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桔小实蝇几丁质合成通路上3个基因的cDNA克隆及功能分析

摘要第1-12页
Abstract第12-16页
第一章 文献综述第16-24页
   ·桔小实蝇概述第16-17页
     ·桔小实蝇的分布、特征及习性第16页
     ·在我国桔小实蝇的为害及治理第16-17页
   ·昆虫几丁质及几丁质合成通路研究概况第17-24页
     ·昆虫几丁质概述第17页
     ·昆虫围食膜第17-18页
     ·昆虫几丁质合成通路第18-19页
     ·昆虫几丁质合成酶第19-22页
     ·昆虫几丁质合成通路葡萄糖-6-磷酸异构酶和UDP-N-乙酰葡糖胺焦磷酸化酶第22-23页
     ·昆虫几丁质合成酶抑制剂第23-24页
前言第24-26页
第二章 桔小实蝇几丁质合成通路上BdCHS2、BdG6PI和BdUAP基因的cDNA全长克隆及序列分析第26-48页
   ·实验材料第26-28页
     ·供试昆虫第26页
     ·主要仪器第26-27页
     ·主要试剂(盒)第27-28页
     ·试剂配制第28页
   ·实验方法第28-36页
     ·桔小实蝇BdCHS2、BdG6PI和BdUAP基因基因克隆引物的设计及克隆策略第28-31页
     ·总RNA提取及第一链cDNA合成第31-33页
     ·PCR扩增第33-34页
     ·PCR产物回收与纯化第34页
     ·PCR产物与载体连接第34页
     ·连接产物的转化第34-35页
     ·蓝白斑筛选及菌液检测第35页
     ·测序第35页
     ·基因序列生物信息学分析第35-36页
   ·结果与分析第36-46页
     ·桔小实蝇BdCHS2、BdG6PI和BdUAP基因cDNA全长序列分析第36-43页
     ·桔小实蝇BdCHS2、BdG6PI和BdUAP基因进化树的构建及分析第43-46页
   ·结论与讨论第46-48页
     ·小结第46-47页
     ·讨论第47-48页
第三章 桔小实蝇几丁质合成通路上BDCHS2、BDG6PI和BDUAP基因的时空表达分析第48-58页
   ·实验材料第48-49页
     ·供试材料第48页
     ·供试药品及主要仪器第48-49页
   ·实验方法第49-52页
     ·桔小实蝇不同组织部位BdCHS2、BdG6PI和BdUAP基因的表达第49-51页
     ·桔小实蝇不同发育阶段BdCHS2、BdG6PI和BdUAP基因的表达第51-52页
   ·结果与分析第52-56页
     ·桔小实蝇BdCHS2、BdG6PI和BdUAP基因不同组织部位的表达分析第52-54页
     ·桔小实蝇BdCHS2、BdG6PI和BdUAP基因在不同发育阶段的表达分析第54-56页
   ·小结与讨论第56-58页
     ·小结第56页
     ·讨论第56-58页
第四章 饥饿饲喂对桔小实蝇幼虫的影响第58-64页
   ·实验材料第58页
     ·供试材料第58页
     ·供试药品及主要仪器第58页
   ·实验方法第58-59页
     ·桔小实蝇饥饿饲喂后BdCHS2、BdG6PI和BdUAP基因表达引物的设计第58页
     ·桔小实蝇饥饿-饲喂方案及中肠的解剖冻存第58-59页
     ·中肠总RNA提取及第一链eDNA合成第59页
     ·qPCR分析饥饿饲喂后BdCHS2、BdG6PI和BdUAP基因的表达第59页
   ·结果与分析第59-61页
     ·桔小实蝇幼虫饥饿-饲喂后BdCHS2基因表达分析第59-60页
     ·桔小实蝇幼虫饥饿-饲喂后BdG6PI基因表达分析第60页
     ·桔小实蝇幼虫饥饿饲喂后BdUAP基因表达分析第60-61页
   ·小结与讨论第61-64页
     ·小结第61页
     ·讨论第61-64页
第五章 抑制剂除虫脲对桔小实蝇初孵幼虫的生物测定及对CHS2的影响第64-68页
   ·实验材料第64页
     ·供试虫源第64页
     ·供试药剂及主要仪器第64页
   ·实验方法第64-65页
     ·除虫脲对桔小实蝇幼虫致死中浓度(LC_(50))的测定第64-65页
     ·不同浓度的除虫脲对桔小实蝇幼虫处理后BdCHS2基因表达量分析第65页
   ·结果与分析第65-66页
     ·除虫脲对桔小实蝇幼虫致死中浓度(LC_(50))测定第65-66页
     ·不同浓度的除虫脲处理后桔小实蝇幼虫BdCHS2基因表达量的分析第66页
   ·小结与讨论第66-68页
     ·小结第66页
     ·讨论第66-68页
第六章 不同发育阶段及饥饿饲喂后中肠几丁质含量测定第68-76页
   ·实验材料第68页
     ·供试虫源第68页
     ·供试试剂及主要仪器第68页
   ·实验方法第68-71页
     ·桔小实蝇幼虫饥饿饲喂及中肠解剖冻存第68-69页
     ·桔小实蝇不同发育阶段虫源收集第69页
     ·几丁质含量测定方法第69-71页
   ·结果与分析第71-74页
     ·几丁质含量测定中葡萄糖胺标准曲线的制作第71-72页
     ·桔小实蝇饥饿-饲喂后中肠几丁质含量的测定第72-73页
     ·桔小实蝇不同发育阶段几丁质含量的测定第73-74页
   ·小结与讨论第74-76页
     ·小结第74页
     ·讨论第74-76页
主要结果、结论与展望第76-78页
 1. 结果和结论第76-77页
 2. 展望第77-78页
参考文献第78-88页
攻读学位期间取得的研究成果第88-90页
致谢第90页

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