| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-11页 |
| 符号及缩写说明 | 第11-13页 |
| 文献综述 | 第13-19页 |
| 第一章 哺乳动物中原癌基因C-MYC的研究进展 | 第13-19页 |
| ·C-MYC基因和蛋白结构的特点 | 第13-15页 |
| ·C-MYC基因刺激细胞增殖和凋亡受到多种因素的影响 | 第15-17页 |
| ·C-MYC基因及表达蛋白在干细胞中的功能 | 第17-19页 |
| 实验研究 | 第19-60页 |
| 第二章 山羊C-MYC原癌基因的原核表达及多克隆抗体的制备 | 第19-38页 |
| ·前言 | 第19页 |
| ·材料与方法 | 第19-31页 |
| ·菌株和质粒 | 第19-20页 |
| ·实验仪器设备 | 第20页 |
| ·实验试剂 | 第20页 |
| ·常用溶液配制 | 第20-24页 |
| ·目的片段克隆 | 第24-25页 |
| ·重组表达载体的构建 | 第25-27页 |
| ·重组表达载体的酶切鉴定 | 第27-28页 |
| ·阳性克隆株的测序 | 第28页 |
| ·Pse380-Myc重组质粒在BL21(DE3)中的诱导表达 | 第28页 |
| ·目的蛋白诱导表达与检测 | 第28-30页 |
| ·目的蛋白纯化与检测 | 第30页 |
| ·c-Myc多克隆抗体的制备及其特异性检测 | 第30-31页 |
| ·结果 | 第31-36页 |
| ·c-Myc基因原核表达载体构建 | 第31-32页 |
| ·pSE380-Myc重组质粒在大肠杆菌中的诱导表达 | 第32-34页 |
| ·His-Myc融合蛋白纯化Western blotting检测 | 第34-35页 |
| ·c-Myc多克隆抗体特异性检测 | 第35-36页 |
| ·讨论 | 第36-37页 |
| ·小结 | 第37-38页 |
| 第三章 山羊原癌基因c-MYc单克隆抗体的制备 | 第38-60页 |
| ·材料 | 第38-40页 |
| ·实验动物 | 第38-39页 |
| ·细胞株与免疫抗原 | 第39页 |
| ·主要实验仪器 | 第39页 |
| ·主要试剂 | 第39页 |
| ·主要溶液配制 | 第39-40页 |
| ·方法 | 第40-47页 |
| ·免疫动物 | 第40页 |
| ·间接ELISA检测方法的建立 | 第40-41页 |
| ·细胞融合 | 第41-44页 |
| ·阳性克隆株的筛选 | 第44页 |
| ·阳性细胞株的克隆化 | 第44-45页 |
| ·阳性杂交瘤细胞的冻存和复苏 | 第45页 |
| ·小鼠体内诱生法生产单克隆抗体 | 第45-46页 |
| ·体外培养上清液及小鼠腹水效价的测定 | 第46页 |
| ·单克隆抗体亚类的鉴定 | 第46页 |
| ·杂交瘤细胞分泌单克隆抗稳定性的鉴定 | 第46页 |
| ·杂交瘤细胞染色体分析 | 第46-47页 |
| ·结果与分析 | 第47-56页 |
| ·间接ELISA方法中His-Myc蛋白包被及阳血清最佳稀释倍数的确立 | 第47页 |
| ·免疫小鼠血清效价测定 | 第47-49页 |
| ·经8-氮鸟嘌呤筛选后的SP2/0细胞培养及细胞生长曲线 | 第49-50页 |
| ·饲养层细胞的准备 | 第50-51页 |
| ·免疫小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞的融合 | 第51页 |
| ·融合细胞形态观察 | 第51-53页 |
| ·融合细胞的克隆化培养 | 第53页 |
| ·阳性细胞培养上清液及小鼠腹水效价的测定 | 第53-54页 |
| ·阳性细胞培养上清液抗体亚型的鉴定 | 第54-55页 |
| ·杂交瘤细胞分泌抗体稳定性鉴定 | 第55-56页 |
| ·杂交瘤细胞染色体分析鉴定 | 第56页 |
| ·讨论 | 第56-58页 |
| ·小结 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 作者简介 | 第68-69页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文情况 | 第69页 |
