干扰Cyt-c表达对AfMNPV诱导斜纹夜蛾细胞凋亡的影响
| 中文摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 1. 前言 | 第11-22页 |
| ·RNAI简介 | 第11-12页 |
| ·RNAi的概述 | 第11-12页 |
| ·RNAi的作用机制 | 第12页 |
| ·RNAI的应用及未来需要解决的问题 | 第12-14页 |
| ·RNAi在线虫和果蝇研究方面的应用 | 第13页 |
| ·RNAi在农作物方面的应用 | 第13页 |
| ·RNAi在病毒和害虫控制的应用 | 第13页 |
| ·RNAi在医学方面的应用 | 第13-14页 |
| ·RNAi未来需要解决的问题 | 第14页 |
| ·细胞凋亡的概述 | 第14页 |
| ·细胞凋亡的机制 | 第14-17页 |
| ·外部通路(死亡受体通路) | 第15页 |
| ·内部通路(线粒体通路) | 第15-16页 |
| ·执行通路 | 第16-17页 |
| ·穿孔素/颗粒酶通路 | 第17页 |
| ·细胞凋亡的检测 | 第17-19页 |
| ·显微镜检测法 | 第17-18页 |
| ·DNA降解 | 第18页 |
| ·流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第18页 |
| ·caspase的活性检测 | 第18页 |
| ·核酸酶分析 | 第18-19页 |
| ·细胞凋亡与医学 | 第19页 |
| ·细胞色素C与昆虫细胞凋亡 | 第19-21页 |
| ·本实验的研究背景、目的 | 第21-22页 |
| 2. 实验材料 | 第22-25页 |
| ·实验试剂 | 第22-23页 |
| ·细胞培养基 | 第22页 |
| ·病毒 | 第22页 |
| ·细菌培养培养基 | 第22-23页 |
| ·细胞系、病毒、质粒和菌株 | 第23页 |
| ·酶及其它常规试剂 | 第23页 |
| ·常用溶液及配制 | 第23-24页 |
| ·实验所用仪器 | 第24-25页 |
| 3. 实验方法 | 第25-28页 |
| ·CYT-C DSRNA的合成 | 第25页 |
| ·EGFP DSRNA的合成 | 第25-27页 |
| ·质粒提取 | 第25页 |
| ·PCR扩增 | 第25-26页 |
| ·pLITMUS-eGFP的构建 | 第26页 |
| ·阳性克隆的筛选 | 第26-27页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第26页 |
| ·重组质粒的转化 | 第26页 |
| ·阳性克隆的鉴定 | 第26-27页 |
| ·dsRNA的合成 | 第27页 |
| ·细胞学形态观察 | 第27页 |
| ·DNA电泳 | 第27页 |
| ·流式细胞仪检测 | 第27页 |
| ·CASPASE9活性的检测 | 第27-28页 |
| 4. 实验结果 | 第28-34页 |
| ·CYT-C DSRNA的合成 | 第28页 |
| ·EGFP DSRNA的合成 | 第28-30页 |
| ·eGFP的制备 | 第28-29页 |
| ·重组质粒pLITMUS-eGFP的构建 | 第29页 |
| ·eGFP dsRNA的合成 | 第29-30页 |
| ·细胞形态观察 | 第30-31页 |
| ·DNA电泳 | 第31页 |
| ·流式细胞仪检测细胞凋亡率 | 第31-33页 |
| ·CASPASE-9活性的测定 | 第33-34页 |
| 5. 讨论 | 第34-36页 |
| 参考文献 | 第36-41页 |
| 致谢 | 第41页 |
