羊口疮病毒PCR检测方法的建立与应用
| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-11页 |
| 文献综述 | 第11-21页 |
| 第一章 羊口疮病毒的研究概况 | 第11-21页 |
| ·前言 | 第11页 |
| ·病原学 | 第11-12页 |
| ·病原学 | 第11页 |
| ·病毒基因组 | 第11-12页 |
| ·流行病学 | 第12-13页 |
| ·宿主范围 | 第12-13页 |
| ·流行情况 | 第13页 |
| ·临床症状 | 第13-14页 |
| ·病毒免疫逃避机制与宿主抗病毒机制 | 第14-17页 |
| ·致病机制 | 第14页 |
| ·病毒免疫逃避机制 | 第14-16页 |
| ·宿主抗病毒机制 | 第16-17页 |
| ·宿主免疫反应 | 第17页 |
| ·检测方法 | 第17-21页 |
| ·电子显微镜镜检查 | 第18页 |
| ·免疫电子显微镜检查 | 第18页 |
| ·组织病理学 | 第18页 |
| ·病毒分离 | 第18-19页 |
| ·病毒中和试验和补体结合试验(CFT) | 第19页 |
| ·ELISA | 第19页 |
| ·Western blotting | 第19页 |
| ·PCR | 第19页 |
| ·Real-time PCR | 第19-20页 |
| ·限制性内切酶片段长度多态性 | 第20-21页 |
| 试验研究 | 第21-38页 |
| 第二章 羊口疮病毒的分离 | 第21-25页 |
| ·材料 | 第21-22页 |
| ·主要试剂 | 第21页 |
| ·主要仪器 | 第21页 |
| ·主要溶液及配方 | 第21-22页 |
| ·方法 | 第22-23页 |
| ·牛睾丸原代细胞的制备与培养 | 第22-23页 |
| ·羊口疮病毒的分离与培养 | 第23页 |
| ·结果 | 第23-24页 |
| ·犊牛睾丸细胞的培养 | 第23页 |
| ·细胞病变的观察 | 第23-24页 |
| ·讨论 | 第24页 |
| ·小结 | 第24-25页 |
| 第三章 羊口疮病原多重 PCR 检测方法的建立 | 第25-33页 |
| ·材料 | 第25-26页 |
| ·主要试剂 | 第25页 |
| ·主要仪器 | 第25页 |
| ·主要溶液配方 | 第25-26页 |
| ·方法 | 第26-29页 |
| ·试剂盒扩增基因的选择 | 第26页 |
| ·引物设计 | 第26页 |
| ·单基因 PCR 扩增体系建立 | 第26-27页 |
| ·多重 PCR 反应体系的建立 | 第27-29页 |
| ·结果 | 第29-31页 |
| ·单个基因的 PCR 扩增体系 | 第29页 |
| ·多重 PCR 反应体系的建立 | 第29-31页 |
| ·讨论 | 第31-32页 |
| ·多重 PCR 扩增基因的选择 | 第31-32页 |
| ·检测引物的设计 | 第32页 |
| ·多重 PCR 反应条件的优化 | 第32页 |
| ·小结 | 第32-33页 |
| 第四章 我国奶山羊重要养殖地区羊口疮病毒的检测 | 第33-38页 |
| ·材料 | 第33-34页 |
| ·样品采集 | 第33页 |
| ·主要试剂 | 第33页 |
| ·主要仪器 | 第33页 |
| ·主要溶液配方 | 第33-34页 |
| ·方法 | 第34-35页 |
| ·样品的处理 | 第34页 |
| ·DNA 模版的制备 | 第34-35页 |
| ·样品的检测 | 第35页 |
| ·数据分析 | 第35页 |
| ·结果 | 第35-36页 |
| ·血液样品检测结果 | 第35-36页 |
| ·棉拭子样品检测结果 | 第36页 |
| ·讨论 | 第36-37页 |
| ·小结 | 第37-38页 |
| 结论 | 第38-39页 |
| 参考文献 | 第39-45页 |
| 致谢 | 第45-46页 |
| 作者简介 | 第46页 |
