| 中文摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-12页 |
| 第一章 引言 | 第12-19页 |
| ·铜绿假单胞菌 | 第12-14页 |
| ·铜绿假单胞菌的Ⅲ型分泌系统 | 第14-17页 |
| ·机械敏感性通道(Mechanosensitive ion channels;MS) | 第17-18页 |
| ·研究内容及意义 | 第18-19页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第19-37页 |
| ·实验材料 | 第19-23页 |
| ·菌株、质粒和引物 | 第19-20页 |
| ·培养基及抗生素浓度 | 第20-22页 |
| ·试剂 | 第22页 |
| ·仪器 | 第22-23页 |
| ·实验方法 | 第23-37页 |
| ·质粒提取 | 第23页 |
| ·琼脂糖凝胶DNA片段纯化回收 | 第23-24页 |
| ·DNA酶切和连接反应 | 第24页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第24-25页 |
| ·PAO感受态细胞的快速制备 | 第25页 |
| ·电转化 | 第25页 |
| ·聚合酶链式反应(PCR)的反应体系 | 第25-26页 |
| ·三亲株杂交 | 第26页 |
| ·基因敲除 | 第26-29页 |
| ·基因过表达 | 第29-31页 |
| ·基因互补 | 第31页 |
| ·基因表达报道菌株的构建 | 第31-32页 |
| ·基因表达水平的测定 | 第32页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第32-33页 |
| ·丛动实验(Swarming mobility) | 第33页 |
| ·绿脓菌素的测定 | 第33页 |
| ·生物被膜的测定 | 第33-34页 |
| ·转座突变 | 第34页 |
| ·随机PCR | 第34-35页 |
| ·转座子插入位点在铜绿假单胞菌全基因组上的确定 | 第35页 |
| ·TCA法提取胞内蛋白 | 第35-36页 |
| ·渗透压通过MS通道影响生存能力实验 | 第36页 |
| ·细胞计数 | 第36-37页 |
| 第三章 结果 | 第37-56页 |
| ·PA3284基因的功能研究 | 第37-41页 |
| ·PA3284基因的相关信息 | 第37页 |
| ·突变体PAO1(ΔPA3284)的构建 | 第37-38页 |
| ·PA3283过表达菌株的构建 | 第38-40页 |
| ·PA3281-3284过表达菌株的构建 | 第40-41页 |
| ·PA1775基因的功能研究 | 第41-56页 |
| ·PA1775基因研究根据的来源 | 第41-44页 |
| ·PA1775基因的相关信息 | 第44-45页 |
| ·插入敲除突变体PAO1(ΔPA1775)的构建 | 第45-46页 |
| ·PA1775转座突变体的互补实验 | 第46-51页 |
| ·缺失敲除突变体PAO1(ΔPA1775)的构建 | 第51-54页 |
| ·PA1775启动子-报道子菌株的构建 | 第54-55页 |
| ·PA1775与渗透压的关系 | 第55-56页 |
| 第四章 结论 | 第56-59页 |
| ·PA3284基因对Ⅲ型分泌系统的调节 | 第56-57页 |
| ·PA1775基因对Ⅲ型分泌系统的调节 | 第57-59页 |
| 参考文献 | 第59-64页 |
| 致谢 | 第64页 |