| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-8页 |
| 中英文缩略词 | 第8-9页 |
| 第1章 引言 | 第9-12页 |
| 第2章 材料 | 第12-17页 |
| ·实验细胞来源 | 第12页 |
| ·主要试剂 | 第12-13页 |
| ·主要实验设备 | 第13-14页 |
| ·主要试剂配制 | 第14-17页 |
| 第3章 方法 | 第17-27页 |
| ·HepG2 细胞培养 | 第17-18页 |
| ·细胞复苏 | 第17页 |
| ·细胞传代 | 第17-18页 |
| ·细胞冻存 | 第18页 |
| ·siRNA 的设计与合成 | 第18页 |
| ·实验分组 | 第18-19页 |
| ·HepG2 细胞的转染 | 第19页 |
| ·RT-PCR 检测转染后 BMPR-ⅡmRNA 水平的表达 | 第19-22页 |
| ·总 RNA 提取 | 第19-20页 |
| ·RNA 质量鉴定 | 第20页 |
| ·RNA 逆转录成 cDNA | 第20页 |
| ·PCR 扩增 | 第20-21页 |
| ·电泳及琼脂糖凝胶分析 | 第21-22页 |
| ·Western blot 检测转染后 BMPR-Ⅱ蛋白水平的表达 | 第22-25页 |
| ·细胞总蛋白的提取 | 第22页 |
| ·SDS-PAGE 电泳 | 第22-23页 |
| ·转膜 | 第23-24页 |
| ·封闭 | 第24页 |
| ·免疫反应 | 第24页 |
| ·化学发光法，显影，定影 | 第24页 |
| ·凝胶图像分析 | 第24-25页 |
| ·通过 RT-PCR 及 Western blot 检测，筛选最佳 siRNA 干扰片段 | 第25页 |
| ·MTT 比色法检测 siRNA 抑制 BMPR-Ⅱ表达对各组 HepG2 细胞生长的抑制作用 | 第25页 |
| ·siRNA 抑制 BMPR-Ⅱ表达对各组 HepG2 细胞体外侵袭能力的影响（Transwell 实验） | 第25-26页 |
| ·统计学分析 | 第26-27页 |
| 第4章 结果 | 第27-32页 |
| ·siRNA 转染 HepG2 细胞条件及荧光检测转染效率 | 第27页 |
| ·siRNA- BMPR-Ⅱ对 HepG2 细胞 BMPR-Ⅱ表达的影响 | 第27-29页 |
| ·半定量 RT-PCR 检测各组 BMPR-ⅡmRNA 的表达 | 第27-28页 |
| ·Western blot 检测各组 BMPR-Ⅱ蛋白的表达 | 第28-29页 |
| ·siRNA 抑制 BMPR-Ⅱ表达对 HepG2 细胞贴壁生长及细胞形态的影响 | 第29页 |
| ·MTT 比色法检测 siRNA 抑制 BMPR-Ⅱ表达对 HepG2 细胞生长的影响 | 第29-30页 |
| ·siRNA 抑制 BMPR-Ⅱ表达对 HepG2 细胞侵袭能力的影响 | 第30-32页 |
| 第5章 讨论 | 第32-36页 |
| 第6章 结论及展望 | 第36-37页 |
| ·结论 | 第36页 |
| ·展望 | 第36-37页 |
| 致谢 | 第37-38页 |
| 参考文献 | 第38-41页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第41-42页 |
| 综述 | 第42-48页 |
| 参考文献 | 第46-48页 |
