花生ω-3脱氢酶基因克隆、表达及其活性分析
| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 1 前言 | 第12-23页 |
| ·研究的立题依据和目的意义 | 第12-13页 |
| ·文献综述 | 第13-23页 |
| ·多不饱和脂肪酸 | 第13页 |
| ·ω-3多不饱和脂肪酸的功能 | 第13-15页 |
| ·多不饱和脂肪酸的生物来源 | 第15-16页 |
| ·多不饱和脂肪酸的生物合成 | 第16-19页 |
| ·脂肪酸脱氢酶及其结构特征 | 第19-21页 |
| ·花生与单胞藻 | 第21-22页 |
| ·电子克隆 | 第22-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-31页 |
| ·实验材料 | 第23-25页 |
| ·质粒与菌株 | 第23页 |
| ·抗生素与培养基 | 第23页 |
| ·生化试剂与酶 | 第23-24页 |
| ·溶液与缓冲液 | 第24页 |
| ·仪器设备 | 第24-25页 |
| ·藻类和种子来源 | 第25页 |
| ·研究方法 | 第25-30页 |
| ·花生的培养 | 第25页 |
| ·总RNA提取 | 第25-26页 |
| ·RT-PCR | 第26-27页 |
| ·目的DNA片段的回收 | 第27页 |
| ·酶切体系 | 第27页 |
| ·连接反应 | 第27-28页 |
| ·大肠杆菌的感受态细胞制备 | 第28页 |
| ·E.coli热激转化 | 第28页 |
| ·大肠杆菌的质粒提取 | 第28页 |
| ·测序与序列分析 | 第28-29页 |
| ·毕赤酵母感受态细胞制备与电击转化 | 第29页 |
| ·在毕赤酵母中的诱导表达 | 第29-30页 |
| ·重组基因表达产物样品的制备 | 第30页 |
| ·重组基因表达产物样品的气相色谱(GC)分析 | 第30页 |
| ·转录组序列分析 | 第30-31页 |
| 3. 结果与分析 | 第31-46页 |
| ·花生FAD8脱氢酶基因的克隆 | 第31-32页 |
| ·花生ω-3脱氢酶基因的生物信息学分析及预测 | 第32-36页 |
| ·花生FAD8一级结构理化性质的分析预测 | 第32-34页 |
| ·花生FAD8蛋白的二级结构预测分析 | 第34-35页 |
| ·花生FAD8蛋白同源性分析 | 第35-36页 |
| ·AhFAD8基因在毕赤酵母中的表达及活性分析 | 第36-42页 |
| ·毕赤酵母表达载体构建 | 第36-39页 |
| ·酵母的转化和检测 | 第39页 |
| ·AhFAD8基因在毕赤酵母中的表达及活性分析 | 第39-42页 |
| ·转录组测序结果分析 | 第42-46页 |
| ·花生转录组测序结果分析 | 第42-45页 |
| ·单胞藻转录组测序结果分析 | 第45-46页 |
| 4 讨论 | 第46-47页 |
| 5 结论 | 第47-48页 |
| 致谢 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-57页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第57页 |
