| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 前言 | 第10-17页 |
| 1 miRNA 的特性和功能 | 第10-11页 |
| 2 miRNA 在细胞凋亡中的作用 | 第11-13页 |
| 3 anisomycin 的结构和功能 | 第13-14页 |
| 4 anisomycin 诱导凋亡的可能机制 | 第14-15页 |
| 5 研究思路与目的 | 第15-17页 |
| 材料和方法 | 第17-33页 |
| 1 主要试剂 | 第17-18页 |
| 2 主要仪器 | 第18页 |
| 3 主要溶液的配制 | 第18-21页 |
| 4 细胞与培养 | 第21页 |
| ·细胞株 | 第21页 |
| ·细胞培养 | 第21页 |
| ·细胞传代 | 第21页 |
| 5 流式细胞术检测细胞凋亡 | 第21-22页 |
| 6 Western Blot | 第22-23页 |
| ·细胞处理 | 第22页 |
| ·蛋白的提取与定量 | 第22页 |
| ·电泳 | 第22-23页 |
| ·转膜 | 第23页 |
| ·抗体结合及显色 | 第23页 |
| 7 报告基因 array 检测凋亡相关转录因子的活性 | 第23-25页 |
| ·质粒转染及细胞处理 | 第23-24页 |
| ·RNA 的提取 | 第24页 |
| ·TF Reporter plate array | 第24-25页 |
| 8 EMSA 检测 AP-1 的 DNA 结合活性 | 第25-28页 |
| ·细胞处理 | 第25页 |
| ·核蛋白的提取 | 第25-26页 |
| ·EMSA 结合反应 | 第26页 |
| ·电泳 | 第26-27页 |
| ·转膜 | 第27页 |
| ·检测 | 第27-28页 |
| 9 miRNA array 检测凋亡相关 miRNA 表达谱 | 第28-29页 |
| ·细胞处理 | 第28页 |
| ·Apoptosis-associated miRNA Plate Array | 第28-29页 |
| 10 qPCR 确定差异表达的 miRNA | 第29-32页 |
| ·逆转录 | 第29-30页 |
| ·q PCR | 第30-32页 |
| 11 let-7c-mimic 和 let-7c-inhibitor 的应用 | 第32页 |
| ·细胞处理及转染 | 第32页 |
| 12 流式细胞术分析 let-7c 在凋亡中的作用 | 第32页 |
| 13 统计学分析 | 第32-33页 |
| 结果 | 第33-43页 |
| 1 anisomycin 诱导 Jurkat T 细胞凋亡 | 第33-34页 |
| 2 anisomycin 上调 P-BCL-XL 和 P-Bim 蛋白的水平 | 第34-36页 |
| ·anisomycin 上调 P-BCL-XL 蛋白表达 | 第34-35页 |
| ·anisomycin 上调 P-Bim 蛋白表达 | 第35-36页 |
| 3 anisomycin 对 Jurkat T 细胞转录因子活性的影响 | 第36-37页 |
| 4 anisomycin 对 AP-1 表达的影响 | 第37-39页 |
| 5 anisomycin 诱导 Jurkat T 细胞 miRNA 差异表达的筛选 | 第39-40页 |
| 6 anisomycin 诱导 Jurkat T 细胞凋亡中差异表达的 miRNA 的确定 | 第40-41页 |
| 7 let-7c-mimic 及其抑制剂对 Jurkat T 细胞内 let-7c 含量的影响 | 第41页 |
| 8 let-7c 在 anisomycin 诱导 Jurkat T 细胞凋亡中的作用 | 第41-42页 |
| 9 let-7c 上调 P-BCL-XL 和 P-Bim 的表达 | 第42-43页 |
| 讨论 | 第43-49页 |
| 1 BCL-XL 与 Bim 参与 anisomycin 诱导的 Jurkat T 细胞凋亡 | 第43-44页 |
| 2 转录因子在 anisomycin 诱导 Jurkat T 细胞凋亡中的作用 | 第44-46页 |
| 3 let-7c 诱导凋亡的可能机制 | 第46-49页 |
| 小结 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-54页 |
| 发表论文 | 第54-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 英文缩略词表 | 第56-57页 |
