| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 英文缩写词 | 第9-10页 |
| 第一章 禽流感的研究进展 | 第10-19页 |
| 1 禽流感的流行与危害 | 第10-12页 |
| ·禽流感在国外的流行情况 | 第10-11页 |
| ·禽流感在我国的流行情况 | 第11页 |
| ·禽流感对人类健康的危害 | 第11-12页 |
| 2 禽流感病毒 | 第12-17页 |
| ·禽流感的形态和结构 | 第12-14页 |
| ·禽流感病毒基因组及编码的蛋白 | 第14-16页 |
| ·禽流感致病的分子基础 | 第16-17页 |
| 3 禽流感的检测方法研究进展 | 第17页 |
| 4 本实验的目的和意义 | 第17-19页 |
| 第二章 重组M1 蛋白高效表达及鉴定 | 第19-51页 |
| 1 实验材料、试剂及仪器 | 第19-26页 |
| ·实验材料及试剂 | 第19-20页 |
| ·实验仪器 | 第20-21页 |
| ·主要溶液配制 | 第21-26页 |
| 2 实验方法 | 第26-38页 |
| ·化学合成目的基因片段 | 第26页 |
| ·目的基因的扩增 | 第26-29页 |
| ·引物设计 | 第26-27页 |
| ·PCR 反应体系 | 第27页 |
| ·PCR 反应程序设置 | 第27页 |
| ·琼脂糖电泳 | 第27-28页 |
| ·PCR 产物的纯化 | 第28-29页 |
| ·质粒的提取 | 第29-30页 |
| ·实验前准备 | 第29页 |
| ·操作步骤 | 第29-30页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第30页 |
| ·试剂准备 | 第30页 |
| ·方法 | 第30页 |
| ·pET-28A 表达载体的构建 | 第30-32页 |
| ·pET-28a 质粒与目的片段的酶切 | 第30-31页 |
| ·酶切产物回收与纯化 | 第31页 |
| ·连接反应 | 第31-32页 |
| ·连接产物的转化及重组子的筛选、鉴定 | 第32-34页 |
| ·连接产物的转化及重组子的筛选 | 第32-33页 |
| ·重组子的鉴定 | 第33-34页 |
| ·重组工程菌 BL21/M1 的表达和最佳条件的优化 | 第34-37页 |
| ·重组M1 蛋白晶体生长研究的方法 | 第37-38页 |
| 3 实验结果 | 第38-45页 |
| ·目的基因PCR 扩增结果 | 第38页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第38-40页 |
| ·PCR 鉴定 | 第38-39页 |
| ·双酶切鉴定 | 第39-40页 |
| ·序列鉴定 | 第40页 |
| ·重组工程菌BL21/M1 的表达结果和目标蛋白表达形式检测 | 第40-45页 |
| ·重组工程菌BL21/M1 的表达结果 | 第40-42页 |
| ·重组蛋白M1-pET-28a 表达形式鉴定结果 | 第42页 |
| ·重组工程菌BL21/M1 的最佳表达条件的优化 | 第42-43页 |
| ·融合蛋白Glutathion SepharoseTM48 亲和层析结果 | 第43页 |
| ·凝胶层析（分子筛层析）和阴离子交换进一步纯化目的蛋白 | 第43-45页 |
| ·目的蛋白含量测定的结果 | 第45页 |
| 4 讨论 | 第45-50页 |
| ·PCR 特异性扩增目的基因 | 第45页 |
| ·目的基因M1 的制备 | 第45-46页 |
| ·表达载体pET-28a 的选择 | 第46页 |
| ·宿主菌的选择 | 第46-47页 |
| ·pET-28a-M_1 重组蛋白的表达与纯化 | 第47-48页 |
| ·层析技术在分离纯化中的应用 | 第48页 |
| ·蛋白晶体的培养 | 第48-49页 |
| ·禽流感 M_1 单克隆抗体的制备及诊断试剂盒的研究 | 第49-50页 |
| 5 结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-55页 |
| 致谢 | 第55页 |
