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致病微生物铁代谢相关蛋白ViuP、FepB的结构与功能研究

摘要第1-9页
Abstract第9-14页
符号说明第14-15页
第一章 前言第15-32页
   ·铁载体的分类及依据第16-17页
   ·关于铁载体的生物合成第17-18页
   ·铁载体的转运系统第18-25页
     ·TonB依赖的铁载体转运途径第18-19页
     ·周质空间的铁载体转运第19-22页
     ·内膜ABC转运系统第22-23页
     ·周质空间转运蛋白与内膜ABC转运蛋白的相互作用第23-24页
     ·铁离子在细胞内的释放第24-25页
   ·铁载体与人体免疫系统第25-26页
   ·霍乱弧菌和大肠杆菌的铁载体代谢途径第26-30页
     ·弧菌素和肠菌素的合成途经第26-29页
     ·弧菌素和肠菌素的转运途径及ViuP,FepB蛋白的重要性第29页
     ·大肠杆菌周质空间中过量肠菌素的泄漏第29-30页
   ·课题研究的内容和创新点第30-32页
第二章 ViuP-弧菌素,FepB-肠菌素复合物的表达,纯化与结晶第32-54页
   ·实验材料和方法第32-40页
     ·实验材料第32页
     ·试剂第32-35页
     ·主要仪器设备第35页
     ·实验方法第35-40页
   ·实验结果第40-50页
     ·ViuP蛋白的分离纯化第40-44页
     ·Se-ViuP蛋白的分离与纯化第44-47页
     ·FepB蛋白的分离与纯化第47-50页
   ·结晶筛选和晶体的优化第50-52页
     ·结晶方法:悬滴气相扩散法进行晶体生长第50页
     ·ViuP、Se-ViuP蛋白的晶体生长第50-51页
     ·ViuP-弧菌素复合物的晶体生长与优化第51-52页
     ·FepB-肠菌素复合物的晶体生长与优化第52页
   ·本章小结第52-54页
第三章 晶体结构的解析第54-72页
   ·衍射数据的收集与处理第54-62页
     ·晶体衍射的原理第54-56页
     ·衍射数据的收集及处理策略第56-58页
     ·晶体的衍射数据处理的结果第58-62页
   ·晶体结构“相位问题”的解决方法第62页
   ·反常散射法确定相位问题第62-65页
     ·基本原理第62-64页
     ·硒代衍生蛋白反常散射波长的选择第64-65页
     ·ViuP结构解析所用到的实验方法和数据处理结果第65页
     ·ViuP相位求解的实施方法和结果第65页
   ·分子置换法解决相位问题第65-68页
     ·分子置换法的基本原理第65-66页
     ·分子的旋转和平移(Rotation and Translation)第66-68页
     ·分子置换解决相位实施的过程和结果第68页
   ·结构模型的修正第68-72页
     ·结构修正的原理和方法第68-69页
     ·结构修正的实施过程和结果第69-72页
第四章 ViuP以及ViuP-弧菌素复合物晶体结构分析及功能研究第72-83页
   ·实验材料和方法第72-73页
     ·实验材料第72页
     ·实验方法第72-73页
   ·实验结果第73-81页
     ·ViuP蛋白的晶体结构特点第73-74页
     ·弧菌素与ViuP蛋白的结合特点第74-75页
     ·ViuP可能来源于不同于其他铁载体结合蛋白的家族第75-78页
     ·特殊的铁配位方式第78-79页
     ·siderocalin能够以较低的亲和力结合带铁的弧菌素第79-81页
   ·本章小结第81-83页
第五章 FepB-肠菌素复合物的结构与功能研究第83-104页
   ·实验材料与方法第83-88页
     ·实验材料第83页
     ·主要仪器设备第83-84页
     ·实验方法第84-88页
   ·实验结果第88-101页
     ·FepB-肠菌素复合物的晶体结构第88-89页
     ·FepB的底物结合特征第89-91页
     ·FepB蛋白可能与ViuP蛋白来源于同一个蛋白家族第91-92页
     ·FepB可能还具有储存带铁肠菌素的作用第92-94页
     ·FepB蛋白与下游FepDG转运蛋白可能的作用模式第94-97页
     ·FepB蛋白的C端部分对于其识别下游蛋白发挥着更重要的作用第97-101页
   ·本章小结第101-104页
第六章 参与的其他工作-STING蛋白的结构与功能研究第104-108页
全文总结第108-111页
附录第111-113页
参考文献第113-122页
攻读博士学位期间发表的论文第122-123页
致谢第123-124页
外文写作一第124-140页
外文写作二第140-156页
学位论文评阅及答辩情况表第156页

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