| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-14页 |
| 1 引言 | 第14-40页 |
| ·“乳糖不耐症”的研究概况及解决方法 | 第14-16页 |
| ·乳糖酶 | 第14-15页 |
| ·“乳糖不耐症”的类型 | 第15页 |
| ·降低或消除乳糖不耐症的方法 | 第15-16页 |
| ·嗜热古菌β-糖苷酶的特性及应用 | 第16-19页 |
| ·糖苷酶 | 第16-17页 |
| ·嗜热古菌β-糖苷酶 | 第17页 |
| ·嗜热古菌β-糖苷酶的水解产物之一低聚糖 | 第17-18页 |
| ·嗜热古菌β-糖苷酶的活性位点 | 第18页 |
| ·嗜热古菌β-糖苷酶的密码子优化 | 第18-19页 |
| ·转基因技术方法进展 | 第19-26页 |
| ·原核显微注射方法 | 第19-20页 |
| ·电转移技术 | 第20页 |
| ·病毒载体介导的转基因 | 第20-21页 |
| ·胚胎干细胞介导的转基因 | 第21页 |
| ·使用人工染色体传递基因 | 第21-22页 |
| ·生殖细胞介导的转基因 | 第22页 |
| ·转线粒体技术 | 第22页 |
| ·基因打靶的转基因方法 | 第22-23页 |
| ·锌指酶介导的基因敲除或敲入 | 第23-25页 |
| ·转座子介导的哺乳动物转基因 | 第25页 |
| ·转录激活子样效应因子介导的基因打靶新技术 | 第25-26页 |
| ·BLG 5'端调控序列研究进展 | 第26-28页 |
| ·动物乳腺生物反应器 | 第28-32页 |
| ·动物乳腺生物反应器的优缺点 | 第30页 |
| ·动物乳腺生物反应器中关于改善乳成分研究的简介 | 第30-31页 |
| ·动物乳腺生物反应器的制作方法 | 第31-32页 |
| ·动物乳腺生物反应器的发展趋势 | 第32页 |
| ·转座子(Transposon) | 第32-40页 |
| ·转座子的类型及结构特征 | 第33-35页 |
| ·转座子的应用 | 第35-37页 |
| ·转座子插入位点的鉴定方法 | 第37-38页 |
| ·PiggyBac转座子 | 第38-40页 |
| 2 实验一 载体构建 | 第40-69页 |
| ·嗜热菌糖苷酶基因的密码子优化 | 第40-44页 |
| ·密码子优化的原因分析 | 第40-41页 |
| ·密码子优化方法 | 第41-43页 |
| ·密码子优化结果软件分析预测 | 第43-44页 |
| ·Plox-EGF-LacS载体构建 | 第44-59页 |
| ·实验材料 | 第44-46页 |
| ·实验方法 | 第46-47页 |
| ·结果与分析 | 第47-58页 |
| ·小结与讨论 | 第58-59页 |
| ·ZGL-LacS-EN和ZGL-LacZ-EN转座子载体构建 | 第59-69页 |
| ·实验材料 | 第59页 |
| ·实验方法 | 第59页 |
| ·结果与分析 | 第59-67页 |
| ·小结与讨论 | 第67-69页 |
| 3 实验二 构建载体转染鼠乳腺癌细胞系和筛选鉴定 | 第69-74页 |
| ·实验材料 | 第69页 |
| ·生物材料 | 第69页 |
| ·实验试剂及溶液配制 | 第69页 |
| ·实验仪器及耗材 | 第69页 |
| ·实验方法 | 第69-71页 |
| ·鼠乳腺癌细胞的转染筛选方法 | 第69-70页 |
| ·鼠乳腺癌细胞中嗜热菌糖苷酶基因整合检测 | 第70页 |
| ·鼠乳腺癌细胞中嗜热菌糖昔酶基因表达检测 | 第70-71页 |
| ·结果与分析 | 第71-73页 |
| ·鼠乳腺癌细胞的转染筛选结果 | 第71-72页 |
| ·鼠乳腺癌细胞中嗜热菌糖苷酶基因整合检测 | 第72页 |
| ·鼠乳腺癌细胞中嗜热菌糖苷酶基因表达检测 | 第72-73页 |
| ·小结与讨论 | 第73-74页 |
| 4 实验三 利用牛胎儿成纤维细胞进行PiggyBac转座子载体转座性质鉴定 | 第74-81页 |
| ·PiggyBac转座子在牛成纤维细胞中的高效转座 | 第74-76页 |
| ·材料与方法 | 第74页 |
| ·结果与分析 | 第74-76页 |
| ·小结与讨论 | 第76页 |
| ·PiggyBac转座子在牛成纤维细胞中转座位点分析 | 第76-81页 |
| ·材料与方法 | 第76-78页 |
| ·结果与分析 | 第78-80页 |
| ·小结与讨论 | 第80-81页 |
| 5 实验四 牛胎儿成纤维细胞的转染、筛选及转基因牛胚胎的生产和移植 | 第81-88页 |
| ·牛胎儿成纤维细胞的转染、筛选 | 第81-83页 |
| ·材料与方法 | 第81页 |
| ·结果与分析 | 第81-83页 |
| ·小结与讨论 | 第83页 |
| ·转基因牛胚胎的生产和移植 | 第83-88页 |
| ·实验材料 | 第83-84页 |
| ·实验方法 | 第84-86页 |
| ·结果与分析 | 第86-88页 |
| 6 本文结论及创新点 | 第88-89页 |
| ·结论 | 第88页 |
| ·创新点 | 第88-89页 |
| 致谢 | 第89-90页 |
| 参考文献 | 第90-97页 |
| 附录 | 第97-101页 |
| 作者简介 | 第101页 |
