| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-9页 |
| 第一部分 引言 | 第9-13页 |
| 第一章 文献综述和试验目的 | 第9-13页 |
| 1 文献综述 | 第9-11页 |
| ·疱疹病毒R2基因及其编码蛋白 | 第9-11页 |
| ·疱疹病毒R2基因 | 第9-10页 |
| ·疱疹病毒R2蛋白 | 第10-11页 |
| ·鸭瘟病毒 | 第11页 |
| 2 实验目的 | 第11-13页 |
| 第二部分 试验 | 第13-37页 |
| 第二章 鸭瘟病毒R2基因生物信息学分析 | 第13-20页 |
| 1 材料 | 第13-14页 |
| 2 方法 | 第14-15页 |
| 3 结果 | 第15-19页 |
| ·DPV R2基因所编码的氨基酸序列序列相似性比较及进化关系分析 | 第15-16页 |
| ·DPV R2蛋白的理化性质分析 | 第16-17页 |
| ·DPV R2蛋白的结构功能分析 | 第17-18页 |
| ·DPV R2蛋白的亚细胞定位分析 | 第18页 |
| ·DPV R2蛋白的二级结构分析 | 第18-19页 |
| 4 讨论 | 第19-20页 |
| 第三章 鸭瘟病毒R2重组蛋白表达及多克隆抗体制备 | 第20-29页 |
| 1 材料 | 第20-21页 |
| ·毒株、载体、菌株、鸭胚和动物 | 第20页 |
| ·主要试剂 | 第20页 |
| ·主要仪器设备 | 第20-21页 |
| 2 方法 | 第21-25页 |
| ·引物合成 | 第21页 |
| ·扩增鸭瘟病毒R2基因 | 第21页 |
| ·鸭瘟病毒DNA提取 | 第21页 |
| ·扩增鸭瘟病毒R2基因 | 第21页 |
| ·构建及鉴定pMD20-T/R2克隆载体 | 第21-22页 |
| ·构建pMD20-T/R2克隆载体 | 第21-22页 |
| ·鉴定pMD20-T/R2克隆载体 | 第22页 |
| ·构建及鉴定pET32a/R2表达载体 | 第22页 |
| ·构建pET32a/R2表达载体 | 第22页 |
| ·鉴定pET32a/R2表达载体 | 第22页 |
| ·表达及纯化DPV R2重组蛋白 | 第22-24页 |
| ·转化pET32a/R2表达载体 | 第22-23页 |
| ·表达重组蛋白DPV R2 | 第23页 |
| ·检测重组蛋白DPV R2的反应原性 | 第23页 |
| ·纯化重组蛋白DPV R2 | 第23-24页 |
| ·制备及纯化兔抗重组蛋白DPV R2多克隆抗体 | 第24-25页 |
| ·制各兔抗重组蛋白DPV R2多克隆抗体 | 第24页 |
| ·纯化兔抗重组蛋白DPV R2多克隆抗体 | 第24-25页 |
| 3 结果 | 第25-28页 |
| ·鸭瘟病毒R2基因的扩增 | 第25页 |
| ·克隆载体pMD20-T/R2的鉴定 | 第25页 |
| ·表达载体pET32a/R2的鉴定 | 第25-26页 |
| ·重组蛋白DPV R2的表达及纯化 | 第26页 |
| ·重组蛋白DPV R2的反应原性检测 | 第26页 |
| ·兔抗重组蛋白DPV R2多克隆抗体效价测定及纯化 | 第26-28页 |
| 4 讨论 | 第28-29页 |
| 第四章 鸭瘟病毒R2基因转录及表达时相研究 | 第29-37页 |
| 1 材料 | 第29-30页 |
| ·毒株、菌株、抗体和鸭胚 | 第29页 |
| ·主要试剂 | 第29页 |
| ·主要仪器设备 | 第29-30页 |
| 2 方法 | 第30-32页 |
| ·引物合成 | 第30页 |
| ·鸭瘟病毒R2基因转录类型研究 | 第30-31页 |
| ·细胞培养及鸭瘟病毒RNA提取 | 第30页 |
| ·反转录制备cDNA | 第30-31页 |
| ·普通PCR检测样品 | 第31页 |
| ·鸭瘟病毒R2基因转录时相研究 | 第31页 |
| ·实时荧光定量PCR标准曲线制作 | 第31页 |
| ·鸭瘟病毒R2基因转录时相研究 | 第31页 |
| ·鸭瘟病毒R2基因表达时相研究 | 第31-32页 |
| 3 结果 | 第32-35页 |
| ·药物抑制试验鉴定鸭瘟病毒R2基因转录类型 | 第32页 |
| ·实时荧光定量PCR标准曲线制作 | 第32-33页 |
| ·鸭瘟病毒R2基因转录时相分析 | 第33-35页 |
| ·鸭瘟病毒R2基因表达时相分析 | 第35页 |
| 4 讨论 | 第35-37页 |
| 第三部分 结论 | 第37-38页 |
| 第四部分 参考文献 | 第38-43页 |
| 致谢 | 第43-44页 |
| 作者简介及攻读硕士学位期间论文发表 | 第44页 |