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趋化因子CCL18、CXCL1促进卵巢癌增殖和转移分子机制初探

主要英文缩写第1-13页
摘要第13-15页
ABSTRACT第15-17页
第一章 趋化因子CCL18、CXCL1促进肿瘤增殖和转移分子机制研究进展第17-41页
 1. 与肿瘤增殖及转移相关的信号通路第17-27页
   ·Notch通路第17-19页
   ·NF-KB通路第19-21页
   ·Janus激酶/信号转导和转录启动因子(JAK-STAT)通路第21-22页
   ·Wnt通路第22-24页
   ·PI3K/AKT通路第24页
   ·RAS/ERK/MARK通路第24-25页
   ·p53信号通路第25-27页
 2. 卵巢癌的浸润转移第27-30页
   ·JAK-STAT信号通路与卵巢癌的关系第27页
   ·Wnt信号通路与卵巢癌的关系第27-28页
   ·MARK信号通路与卵巢癌的关系第28-29页
   ·PI3K/AKT信号通路与卵巢癌的关系第29页
   ·内皮素-1(ET-1)/β抑制蛋白(β-arrestin)与卵巢癌的关系第29-30页
 3. CCL18促增殖和转移分子机制第30-32页
 4. CXCL1促进肿瘤增殖和转移的分子机制第32-33页
 5. 本研究的目的和意义第33-34页
 参考文献第34-41页
第二章 趋化因子CCL18、CXCL1调控趋化因子及受体网络第41-96页
 1. 材料与方法第42-50页
   ·细胞和动物来源第42页
     ·细胞来源第42页
     ·动物来源第42页
   ·仪器和试剂第42-43页
     ·重要仪器第42页
     ·主要试剂第42-43页
     ·部分试剂配置第43页
   ·细胞培养第43页
   ·裸鼠皮下移植瘤模型建立第43-44页
   ·总RNA提取第44页
   ·逆转录第44-45页
   ·引物设计第45-49页
   ·引物检测第49-50页
   ·实时荧光定量PCR第50页
   ·统计方法第50页
 2. 实验结果第50-62页
   ·CCL18调控的全部差异表达趋化因子及受体第50页
   ·CCL18调控的CXC、CC、XC、CX3C各家族趋化因子及受体差异表达的分析第50-56页
     ·CCL18引起XC趋化因子家族的变化第50页
     ·CCL18引起CX3C趋化因子家族的变化第50-51页
     ·CCL18引起CXC趋化因子家族的变化第51-52页
     ·CCL18引起CC趋化因子家族的变化第52-55页
     ·CCL18趋化因子及受体网络分析第55-56页
   ·CXCL1调控的全部差异表达趋化因子及受体第56-57页
   ·CXCL1调控的CXC、CC、XC、CX3C各家族趋化因子及受体差异表达的分析第57-62页
     ·CXCL1引起XC趋化因子家族的变化第57页
     ·CXCL1引起CX3C趋化因子家族的变化第57页
     ·CXCL1引起CXC趋化因子家族的变化第57-59页
     ·CXCL1引起CC趋化因子家族的变化第59-61页
     ·CXCL1趋化因子及受体网络分析第61-62页
 3. 讨论第62-73页
   ·CCL18调控的差异表达趋化因子及相应受体第62-68页
   ·CXCL1调控的差异表达趋化因子及相应受体第68-72页
   ·CCL18和CXCL1共同调控的趋化因子及相应受体第72-73页
 附录第73-91页
 参考文献第91-96页
第三章、趋化因子CCL18、CXCL1调控卵巢癌细胞系SKOV3基因和蛋白差异表达第96-150页
 1 材料与方法第97-109页
   ·细胞和动物来源第97页
     ·细胞来源第97页
     ·动物来源第97页
   ·仪器和试剂第97-100页
     ·仪器第97页
     ·试剂及配置第97-100页
       ·试剂第97-98页
       ·部分试剂配置第98-100页
   ·细胞培养第100页
   ·裸鼠皮下移植瘤模型建立第100页
   ·差异基因分析第100-101页
     ·筛选标准说明第100页
     ·数据均一化第100-101页
     ·数据分析第101页
   ·蛋白质谱步骤第101-108页
     ·蛋白的提取第102-104页
       ·从冰冻组织块中提取亚细胞蛋白第102-103页
       ·从冰冻组织块中提取膜蛋白第103-104页
     ·蛋白定量第104-105页
       ·制作蛋白标准曲线第104页
       ·测定蛋白样品含量第104-105页
     ·考马斯亮蓝染色第105-106页
       ·配制SDS-PAGE胶第105-106页
       ·蛋白垂直电泳第106页
       ·G-250 考马斯亮蓝染色第106页
     ·itraq标记第106页
     ·脱盐第106-107页
     ·质谱分析及搜库第107-108页
       ·搜库第107页
       ·数据处理方法第107-108页
   ·验证第108-109页
 2 结果第109-135页
   ·基因芯片检测质量第109-111页
     ·RNA质量检测第109-110页
     ·基因芯片归一化结果第110-111页
   ·iTRAQ标记检测质量第111-114页
     ·标准曲线的绘制第111页
     ·亚细胞结构蛋白和膜蛋白浓度第111-112页
     ·考马斯亮蓝染色第112-113页
       ·亚细胞结构蛋白电泳图第112-113页
       ·膜蛋白电泳图第113页
     ·一维色谱聚集结果第113-114页
   ·mRNA芯片分析CCL18调控基因表达谱第114-115页
     ·CCL18调控表达的差异基因第114页
     ·CCL18参与的信号传导通路第114-115页
   ·质谱分析CCL18调控基因表达谱第115-119页
     ·分析CCL18调控的亚细胞结构蛋白表达谱第115-116页
       ·CCL18调控的亚细胞结构蛋白数量第115-116页
       ·亚细胞结构蛋白丰度比分布第116页
     ·分析CCL18调控的膜蛋白表达谱第116-118页
       ·CCL18调控的膜蛋白数量第117页
       ·膜蛋白丰度比分布第117-118页
     ·CCL18参与调控的信号传导通路第118-119页
   ·mRNA芯片结果关联质谱分析CCL18调控基因表达谱第119页
   ·QRT-PCR验证CCL18调控通路第119-122页
     ·MAPK细胞信号通路的验证第119-121页
       ·确定验证基因第119-121页
     ·p53细胞信号通路验证第121-122页
       ·确定验证基因第121页
       ·CCL18组p53信号通路各基因表达情况第121-122页
       ·CCL18组YWHAE基因表达情况第122页
   ·mRNA芯片分析CXCL1调控基因表达谱第122-124页
     ·CXCL1调控表达的差异基因第122-123页
     ·CXCL1参与的信号传导通路第123-124页
   ·根据质谱结果,分析CXCL1调控的亚细胞结构蛋白表达谱第124-128页
     ·分析CXCL1调控的亚细胞结构蛋白表达谱第124-126页
       ·CXCL1调控的亚细胞结构蛋白第124-125页
       ·亚细胞结构蛋白丰度比分布第125-126页
     ·CXCL1调控的差异膜蛋白表达谱第126-127页
       ·CXCL1调控的差异膜蛋白第126页
       ·蛋白丰度比分布第126-127页
     ·CXCL1参与调控的信号传导通路第127-128页
   ·mRNA芯片结果关联质谱分析CXCL1调控基因表达谱第128-129页
   ·CXCL1调控相关通路验证第129-135页
     ·MAPK细胞信号通路验证第129-130页
       ·确定验证基因第129-130页
       ·CXCL1组MAPK信号通路各基因表达情况第130页
     ·CXCL1组HSPA1A、HYOU1、XDH、FABP4基因表达情况第130-131页
     ·MAPK信号通路上游基因验证第131-133页
       ·验证基因确定第131-132页
       ·检测CXCL1对ADAM10、HBEGF、EGFR基因表达量的影响第132-133页
     ·CCL18、CXCL1基因/通路交叉验证第133-135页
       ·CXCL1组YWEHAE基因表达情况第133-134页
       ·CCL18组HSPA1A、HYOU1、XDH、FABP4基因表达情况第134-135页
       ·CXCL1组p53细胞信号通路验证第135页
 3. 讨论第135-141页
   ·分析CCL18调控的与增殖和转移相关的分子和信号通路第135-137页
   ·分析CXCL1调控的与增殖和转移相关的分子和信号通路第137页
   ·MAPK信号通路上游基因验证第137-138页
   ·交际基因交叉验证第138-140页
   ·比较趋化因子CCL18、CXCL1调控的与增殖和转移相关的分子和信号通路不同第140-141页
 附录第141-146页
 参考文献第146-150页
全文小结第150-152页
致谢第152页

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