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槐糖脂合成的氮源代谢调控及槐糖脂的廉价底物生产和性质研究

目录第1-9页
摘要第9-14页
ABSTRACT第14-20页
符号说明及缩略词第20-21页
第一章 前言第21-52页
   ·生物表面活性剂概述第21-23页
     ·表面活性剂及生物表面活性剂第21-22页
     ·生物表面活性剂的分类及微生物来源第22-23页
   ·槐糖脂产生菌第23-27页
     ·Candida bombicola第24-25页
     ·Candida apicola第25页
     ·Candida bombicola分支的其它酵母菌第25页
     ·Wickerhamiella domercqiae第25-26页
     ·Pichia anomala第26页
     ·Rhodotorula bogoriensis第26-27页
   ·槐糖脂的结构和性质第27-29页
     ·槐糖脂的结构第27-28页
     ·槐糖脂的性质第28-29页
   ·槐糖脂的生物合成途径第29-35页
     ·槐糖脂合成途径第30-33页
     ·槐糖脂合成所需的特殊酶第33-35页
   ·影响槐糖脂发酵生产的因素第35-39页
     ·发酵参数第35-36页
     ·培养基组成第36-39页
   ·槐糖脂的生理功能及应用第39-43页
     ·槐糖脂的生理功能第39-40页
     ·槐糖脂的应用第40-43页
       ·食品工业中的应用第40页
       ·石油工业中的应用第40-41页
       ·环境保护中的应用第41页
       ·医药领域的应用第41页
       ·日化方面的应用第41页
       ·其它领域的新应用第41-43页
   ·槐糖脂在应用中存在的困难及采取的策略第43-45页
     ·廉价底物和废物流第43-44页
     ·下游处理工艺第44-45页
     ·基因工程改造第45页
   ·利用木质纤维素材料生产槐糖脂第45-49页
     ·木质纤维素的组成第46页
     ·木质纤维素的糖化第46-47页
     ·单细胞油及产油微生物第47-48页
     ·单细胞油的研究进展第48页
     ·玉米芯的生物炼制第48-49页
   ·选题依据、研究目的和研究内容第49-52页
第二章 槐糖脂合成的氮源代谢调控第52-69页
 引言第52-53页
   ·材料和方法第53-57页
     ·菌株第53页
     ·仪器和试剂第53-54页
     ·培养基及培养方法第54页
       ·斜面及YEPD种子培养第54页
       ·发酵培养第54页
     ·检测分析方法第54-57页
       ·生物量的测定第54-55页
       ·油酸残余量的测定第55页
       ·葡萄糖浓度的测定第55页
       ·槐糖脂产量的测定第55页
       ·发酵液pH的测定第55页
       ·槐糖脂组成的薄层层析(TLC)分析第55页
       ·发酵产物的提取第55-56页
       ·粗提样品的红外光谱(FT-IR)分析第56页
       ·粗提样品的分离纯化与制备第56页
       ·槐糖脂分子结构的质谱(MS)分析第56页
       ·槐糖脂脂肪酸组成的气质联用(GC/MS)分析第56-57页
   ·结果与讨论第57-68页
     ·氮源种类对槐糖脂合成代谢的影响第57-59页
     ·硫酸铵浓度对槐糖脂合成代谢的影响第59-60页
     ·发酵液pH对槐糖脂合成代谢的影响第60-62页
       ·发酵液pH值对槐糖脂合成代谢的影响第60-61页
       ·pH调节剂对槐糖脂合成代谢的影响第61-62页
     ·酸性槐糖脂与内酯型槐糖脂的形态比较第62-63页
     ·不同氮源发酵所得总槐糖脂组成的比较分析第63-68页
       ·薄层层析(TLC)分析比较结果第63-64页
       ·红外光谱(FT-IR)分析比较结果第64-65页
       ·高压液相色谱(HPLC)分析比较结果第65-66页
       ·槐糖脂粗品所含组分的质谱(MS)分析比较结果第66-68页
   ·本章小结第68-69页
第三章 不同氮源下的Wickerhamiella domercqiae基因表达谱差异分析第69-91页
 引言第69页
   ·材料和方法第69-75页
     ·菌株第69页
     ·仪器、试剂及常用试剂的配制第69-70页
     ·培养基及培养方法第70-71页
     ·总RNA的提取和处理第71-72页
     ·表达谱测序第72-74页
       ·样品制备第72-73页
       ·Solexa测序第73-74页
     ·数据分析第74-75页
       ·测序标签的过滤第74页
       ·表达标签的比对第74页
       ·差异表达标签和差异表达基因的统计第74页
       ·差异表达基因的GO功能显著性富集分析第74-75页
   ·结果与讨论第75-90页
     ·总RNA提取结果第75-76页
     ·表达谱数据库分析第76-80页
       ·测序质量评估第76-77页
       ·测序饱和度分析第77-78页
       ·Clean Tags分析第78-80页
     ·表达谱差异基因的筛选第80-83页
       ·差异表达标签的统计第80页
       ·酵母粉条件下表达显著上调的差异基因第80-81页
       ·硫酸铵条件下表达显著上调的差异基因第81-83页
     ·差异基因功能分析第83-84页
       ·细胞组分第83-84页
       ·分子功能第84页
       ·参与的生物过程第84页
     ·差异基因富集分析与讨论第84-86页
     ·槐糖脂合成途径相关基因表达谱差异第86-89页
       ·酵母粉条件下参与槐糖脂合成的显著上调的基因注释第86-88页
       ·硫酸铵条件下参与槐糖脂合成的显著上调的基因注释第88-89页
     ·酯酶或脂肪酶基因的表达差异第89-90页
   ·本章小结第90-91页
第四章 不同结构槐糖脂分子表面活性和生物活性的比较第91-106页
 引言第91-92页
   ·材料和方法第92-97页
     ·菌株和细胞株第92页
     ·仪器和试剂第92-93页
     ·槐糖脂粗品的发酵生产第93页
     ·槐糖脂纯品的制备第93页
     ·CMC及最小表面张力(Min.S.T.)的测定第93-94页
     ·乳化能力的测定第94页
     ·细胞毒性的测定第94-96页
       ·细胞培养培养用液的配制第94-95页
       ·细胞传代培养方法第95页
       ·样品的稀释第95-96页
       ·MTT法分析细胞存活率第96页
     ·生物可降解性的测定第96-97页
   ·结果与讨论第97-105页
     ·槐糖脂的发酵生产第97-98页
     ·槐糖脂纯品的制备第98-99页
     ·槐糖脂表面性质的比较第99-101页
     ·槐糖脂乳化能力的比较第101-102页
     ·槐糖脂细胞毒性的比较第102-103页
     ·槐糖脂生物可降解性的比较第103-105页
   ·本章小结第105-106页
第五章 脱木素木糖渣生产槐糖脂第106-146页
 引言第106-107页
   ·材料和方法第107-116页
     ·菌株、原料与纤维素酶第107-108页
     ·仪器、试剂及常用试剂的配制第108-109页
     ·培养基及培养方法第109-111页
       ·C. curvatus培养基及培养方法第109-110页
       ·W. domercqiae培养基及培养方法第110-111页
     ·木糖渣及脱木素木糖渣化学组成的测定第111-112页
     ·滤纸酶活的测定第112-113页
     ·脱木素木糖渣的糖化第113页
     ·脱木素木糖渣水解液的处理和脱毒第113-114页
     ·检测分析方法第114-116页
       ·脱木素木糖渣水解液化学组成的分析第114页
       ·生物量及葡萄糖浓度的测定第114页
       ·C. curvatus细胞破碎及单细胞油的提取第114-115页
       ·单细胞油脂肪酸组成的测定第115-116页
       ·疏水性底物残余量测定第116页
       ·槐糖脂产量的测定第116页
       ·槐糖脂粗提样品的获得和HPLC分析第116页
   ·结果与讨论第116-145页
     ·脱木素木糖渣的糖化第116-119页
       ·木糖渣及脱木素木糖渣的化学组成第116页
       ·脱木素木糖渣的糖化第116-119页
     ·C.curvatus在DCCR糖化液中的生长和产油情况第119-124页
       ·单细胞油提取方法的比较第119页
       ·C. curvatus在DCCR糖化液中的生长和产油情况第119-121页
       ·C. curvatus在不同DCCR糖化液中的形态观察第121-123页
       ·不同DCCR糖化液中所得到的单细胞油的脂肪酸组成分析第123-124页
     ·C. curvatus产油培养基的优化第124-129页
       ·正交优化实验设计及结果分析第124-126页
       ·培养基中酵母粉浓度的进一步优化第126-127页
       ·C. curvatus在优化后培养基中的生长和产油情况第127-128页
       ·单细胞油和细胞破碎液的形态观察第128-129页
     ·W. domercqiae利用葡萄糖/木糖产槐糖脂第129-131页
     ·酶解体系和脱毒处理对W. domercqiae产槐糖脂的影响第131-133页
       ·DCCR水解液的获得及脱毒处理第131页
       ·W. domercqiae在不同糖化液中的生长和产槐糖脂情况第131-132页
       ·DCCR水解液化学组成分析第132-133页
     ·酸浓度对W. domercqiae生长和产槐糖脂的影响第133-134页
     ·W. domercqiae在DCCR水解液油酸脂培养基中产槐糖的优化第134-136页
       ·糖化液发酵培养基中酵母粉浓度的优化第134-135页
       ·糖化液发酵培养基中总葡萄糖浓度的优化第135页
       ·W. domercqiae在优化后的糖化液培养基中生长和产槐糖脂的能力第135-136页
     ·发酵罐培养W. domercqiae产槐糖脂第136-141页
     ·W. domercqiae利用DCCR水解液和单细胞油产槐糖脂第141-143页
       ·单细胞油的脂肪酸组成第141-142页
       ·W. domercqiae利用DCCR水解液和单细胞油产槐糖脂的能力第142-143页
     ·W. domercqiae利用DCCR水解液和细胞破碎液产槐糖脂第143-145页
   ·本章小结第145-146页
全文总结与展望第146-148页
参考文献第148-159页
攻读学位期间发表或整理的学术论文及其他成果第159-161页
致谢第161-163页
学位论文评阅及答辩情况表第163-164页
附录第164-181页

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