摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
1 前言 | 第10-19页 |
·西瓜细菌性果斑病概况 | 第10-12页 |
·病原菌的侵染和传播 | 第11-12页 |
·寄主和分布 | 第12页 |
·细菌在寄主体内定殖的研究概况 | 第12-15页 |
·细菌的侵染定殖过程研究 | 第12-13页 |
·细菌定殖检测方法研究 | 第13-15页 |
·抗生素标记法 | 第13-14页 |
·免疫学方法 | 第14页 |
·DNA 和 RNA 探针法 | 第14-15页 |
·外源基因标记法 | 第15页 |
·绿色荧光蛋白作为报告基因在病原菌侵染定殖研究中的应用 | 第15-18页 |
·绿色荧光蛋白及其特点 | 第15-16页 |
·GFP 标记细菌在植物中侵染途径的研究 | 第16-17页 |
·GFP 标记细菌在植物体内的定殖研究 | 第17-18页 |
·本研究的目的和意义 | 第18-19页 |
2 西瓜不同品种感病性测定 | 第19-23页 |
·材料与方法 | 第19-21页 |
·实验材料 | 第19页 |
·实验方法 | 第19-21页 |
·西瓜苗的培育 | 第19页 |
·菌株培养 | 第19-20页 |
·接菌方法 | 第20-21页 |
·结果与分析 | 第21-23页 |
3 绿色荧光蛋白表达载体的构建 | 第23-33页 |
·材料 | 第23-24页 |
·实验菌株和质粒 | 第23-24页 |
·主要培养基 | 第24页 |
·主要试剂 | 第24页 |
·主要仪器 | 第24页 |
·实验方法 | 第24-29页 |
·质粒提取 | 第24-25页 |
·质粒 T-GFP2011 的构建 | 第25-28页 |
·质粒 PS4GFP 和 T-gfp 的双酶切 | 第25-26页 |
·酶切产物的回收 | 第26页 |
·感受态细胞的制备 | 第26-27页 |
·回收片段的连接、转化及鉴定 | 第27-28页 |
·质粒 Pkk-GFP 的构建 | 第28-29页 |
·质粒 PKK223-3 和 T-GFP2011 的双酶切 | 第28-29页 |
·目的片段的回收、连接、转化和鉴定 | 第29页 |
·结果与分析 | 第29-33页 |
·质粒 T-GFP2011 的构建 | 第29-31页 |
·质粒 PKK-GFP 的构建 | 第31-33页 |
4 西瓜果斑病菌 A13 菌株的荧光标记 | 第33-48页 |
·材料 | 第33-34页 |
·实验菌株和质粒 | 第33页 |
·主要培养基 | 第33页 |
·主要试剂 | 第33-34页 |
·实验方法 | 第34-39页 |
·西瓜果斑病菌 A13 转化体系的优化 | 第34-35页 |
·培养基对转化效率的影响 | 第34页 |
·CaCl_2浓度对转化效率的影响 | 第34页 |
·MgCl_2浓度对转化效率的影响 | 第34-35页 |
·培养温度对转化效率的影响 | 第35页 |
·菌液浓度对转化效率的影响 | 第35页 |
·西瓜果斑病 GFP 基因的标记 | 第35-37页 |
·转化子的验证 | 第35-37页 |
·转化子的生物学测定 | 第37-39页 |
·转化子菌落形态及生长速度的测定 | 第37-38页 |
·转化子遗传稳定性测定 | 第38页 |
·转化子致病能力测定 | 第38-39页 |
·结果 | 第39-48页 |
·西瓜果斑病菌 A13 转化体系的优化 | 第39-41页 |
·GFP 基因的标记 | 第41-44页 |
·标记菌株菌落形态及生长速度的测定 | 第44-45页 |
·标记菌株遗传稳定性测定 | 第45-46页 |
·标记菌株致病性测定 | 第46-48页 |
5 标记菌株在西瓜体内的定殖动态 | 第48-56页 |
·材料 | 第48页 |
·供试西瓜与菌株 | 第48页 |
·实验试剂 | 第48页 |
·实验仪器 | 第48页 |
·实验方法 | 第48-50页 |
·供试材料的接种 | 第48-49页 |
·标记菌株在西瓜内的定殖观察 | 第49页 |
·标记菌株 A13-PK-GFP 的分离 | 第49-50页 |
·结果与分析 | 第50-56页 |
·标记菌株 A13-PK-GFP 在西瓜根部和子叶内的侵染过程 | 第50-52页 |
·标记菌株 A13-PK-GFP 在西瓜体内的定殖动态 | 第52-56页 |
6 小结与讨论 | 第56-58页 |
参考文献 | 第58-64页 |
致谢 | 第64页 |