摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-19页 |
1 水稻细菌性基腐病的概述 | 第10-12页 |
·水稻细菌性基腐病的发生危害 | 第10页 |
·病原学研究 | 第10-11页 |
·发病规律 | 第11页 |
·水稻细菌性基腐病防治 | 第11-12页 |
2 植物病原细菌的检测 | 第12-18页 |
·传统检测方法 | 第12-13页 |
·血清学检测方法 | 第13页 |
·植物病原细菌分子生物学检测技术研究进展 | 第13-18页 |
·分子杂交检测法 | 第14页 |
·经典PCR在植物病原细菌的分子生物学检测中的应用 | 第14-16页 |
·PCR技术的发展 | 第16-18页 |
3 本课题研究的目的及意义 | 第18-19页 |
第二章 水稻细菌性基腐病菌相关特性及品种抗感性鉴定 | 第19-28页 |
1 材料与方法 | 第19-22页 |
·材料 | 第19页 |
·病原菌形态特征 | 第19-20页 |
·水稻细菌性基腐病菌致病性测定 | 第20-21页 |
·水稻细菌性基腐病品种抗性鉴定 | 第21-22页 |
·水稻接种方法 | 第21页 |
·试验处理设置 | 第21页 |
·病害分级及抗感性标准 | 第21-22页 |
2 结果与分析 | 第22-26页 |
·水稻细菌性基腐病菌透射电镜观察及革兰氏染色 | 第22-23页 |
·不同接种方法的致病性测定 | 第23-25页 |
·不同水稻品种的抗感性鉴定 | 第25-26页 |
3 小结与讨论 | 第26-28页 |
第三章 水稻细菌性基腐病菌分子检测 | 第28-47页 |
1 材料与方法 | 第28-37页 |
·供试菌株 | 第28-29页 |
·仪器和试剂 | 第29页 |
·核酸的制备 | 第29-31页 |
·细菌基因组DNA的提取 | 第29-30页 |
·水稻基部核酸的提取 | 第30-31页 |
·带菌种子及带菌土壤的制备 | 第31页 |
·水稻细菌性基腐病菌测序 | 第31-35页 |
·反应体系及扩增条件 | 第31-32页 |
·PCR产物电泳检测 | 第32页 |
·PCR产物的克隆和转化 | 第32-33页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第33-35页 |
·克隆的筛选和菌落PCR检测 | 第35页 |
·水稻细菌性基腐病菌实时荧光PCR检测方法的建立 | 第35-37页 |
·特异性引物的设计 | 第35-36页 |
·实时荧光PCR反应体系的优化 | 第36-37页 |
2 结果与分析 | 第37-45页 |
·核糖体ITS测序结果 | 第37-38页 |
·引物设计结果 | 第38-39页 |
·引物最佳退火温度筛选 | 第39页 |
·引物特异性检测结果 | 第39-40页 |
·引物灵敏度检测结果 | 第40-42页 |
·应用特异性引物对种子、土壤、水稻活体进行检测 | 第42-45页 |
3 小结与讨论 | 第45-47页 |
·重要结论 | 第45-46页 |
·实验中尚需改善和探索的问题 | 第46-47页 |
第四章 水稻细菌性基腐病自然传病途径盆栽试验 | 第47-51页 |
1 材料与方法 | 第47-48页 |
·材料 | 第47页 |
·方法 | 第47-48页 |
·实验处理设置 | 第47页 |
·病害调查方法 | 第47-48页 |
·实时荧光PCR检测感病植株 | 第48页 |
2 结果与分析 | 第48-50页 |
·发病症状观察 | 第48页 |
·水稻不同生长阶段发病情况调查结果 | 第48-50页 |
·实时荧光PCR检测结果 | 第50页 |
3 小结与讨论 | 第50-51页 |
第五章 全文总结与展望 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-59页 |
附录 主要试剂及溶液的配置 | 第59-60页 |
致谢 | 第60页 |