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铜绿假单胞菌Ⅲ型分泌系统调控基因的研究

中文摘要第1-5页
Abstract第5-12页
第一章 引言第12-19页
   ·铜绿假单胞菌第12-14页
   ·铜绿假单胞菌的Ⅲ型分泌系统第14-17页
   ·机械敏感性通道(Mechanosensitive ion channels;MS)第17-18页
   ·研究内容及意义第18-19页
第二章 实验材料和方法第19-37页
   ·实验材料第19-23页
     ·菌株、质粒和引物第19-20页
     ·培养基及抗生素浓度第20-22页
     ·试剂第22页
     ·仪器第22-23页
   ·实验方法第23-37页
     ·质粒提取第23页
     ·琼脂糖凝胶DNA片段纯化回收第23-24页
     ·DNA酶切和连接反应第24页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备第24-25页
     ·PAO感受态细胞的快速制备第25页
     ·电转化第25页
     ·聚合酶链式反应(PCR)的反应体系第25-26页
     ·三亲株杂交第26页
     ·基因敲除第26-29页
     ·基因过表达第29-31页
     ·基因互补第31页
     ·基因表达报道菌株的构建第31-32页
     ·基因表达水平的测定第32页
     ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳第32-33页
     ·丛动实验(Swarming mobility)第33页
     ·绿脓菌素的测定第33页
     ·生物被膜的测定第33-34页
     ·转座突变第34页
     ·随机PCR第34-35页
     ·转座子插入位点在铜绿假单胞菌全基因组上的确定第35页
     ·TCA法提取胞内蛋白第35-36页
     ·渗透压通过MS通道影响生存能力实验第36页
     ·细胞计数第36-37页
第三章 结果第37-56页
   ·PA3284基因的功能研究第37-41页
     ·PA3284基因的相关信息第37页
     ·突变体PAO1(ΔPA3284)的构建第37-38页
     ·PA3283过表达菌株的构建第38-40页
     ·PA3281-3284过表达菌株的构建第40-41页
   ·PA1775基因的功能研究第41-56页
     ·PA1775基因研究根据的来源第41-44页
     ·PA1775基因的相关信息第44-45页
     ·插入敲除突变体PAO1(ΔPA1775)的构建第45-46页
     ·PA1775转座突变体的互补实验第46-51页
     ·缺失敲除突变体PAO1(ΔPA1775)的构建第51-54页
     ·PA1775启动子-报道子菌株的构建第54-55页
     ·PA1775与渗透压的关系第55-56页
第四章 结论第56-59页
   ·PA3284基因对Ⅲ型分泌系统的调节第56-57页
   ·PA1775基因对Ⅲ型分泌系统的调节第57-59页
参考文献第59-64页
致谢第64页

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