| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-15页 |
| 第1章 引言 | 第15-24页 |
| ·概述 | 第15-16页 |
| ·晚期非小细胞肺癌一线含铂两药方案治疗研究 | 第16-21页 |
| ·晚期 NSCLC 一线含铂两药方案治疗概况 | 第16-17页 |
| ·铂类药物耐药机制与凋亡相关因子的相关性 | 第17-21页 |
| ·POTE2γ生物学特性、功能及与肿瘤的关系 | 第21-22页 |
| ·课题研究目的，理论意义和实际应用价值 | 第22-23页 |
| ·实验技术路线 | 第23-24页 |
| 第2章 人肺腺癌顺铂耐药细胞株 A549/DDP 细胞株的建立 | 第24-28页 |
| ·实验材料 | 第24-25页 |
| ·细胞株 | 第24页 |
| ·主要设备和仪器 | 第24-25页 |
| ·主要试剂及配制 | 第25页 |
| ·实验方法 | 第25-27页 |
| ·细胞培养及药物诱导 | 第25-26页 |
| ·体外药物敏感性实验 | 第26-27页 |
| ·结果 | 第27-28页 |
| 第3章 POTE在A549细胞中主要的表达亚型及其在铂类耐药中的作用和机制 | 第28-58页 |
| ·实验材料 | 第28-36页 |
| ·细胞株 | 第28页 |
| ·主要试剂及来源 | 第28-30页 |
| ·药物、溶液配制方法 | 第30-35页 |
| ·实验设备和仪器 | 第35-36页 |
| ·实验方法 | 第36-51页 |
| ·PCR 产物克隆筛选 | 第36-41页 |
| ·细胞株 RNA 提取 | 第36-37页 |
| ·RTPCR | 第37-38页 |
| ·PCR 产物的纯化 | 第38-39页 |
| ·载体的连接与转化 | 第39-40页 |
| ·细菌培养及挑菌 | 第40页 |
| ·质粒的抽提 | 第40-41页 |
| ·PCR 产物的验证 | 第41页 |
| ·DNA 测序及分析 | 第41页 |
| ·细胞总蛋白 Western Blotting | 第41-45页 |
| ·蛋白提取及浓度测定 | 第41-43页 |
| ·SDS-APGE 凝胶电泳 | 第43页 |
| ·转膜 | 第43-44页 |
| ·免疫反应 | 第44页 |
| ·化学发光显影与定影 | 第44页 |
| ·凝胶图像分析 | 第44-45页 |
| ·慢病毒的构建与包装 | 第45-51页 |
| ·分子构建 | 第45-47页 |
| ·小规模慢病毒包装 | 第47页 |
| ·RNAi 干扰评价 | 第47-49页 |
| ·大量病毒包装 | 第49-50页 |
| ·慢病毒感染实验 | 第50-51页 |
| ·结果 | 第51-56页 |
| ·PCR 克隆筛选结果 | 第51-53页 |
| ·Western blot 结果 | 第53-55页 |
| ·慢病毒感染及 Western blot 结果 | 第55-56页 |
| ·讨论 | 第56-58页 |
| 第4章 NSCLC 患者组织 POTE-2γ表达与含铂双药一线化疗疗效的关系 | 第58-68页 |
| ·实验材料 | 第58-60页 |
| ·主要实验试剂及来源 | 第58页 |
| ·主要仪器 | 第58页 |
| ·研究对象 | 第58-60页 |
| ·实验方法 | 第60-62页 |
| ·患者组织标本收集 | 第60页 |
| ·SYBER Green 方法检测患者组织中 POTE-2γ浓度 | 第60-62页 |
| ·统计学分析 | 第62页 |
| ·结果 | 第62-66页 |
| ·患者基线特征 | 第62-63页 |
| ·POTE mRNA表达水平的高低与临床特征的关系 | 第63-64页 |
| ·POTE mRNA表达水平的高低与患者生存期的关系 | 第64-66页 |
| ·讨论 | 第66-68页 |
| 第5章 结论与展望 | 第68-70页 |
| ·结论 | 第68页 |
| ·展望及进一步工作的方向 | 第68-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-79页 |
| 附录 A 中英文词汇表 | 第79-81页 |
| 附录 B 非小细胞肺癌的分期法 | 第81页 |
| 附录 C PS（Performence status）评分表 | 第81-82页 |
| 附录 D 治疗疗效评价标准—RECIST 评价方法 | 第82-83页 |
| 附录 E 攻读学位期间发表论文 | 第83-93页 |
