ·实时荧光定量PCR方法的建立第66-69页
     ·实时荧光定量PCR的初步应用第69页
     ·实时荧光定量PCR产物的克隆和序列测定第69页
   ·结果与分析第69-77页
     ·重组质粒标准品的制备第69-70页
     ·引物、探针浓度及循环条件的优化第70-72页
     ·标准曲线的建立第72页
     ·荧光定量PCR与常规PCR检测方法的灵敏度比较第72-73页
     ·特异性试验第73-74页
     ·重复性试验第74-75页
     ·荧光定量PCR方法的初步应用第75-77页
     ·荧光定量PCR扩增产物的鉴定第77页
   ·小结与讨论第77-79页
第四章 甘薯褪绿矮化病毒西非株系实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用第79-93页
   ·材料第79-80页
     ·质粒和甘薯病毒材料第79-80页
     ·主要试剂与仪器第80页
     ·引物和探针的设计与合成第80页
   ·方法第80-83页
     ·NCM-ELISA检测第80-81页
     ·SPCSV-WA CP基因的克隆与序列测定第81页
     ·实时荧光定量PCR方法的建立第81-83页
     ·实时荧光定量PCR的初步应用第83页
     ·实时荧光定量PCR产物的克隆和序列测定第83页
   ·结果与分析第83-91页
     ·标准质粒的制备第83-84页
     ·引物、探针浓度及反应条件的优化第84-86页
     ·标准曲线的建立第86页
     ·荧光定量PCR与常规PCR检测方法的灵敏度比较第86-87页
     ·特异性试验第87-88页
     ·重复性试验第88-89页
     ·实时荧光定量PCR的初步应用第89-91页
     ·实时荧光定量PCR产物的克隆和序列测定第91页
   ·小结与讨论第91-93页
第五章 甘薯褪绿矮化病毒西非株系的寄主范围研究第93-99页
   ·材料第93-94页
     ·烟粉虱第93页
     ·毒源植物第93-94页
     ·供试植物第94页
     ·主要试剂与仪器第94页
   ·方法第94-95页
     ·烟粉虱传毒试验第94-95页
     ·实时荧光定量PCR检测第95页
     ·实时荧光定量PCR产物的克隆与序列测定第95页
     ·胡萝卜的回传实验第95页
   ·结果与分析第95-97页
     ·供试植物的症状观察第95-96页
     ·实时荧光定量PCR检测结果第96页
     ·实时荧光定量PCR产物的克隆和序列测定第96-97页
     ·胡萝卜回传实验结果第97页
   ·小结与讨论第97-99页
第六章 甘薯褪绿矮化病毒与甘薯羽状斑驳病毒的种传效率研究第99-111页
   ·材料第99-100页
     ·试验材料第99-100页
     ·主要试剂与仪器第100页
   ·方法第100-103页
     ·病毒接种及感病甘薯植株种子的繁育第100页
     ·感病烟草植株种子的获得第100页
     ·种子播种及苗期调查第100-101页
     ·NCM-ELISA检测第101页
     ·甘薯实生苗中SPCSV与SPFMV的实时荧光定量PCR检测第101页
     ·种子不同部位病毒检测第101-102页
     ·花器不同部位病毒检测第102-103页
     ·实时荧光定量PCR产物的克隆与序列测定第103页
   ·结果与分析第103-108页
     ·SPCSV在烟草上的种传效率第103-104页
     ·甘薯种子传播SPCSV和SPFMV的研究第104-107页
     ·SPCSV与SPFMV在甘薯种子及花器上的分布第107-108页
     ·荧光定量PCR扩增产物的鉴定第108页
   ·小结与讨论第108-111页
结论第111-113页
参考文献第113-135页
致谢第135-136页
攻读博士学位期间发表的学术论文第136页

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