| 英文缩略对照表 | 第1-6页 |
| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-13页 |
| 文献综述 | 第13-29页 |
| 第一章 犬细小病毒的病原学研究进展 | 第13-23页 |
| 1. 犬细小病毒的发现、起源与食肉动物细小病毒的分类 | 第13-14页 |
| ·犬细小病毒的发现与起源 | 第13-14页 |
| ·食肉动物细小病毒的分类 | 第14页 |
| 2. 犬细小病毒的的生物学特点 | 第14-17页 |
| ·形态特征 | 第14页 |
| ·理化特性 | 第14-15页 |
| ·抗原特性 | 第15页 |
| ·血凝特性 | 第15-16页 |
| ·CPV的培养特性 | 第16-17页 |
| 3. CPV的分子生物学特性 | 第17-23页 |
| ·基因组 | 第17-18页 |
| ·编码蛋白质及其功能 | 第18-20页 |
| ·CPV的变异 | 第20-21页 |
| ·CPV衣壳蛋白中VP2的变异 | 第21-23页 |
| 第二章 犬细小病毒病的研究进展 | 第23-29页 |
| 1. 流行病学 | 第23-24页 |
| 2. 致病机理及临床表现 | 第24-25页 |
| 3. 临床症状及分类 | 第25页 |
| ·肠炎型 | 第25页 |
| ·心肌炎型 | 第25页 |
| 4. 犬细小病毒病的诊断技术 | 第25-27页 |
| ·CPV的分离与鉴定 | 第25-26页 |
| ·CPV的动物回归试验 | 第26页 |
| ·CPV的电镜和免疫电镜观察 | 第26页 |
| ·CPV的血凝与血凝抑制(HA-HI)试验 | 第26页 |
| ·CPV的免疫荧光法 | 第26-27页 |
| ·CPV的酶联免疫吸附(ELISA)法 | 第27页 |
| ·CPV的琼脂糖凝胶扩散实验 | 第27页 |
| ·CPV的聚合酶链式反应法 | 第27页 |
| ·CPV的其他诊断方法 | 第27页 |
| 5. 犬细小病毒病的防治措施及问题 | 第27-29页 |
| 实验一 藏獒源犬细小病毒的分离与鉴定 | 第29-40页 |
| 1. 材料 | 第29页 |
| ·细胞 | 第29页 |
| ·主要试剂 | 第29页 |
| ·CPV来源动物 | 第29页 |
| ·主要试验仪器和器材 | 第29页 |
| 2. 方法 | 第29-33页 |
| ·主要试剂的配制方法 | 第29-31页 |
| ·2500 mg/L(0.25%,v/v)胰酶溶液的配制 | 第29-30页 |
| ·DMEM细胞培养液的配制 | 第30页 |
| ·0.01mol/L磷酸缓冲液(PBS)的配制 | 第30页 |
| ·阿氏液的配制 | 第30页 |
| ·TE(10 mmol/L Tris-HCl(PH=8.0),1 mmol/L EDTA(PH=8.0))的配制 | 第30页 |
| ·10mL/L(1%,v/v)红细胞悬液的配制 | 第30-31页 |
| ·CPV病料的采集与处理 | 第31页 |
| ·病料的PCR检测 | 第31-32页 |
| ·酚——氯仿法提取病毒DNA | 第31页 |
| ·引物设计和合成 | 第31-32页 |
| ·VP2特异性片段的PCR扩增 | 第32页 |
| ·病毒的分离 | 第32页 |
| ·细胞培养物的鉴定 | 第32-33页 |
| ·红细胞凝集试验 | 第32页 |
| ·PCR鉴定 | 第32页 |
| ·病毒理化特性试验 | 第32-33页 |
| 3. 结果与分析 | 第33-38页 |
| ·采集病料的基本信息 | 第33页 |
| ·病料的PCR检测结果 | 第33-34页 |
| ·病毒分离结果 | 第34-36页 |
| ·细胞培养物的鉴定结果 | 第36-38页 |
| ·红细胞凝集试验结果 | 第36页 |
| ·PCR鉴定结果 | 第36-37页 |
| ·理化特性试验结果 | 第37页 |
| ·细胞培养物的鉴定结论 | 第37-38页 |
| 4. 讨论 | 第38-40页 |
| ·实验对象的选择 | 第38页 |
| ·直肠棉拭子采样法的优点 | 第38页 |
| ·病毒分离经验 | 第38-39页 |
| ·CPV体外培养细胞系的选择 | 第39页 |
| ·血凝试验条件 | 第39-40页 |
| 实验二 藏獒源CPV分离株VP2基因克隆及序列分析 | 第40-55页 |
| 1. 材料 | 第40页 |
| ·分离株与细胞 | 第40页 |
| ·主要试剂 | 第40页 |
| ·主要试验仪器和器材 | 第40页 |
| 2. 方法 | 第40-44页 |
| ·主要试剂的配制方法 | 第40-41页 |
| ·LB培养的配制 | 第40-41页 |
| ·碱裂法质粒DNA提取液的配制 | 第41页 |
| ·8g/L琼脂糖凝胶的制备 | 第41页 |
| ·分离株VP2全基因的PCR扩增 | 第41-43页 |
| ·酚——氯仿法提取分离株DNA | 第41-42页 |
| ·引物设计和合成 | 第42-43页 |
| ·VP2全基因的PCR扩增 | 第43页 |
| ·分离株VP2基因的克隆 | 第43-44页 |
| ·链接T载体、转化、克隆 | 第43页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第43-44页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第44页 |
| ·测序 | 第44页 |
| ·基因序列分析 | 第44页 |
| 3 结果 | 第44-53页 |
| ·分离株VP2全基因的PCR结果 | 第44-45页 |
| ·重组质粒的鉴定结果 | 第45-46页 |
| ·PCR鉴定结果 | 第45-46页 |
| ·酶切鉴定结果 | 第46页 |
| ·分离株VP2序列分析结果 | 第46-53页 |
| ·分离株VP2基因序列测序结果 | 第46-47页 |
| ·分离株VP2基因系统进化树分析结果 | 第47页 |
| ·分离株VP2基因序列比较结果 | 第47-53页 |
| ·分离株VP2的的蛋白抗原表面指数比较结果 | 第53页 |
| 4 讨论 | 第53-55页 |
| ·部分藏獒免疫失败的原因分析 | 第53-54页 |
| ·VP2在CPV变异中的作用 | 第54-55页 |
| ·CPV在全球的流行情况 | 第55页 |
| 结论 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 攻读硕士期间发表的学术论文目录 | 第63-64页 |
| 附录一 | 第64-67页 |
| 附录二 | 第67-78页 |
