| 摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-15页 |
| 缩略词表 | 第15-16页 |
| 前言 | 第16-18页 |
| 第一部分 肝癌血清异常表达的小分子多肽的筛选和鉴定 | 第18-26页 |
| 一、材料与方法 | 第18-22页 |
| （一）实验材料 | 第18-19页 |
| 1、MB-IMAC-Cu 磁珠 | 第18页 |
| 2、主要化学药品和生物试剂 | 第18页 |
| 3、主要溶液配制 | 第18-19页 |
| 4、主要实验仪器和设备 | 第19页 |
| （二）实验方法 | 第19-22页 |
| 1、临床病例选择 | 第19页 |
| 2、血清样本采集、运送和保存 | 第19-20页 |
| 3、MB-IMAC-Cu 磁珠处理血清样本 | 第20页 |
| 4、样品的点样和质谱检测 | 第20-22页 |
| 5、数据处理和分析 | 第22页 |
| 二、实验结果 | 第22-24页 |
| （一）各组血清标本小分子量蛋白质指纹图谱的收集和整理 | 第22-23页 |
| （二）各组血清标本中差异蛋白峰的寻找 | 第23页 |
| （三）肝癌血清中显著差异蛋白 Tβ4 的发现 | 第23-24页 |
| 三、讨论 | 第24-26页 |
| （一）液体芯片飞行时间质谱技术与肝癌诊断的关系 | 第24页 |
| （二）Tβ4 临床应用潜能 | 第24-26页 |
| 第二部分 胸腺肽β4 作为一个候选肝癌标志物的验证 | 第26-43页 |
| 一、材料与方法 | 第26-34页 |
| （一）实验材料 | 第26-28页 |
| 1、细胞株 | 第26页 |
| 2、主要化学药品和生物试剂 | 第26-27页 |
| 3、主要试剂的配制 | 第27页 |
| 4、主要实验仪器 | 第27-28页 |
| （二）实验方法 | 第28-34页 |
| 1、细胞培养及传代 | 第28-29页 |
| 2、Real-time PCR | 第29-31页 |
| 3、流式细胞术检测胞内抗原的间接免疫荧光标记法 | 第31页 |
| 4、ELISA 检测血清标本中 Tβ4 的表达量 | 第31-32页 |
| 5、免疫荧光激光共聚焦试验 | 第32-33页 |
| 6、免疫组织化学方法 | 第33-34页 |
| 7、统计学分析 | 第34页 |
| 二、实验结果 | 第34-40页 |
| （一）Tβ4 主要位于细胞质中，大多数肝癌细胞系 Tβ4 表达上调 | 第34-35页 |
| （二）肝癌组织和血清 Tβ4 高表达，并且在慢性肝炎-肝硬化-肝癌发展病程中呈现递增的趋势 | 第35-38页 |
| （三）肝癌血清 Tβ4 含量与肝癌组织 Tβ4 表达正相关 | 第38-39页 |
| （四）肝癌组织高表达 Tβ4 与 AFP 表达、TNM 分期和血管侵袭有关 | 第39-40页 |
| 三、讨论 | 第40-43页 |
| （一）Tβ4 在肝癌中的表达情况 | 第40-41页 |
| （二）Tβ4 与肝癌进展的关系 | 第41-43页 |
| 第三部分 胸腺肽β4 影响肝癌细胞生物学行为的研究 | 第43-60页 |
| 一、材料与方法 | 第43-48页 |
| （一）实验材料 | 第43-44页 |
| 1、细胞及细胞培养 | 第43页 |
| 2、主要化学药品和生物试剂 | 第43页 |
| 3、主要试剂的配制 | 第43-44页 |
| 4、主要实验仪器 | 第44页 |
| （二）实验方法 | 第44-48页 |
| 1、细胞增殖实验（MTT 法） | 第44页 |
| 2、细胞划痕实验 | 第44-45页 |
| 3、细胞侵袭试验 | 第45页 |
| 4、细胞悬浮培养模拟失巢状态 | 第45-46页 |
| 5、Annexin V-FITC 法检测细胞凋亡 | 第46页 |
| 6、BCA 法测定蛋白含量 | 第46-47页 |
| 7、Western Blot 分析 | 第47-48页 |
| 8、数据分析及统计学处理 | 第48页 |
| 二、实验结果 | 第48-55页 |
| （一）Tβ4 促进肝癌细胞的增殖、迁移、侵袭 | 第48-51页 |
| （二）Tβ4 提高肝癌细胞 MHCC-97H 抵抗失巢凋亡的能力 | 第51-53页 |
| （三）Tβ4 提高肝癌细胞抵抗失巢凋亡能力的机制的初步研究 | 第53-55页 |
| 三、讨论 | 第55-60页 |
| （一）Tβ4 对肝癌细胞增殖、迁移、侵袭能力的影响 | 第55-57页 |
| （二）Tβ4 提高肝癌细胞抵抗失巢凋亡的能力 | 第57-60页 |
| 全文小结 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-66页 |
| 综述 | 第66-77页 |
| 参考文献 | 第73-77页 |
| 在读期间参加科研工作和发表论文情况 | 第77-78页 |
| 致谢 | 第78页 |
