| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 缩写及符号说明 | 第8-12页 |
| 1 前言 | 第12-19页 |
| ·本研究课题的学术背景及理论与现实意义 | 第12-13页 |
| ·学术背景 | 第12页 |
| ·理论与现实意义 | 第12-13页 |
| ·植物生物反应器的优缺点 | 第13-15页 |
| ·国内外研究进展 | 第15-16页 |
| ·油体蛋白表达系统 | 第16-17页 |
| ·神经保护肽humanin概述 | 第17-18页 |
| ·本课题的内容及意义 | 第18-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-34页 |
| ·植物、质粒及菌种材料 | 第19页 |
| ·各类化学材料和各种培养 | 第19-23页 |
| ·各种试剂盒、酶制品、抗生素和激素 | 第19页 |
| ·各种培养基 | 第19-20页 |
| ·实验中各种母液的配制 | 第20-23页 |
| ·主要的仪器设备及引物序列 | 第23-25页 |
| ·实验方法 | 第25-34页 |
| ·神经保护肽Humanin编码基因的合成 | 第25-26页 |
| ·Humanin片段的检测及回收 | 第26页 |
| ·回收片段与T载体的连接 | 第26页 |
| ·大肠杆菌感受态(DH5α)的制备 | 第26-27页 |
| ·连接产物转化大肠杆菌DH5α | 第27页 |
| ·挑取单克隆及阳性克隆鉴定 | 第27页 |
| ·阳性克隆质粒的提取 | 第27-28页 |
| ·pCAMBIA2300-Humanin中间载体的构建 | 第28页 |
| ·pCAMBIA 2300-oleosin-Humanin植物表达载体的构建 | 第28-29页 |
| ·pCAMBIA2300-35s-Aholeosin-Humanin植物表达载体的构建 | 第29-30页 |
| ·植物表达载体pCAMBIA1301-oleosin-Humanin-GUS和pCAMBIA1302-oleosin-Humanin-GFP的构建 | 第30页 |
| ·农杆菌感受态的制备 | 第30-31页 |
| ·农杆菌的转化 | 第31页 |
| ·转基因烟草的获得 | 第31-32页 |
| ·转基因烟草DNA的提取 | 第32页 |
| ·转基因烟草阳性植株的鉴定 | 第32页 |
| ·RNA的提取 | 第32-33页 |
| ·RNA的纯化 | 第33页 |
| ·RNA反转录成cDNA | 第33页 |
| ·Humanin基因在转基因烟草中RNA水平的表达 | 第33-34页 |
| ·纯合体的筛选 | 第34页 |
| ·转基因种子的GUS染色结果 | 第34页 |
| 3 结果与分析 | 第34-56页 |
| ·植物表达载体pCAMBIA2300-oleosin-Humanin的构建 | 第34-38页 |
| ·神经保护肽Humanin基因的合成 | 第36-37页 |
| ·pCAMBIA2300-Humanin载体的构建 | 第37页 |
| ·pCAMBIA2300-oleosin-Humanin载体的构建 | 第37-38页 |
| ·花生油体蛋白及融合蛋白分析 | 第38-42页 |
| ·花生油体蛋白分析 | 第38-40页 |
| ·花生油体蛋白与Humanin融合蛋白的分析 | 第40-41页 |
| ·花生油体蛋白与humanin融合蛋白的疏水性分析 | 第41-42页 |
| ·植物表达载体pCAMBIA2300-35S-Aholeosin-Humanin的构建 | 第42-44页 |
| ·目的片段的扩增 | 第42-43页 |
| ·pCAMBIA2300-35S-Aholeosin-Humanin的构建 | 第43-44页 |
| ·植物表达载体pCAMBIA1301-oleosin-Humanin-GUS和pCAMBIA1302-oleosin-Humanin-GFP的构建 | 第44-48页 |
| ·目的片段oleosin-Humanin的扩增 | 第46-47页 |
| ·pCAMBIA1301-oleosin-Humanin-GUS和pCAMBIA1302 -oleosin-Humanin-GFP的构建 | 第47-48页 |
| ·转基因烟草植株的检测 | 第48-56页 |
| ·转基因植株的获得 | 第48-49页 |
| ·提取烟草叶片DNA筛选转基因阳性烟草株系 | 第49-50页 |
| ·RNA水平检测外源蛋白Humanin的表达 | 第50-54页 |
| ·植物表达载体pCAMBIA1301-oleosin-Humanin-GUS转基因株系的检测 | 第54-55页 |
| ·转基因烟草纯合体的筛选 | 第55-56页 |
| 4 结论与讨论 | 第56-59页 |
| ·油体蛋白体系表达外源蛋白的有效性 | 第56-57页 |
| ·花生油体蛋白基因AhOLEO-17.7的特征 | 第57页 |
| ·研究中所用启动子的选择 | 第57页 |
| ·下一步的工作计划 | 第57-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-64页 |
| 附录 | 第64页 |
