| 目录 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-26页 |
| 1 miRNA 介绍 | 第11-16页 |
| ·miRNA 的发现 | 第11页 |
| ·miRNA 的特征 | 第11-12页 |
| ·tRNA (转移 RNA) | 第11页 |
| ·snoRNA (核仁小 RNA) | 第11-12页 |
| ·snRNA (小核 RNA) | 第12页 |
| ·siRNA(小干扰 RNA) | 第12页 |
| ·miRNA 的生物形成和机制 | 第12-15页 |
| ·miRNA 基因的转录与 pri-miRNA 的剪接 | 第13-14页 |
| ·miRNA 前体的转运出核 | 第14页 |
| ·pre-miRNA 的剪切与 miRNA 的成熟 | 第14-15页 |
| ·miRNA 的作用及机制 | 第15-16页 |
| ·miRNA 翻译起始抑制机制 | 第15页 |
| ·miRNA 翻译起始后抑制 | 第15-16页 |
| ·miRNA 介导 mRNA 衰减 | 第16页 |
| ·miRNA 正调控 | 第16页 |
| 2 miRNA 研究进展 | 第16-18页 |
| ·miRNA 与肿瘤 | 第16-17页 |
| ·miRNA 与胚胎干细胞分化 | 第17页 |
| ·miRNA 与基因表达调控 | 第17页 |
| ·miRNA 对脊椎动物起源进化的揭示 | 第17-18页 |
| 3 miRNA 研究方法 | 第18-20页 |
| ·遗传学方法 | 第18页 |
| ·分子生物学方法 | 第18-19页 |
| ·miRNA 克隆 | 第18-19页 |
| ·实时定量 PCR | 第19页 |
| ·免疫印迹法 | 第19页 |
| ·基因芯片技术 | 第19页 |
| ·miRNA 靶标鉴定 | 第19-20页 |
| ·miRNA 靶基因寻找 | 第19-20页 |
| ·miRNA 靶基因鉴定 | 第20页 |
| 4 miRNA 与疾病及疾病诊断 | 第20-24页 |
| ·miRNA 与疾病 | 第20-21页 |
| ·miRNA 与肿瘤 | 第20页 |
| ·miRNA 与神经系统疾病 | 第20-21页 |
| ·miRNA 与其它疾病 | 第21页 |
| ·miRNA 与疾病诊断 | 第21-23页 |
| ·miRNA 特性及作为疾病诊断标志物的可行性 | 第21-22页 |
| ·miRNA 常用的检测方法 | 第22页 |
| ·各种不同体液中 miRNA 与疾病的诊断 | 第22-23页 |
| ·miRNA 在疾病治疗中的潜能 | 第23-24页 |
| 5 本研究目的与意义 | 第24-26页 |
| 第二章 实验方法 | 第26-36页 |
| 1 材料与试剂 | 第26-28页 |
| ·实验材料 | 第26页 |
| ·实验试剂 | 第26-28页 |
| ·主要试剂 | 第26页 |
| ·其它试剂及配制 | 第26-28页 |
| 2 实验仪器 | 第28页 |
| 3 实验注意事项 | 第28-29页 |
| 4 实验方法 | 第29-36页 |
| ·totalRNA 提取 | 第29-30页 |
| ·totalRNA poly(A)连接 | 第30页 |
| ·蛋白酶 K 消化 poly(A)聚合酶 | 第30-31页 |
| ·miRNA–poly(A)的 5'端序列连接 | 第31页 |
| ·cDNA 的制备 | 第31-32页 |
| ·cDNA 的 PCR 扩增 | 第32-33页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第33页 |
| ·目的片段的回收 | 第33-34页 |
| ·目的片段转化克隆 | 第34-35页 |
| ·PCR 克隆鉴定 | 第35页 |
| ·DNA 测序分析 | 第35-36页 |
| 第三章 实验结果 | 第36-43页 |
| 1 小鼠肝脏 miRNA | 第36-38页 |
| ·电泳检测目的条带 | 第36页 |
| ·目的基因转化大肠杆菌 | 第36-37页 |
| ·PCR 鉴定转化结果 | 第37页 |
| ·目的基因测序分析 | 第37-38页 |
| 2 家鸡肝脏 miRNA | 第38-41页 |
| ·电泳检测目的条带 | 第38-39页 |
| ·目的基因转化大肠杆菌 | 第39页 |
| ·PCR鉴定转化结果 | 第39-40页 |
| ·目的基因测序分析 | 第40-41页 |
| 3 结果讨论 | 第41-43页 |
| 第四章 展望 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-49页 |
| 科研成果 | 第49-50页 |
| 致谢 | 第50页 |