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西瓜细菌性果斑病菌的GFP基因标记及在西瓜体内的定殖

摘要第1-8页
Abstract第8-10页
1 前言第10-19页
   ·西瓜细菌性果斑病概况第10-12页
     ·病原菌的侵染和传播第11-12页
     ·寄主和分布第12页
   ·细菌在寄主体内定殖的研究概况第12-15页
     ·细菌的侵染定殖过程研究第12-13页
     ·细菌定殖检测方法研究第13-15页
       ·抗生素标记法第13-14页
       ·免疫学方法第14页
       ·DNA 和 RNA 探针法第14-15页
       ·外源基因标记法第15页
   ·绿色荧光蛋白作为报告基因在病原菌侵染定殖研究中的应用第15-18页
     ·绿色荧光蛋白及其特点第15-16页
     ·GFP 标记细菌在植物中侵染途径的研究第16-17页
     ·GFP 标记细菌在植物体内的定殖研究第17-18页
   ·本研究的目的和意义第18-19页
2 西瓜不同品种感病性测定第19-23页
   ·材料与方法第19-21页
     ·实验材料第19页
     ·实验方法第19-21页
       ·西瓜苗的培育第19页
       ·菌株培养第19-20页
       ·接菌方法第20-21页
   ·结果与分析第21-23页
3 绿色荧光蛋白表达载体的构建第23-33页
   ·材料第23-24页
     ·实验菌株和质粒第23-24页
     ·主要培养基第24页
     ·主要试剂第24页
     ·主要仪器第24页
   ·实验方法第24-29页
     ·质粒提取第24-25页
     ·质粒 T-GFP2011 的构建第25-28页
       ·质粒 PS4GFP 和 T-gfp 的双酶切第25-26页
       ·酶切产物的回收第26页
       ·感受态细胞的制备第26-27页
       ·回收片段的连接、转化及鉴定第27-28页
     ·质粒 Pkk-GFP 的构建第28-29页
       ·质粒 PKK223-3 和 T-GFP2011 的双酶切第28-29页
       ·目的片段的回收、连接、转化和鉴定第29页
   ·结果与分析第29-33页
     ·质粒 T-GFP2011 的构建第29-31页
     ·质粒 PKK-GFP 的构建第31-33页
4 西瓜果斑病菌 A13 菌株的荧光标记第33-48页
   ·材料第33-34页
     ·实验菌株和质粒第33页
     ·主要培养基第33页
     ·主要试剂第33-34页
   ·实验方法第34-39页
     ·西瓜果斑病菌 A13 转化体系的优化第34-35页
       ·培养基对转化效率的影响第34页
       ·CaCl_2浓度对转化效率的影响第34页
       ·MgCl_2浓度对转化效率的影响第34-35页
       ·培养温度对转化效率的影响第35页
       ·菌液浓度对转化效率的影响第35页
     ·西瓜果斑病 GFP 基因的标记第35-37页
       ·转化子的验证第35-37页
     ·转化子的生物学测定第37-39页
       ·转化子菌落形态及生长速度的测定第37-38页
       ·转化子遗传稳定性测定第38页
       ·转化子致病能力测定第38-39页
   ·结果第39-48页
     ·西瓜果斑病菌 A13 转化体系的优化第39-41页
     ·GFP 基因的标记第41-44页
     ·标记菌株菌落形态及生长速度的测定第44-45页
     ·标记菌株遗传稳定性测定第45-46页
     ·标记菌株致病性测定第46-48页
5 标记菌株在西瓜体内的定殖动态第48-56页
   ·材料第48页
     ·供试西瓜与菌株第48页
     ·实验试剂第48页
     ·实验仪器第48页
   ·实验方法第48-50页
     ·供试材料的接种第48-49页
     ·标记菌株在西瓜内的定殖观察第49页
     ·标记菌株 A13-PK-GFP 的分离第49-50页
   ·结果与分析第50-56页
     ·标记菌株 A13-PK-GFP 在西瓜根部和子叶内的侵染过程第50-52页
     ·标记菌株 A13-PK-GFP 在西瓜体内的定殖动态第52-56页
6 小结与讨论第56-58页
参考文献第58-64页
致谢第64页

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