| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 1 引言 | 第11-19页 |
| ·研究目的和意义 | 第11-12页 |
| ·文献综述 | 第12-17页 |
| ·苜蓿响应干旱、盐胁迫研究进展 | 第12-15页 |
| ·苜蓿抗逆改良现状研究进展 | 第15页 |
| ·GsZFP1 蛋白研究进展 | 第15-16页 |
| ·GsWRKY20 蛋白研究进展 | 第16-17页 |
| ·本研究的课题来源 | 第17-18页 |
| ·主要研究内容 | 第18-19页 |
| ·研究内容 | 第18页 |
| ·研究技术路线 | 第18-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-35页 |
| ·试验材料 | 第19-21页 |
| ·菌株和质粒 | 第19页 |
| ·植物材料 | 第19页 |
| ·试剂 | 第19页 |
| ·仪器 | 第19-20页 |
| ·培养基 | 第20-21页 |
| ·试验方法 | 第21-35页 |
| ·质粒 DNA 小量提取（碱裂解法） | 第21页 |
| ·质粒的限制性内切酶消化反应 | 第21页 |
| ·目的片段电泳回收 | 第21页 |
| ·连接反应 | 第21-22页 |
| ·大肠杆菌感受态制备 | 第22页 |
| ·大肠杆菌的转化 | 第22页 |
| ·根癌农杆菌感受态细胞制备 | 第22-23页 |
| ·冻融法转化根癌农杆菌 | 第23页 |
| ·农杆菌介导的苜蓿子叶节再生遗传转化方法 | 第23-24页 |
| ·植物 DNA 提取 | 第24页 |
| ·PCR 检测 | 第24-26页 |
| ·植株总 RNA 提取、纯化和 cDNA 制备 | 第26页 |
| ·半定量 RT-PCR 检测 | 第26-28页 |
| ·qRT-PCR 检测 | 第28-29页 |
| ·苜蓿扦插扩繁 | 第29-30页 |
| ·转基因植株胁迫处理 | 第30页 |
| ·生理指标测定方法 | 第30-33页 |
| ·气孔大小及密度分析方法 | 第33页 |
| ·透射电镜观察角质层 | 第33页 |
| ·离体叶片失水率分析 | 第33-35页 |
| 3 结果与分析 | 第35-73页 |
| ·GsZFP1 和 GsWRKY20 基因转化苜蓿 | 第35-44页 |
| ·GsZFP1 和 GsWRKY20 基因植物表达载体构建 | 第35-39页 |
| ·农杆菌介导的遗传转化及抗性植株再生 | 第39页 |
| ·转 GsZFP1 基因苜蓿分子生物学检测 | 第39-42页 |
| ·转 GsWRKY20 基因苜蓿分子生物学检测 | 第42-44页 |
| ·转 GsZFP1 基因苜蓿盐和干旱胁迫研究 | 第44-59页 |
| ·转 GsZFP1 基因苜蓿扦插扩繁 | 第44-46页 |
| ·转 GsZFP1 基因苜蓿盐胁迫处理分析 | 第46-50页 |
| ·转 GsZFP1 基因苜蓿耐盐机理研究 | 第50页 |
| ·转 GsZFP1 基因苜蓿干旱胁迫分析 | 第50-56页 |
| ·转 GsZFP1 基因苜蓿耐旱机理研究 | 第56-59页 |
| ·转 GsWRKY20 基因苜蓿盐和干旱胁迫研究 | 第59-73页 |
| ·转 GsWRKY20 基因苜蓿扦插扩繁 | 第59页 |
| ·转 GsWRKY20 基因苜蓿盐胁迫处理分析 | 第59-63页 |
| ·转 GsWRKY20 基因苜蓿耐盐机理研究 | 第63-64页 |
| ·转 GsWRKY20 基因苜蓿干旱胁迫分析 | 第64-70页 |
| ·转 GsWRKY20 基因苜蓿耐旱机理研究 | 第70-73页 |
| 4 讨论 | 第73-76页 |
| ·转 GsZFP1 和 GsWRKY20 基因苜蓿耐盐机理探讨 | 第73-74页 |
| ·转 GsZFP1 和 GsWRKY20 基因苜蓿耐旱机理探讨 | 第74-76页 |
| 5 结论 | 第76-77页 |
| 致谢 | 第77-78页 |
| 参考文献 | 第78-83页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第83页 |
