中文摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-12页 |
缩略词表 | 第12-13页 |
前言 | 第13-15页 |
第一部分:发形霞水母触手cDNA文库的构建分析及分子重组表达 | 第15-50页 |
研究路线 | 第16-17页 |
一、 发形霞水母触手cDNA文库的构建及分析 | 第17-31页 |
(一) 材料 | 第17-18页 |
(二) 方法 | 第18-22页 |
1、 总RNA抽提 | 第18页 |
2、 mRNA分离 | 第18-19页 |
3、 cDNA合成 | 第19-21页 |
4、 载体连接及转化 | 第21页 |
5、 阳性菌筛选(蓝白斑筛选) | 第21-22页 |
6、 文库质量评价 | 第22页 |
7、 cDNA文库测序 | 第22页 |
8、 cDNA文库分析 | 第22页 |
(三) 结果 | 第22-30页 |
1、 总RNA抽提 | 第22-23页 |
2、 mRNA分离 | 第23页 |
3、 cDNA纯化 | 第23-24页 |
4、 文库质量评价 | 第24页 |
5、 cDNA文库序列分布 | 第24-25页 |
6、 Gene ontology注释 | 第25页 |
7、 Pathway分析 | 第25-30页 |
(四) 讨论 | 第30-31页 |
二、 发形霞水母触手功能基因序列的序列分析及重组表达 | 第31-50页 |
(一) 材料 | 第31-33页 |
(二) 方法 | 第33-39页 |
1、 cDNA文库功能基因序列的筛选(结合纯化) | 第33页 |
2、 功能基因的序列分析 | 第33页 |
3、 功能基因的重组表达 | 第33-39页 |
(三) 结果 | 第39-48页 |
1、 功能基因的筛选 | 第39-40页 |
2、 功能基因的序列分析 | 第40-45页 |
3、 水母GDI基因序列重组表达 | 第45-48页 |
(四) 讨论 | 第48-50页 |
第二部分:发形霞水母触手蛋白质组研究 | 第50-85页 |
研究路线 | 第51-52页 |
(一) 材料 | 第52-53页 |
(二) 方法 | 第53-55页 |
1、 C.capillata触手总蛋白提取 | 第53页 |
2、 蛋白浓度检测(Bradford法) | 第53页 |
3、 SDSPAGE电泳 | 第53页 |
4、 胶内酶解 | 第53-54页 |
5、 蛋白质鉴定 | 第54页 |
6、 蛋白功能注释 | 第54页 |
7、 综合分析 | 第54-55页 |
(三) 结果 | 第55-82页 |
1、 蛋白浓度检测(Bradford法) | 第55页 |
2、 SDSPAGE蛋白分离 | 第55-56页 |
3、 质谱分析蛋白 | 第56页 |
4、 质量控制 | 第56-58页 |
5、 蛋白鉴定 | 第58-60页 |
6、 蛋白功能注释 | 第60-71页 |
7、 蛋白组综合分析 | 第71-82页 |
(四) 讨论 | 第82-85页 |
全文总结 | 第85-86页 |
综述 | 第86-94页 |
参考文献 | 第93-94页 |
附录 | 第94-95页 |
参考文献 | 第95-99页 |
致谢 | 第99页 |