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利用非转染人角膜基质细胞系体外重建组织工程人角膜基质的实验研究

摘要第1-8页
Abstract第8-15页
第一章 组织工程人角膜基质的研究概述第15-36页
 1 人角膜基质细胞第16-23页
   ·人角膜基质的发生与干细胞特性第16-17页
   ·人角膜基质细胞的分布与连接方式第17-18页
   ·人角膜基质细胞的功能第18-20页
   ·人角膜基质细胞的三种表型第20-21页
   ·人角膜基质细胞与疾病第21-22页
   ·人角膜基质细胞的凋亡第22-23页
 2 组织工程角膜第23-34页
   ·组织工程角膜基质种子细胞研究进展第24-28页
     ·种子细胞来源第24-26页
     ·角膜基质细胞的体外培养方法第26-28页
   ·组织工程角膜基质载体支架的研究进展第28-34页
     ·生物来源载体支架第28-29页
     ·生物蛋白聚合载体支架第29-33页
     ·人工合成高分子聚合物载体支架第33-34页
 3 本文研究目的与意义第34-36页
第二章 组织工程人角膜基质种子细胞的培养及其鉴定第36-52页
 1 材料与用品第37-39页
   ·实验材料第37页
   ·实验仪器第37页
   ·实验药品第37-38页
   ·常用溶液的配制第38-39页
 2 实验方法第39-42页
   ·人角膜基质细胞的复苏及体外扩增培养第39-40页
     ·人角膜基质细胞的复苏第39页
     ·人角膜基质细胞的体外扩增培养第39-40页
   ·人角膜基质细胞生长特性第40页
   ·人角膜基质细胞染色体分析第40-41页
   ·人角膜基质细胞免疫化学检测第41-42页
   ·人角膜基质细胞致瘤性检测第42页
 3 结果第42-48页
   ·人角膜基质细胞的体外扩增培养及生长状态分析第42页
   ·人角膜基质细胞系细胞生长特性第42-44页
   ·人角膜基质染色体分析第44页
   ·人角膜基质细胞免疫化学检测第44-48页
   ·人角膜基质细胞致瘤性检测第48页
 4 讨论第48-51页
 5 结论第51-52页
第三章 复合胶原凝胶支架的制备及鉴定第52-63页
 1 材料与用品第52-54页
   ·主要仪器第52-53页
   ·主要试剂第53页
   ·主要试剂配制第53-54页
 2 实验方法第54-58页
   ·复合胶原凝胶支架的制备第54-55页
   ·石蜡切片第55-56页
   ·HE 染色第56页
   ·扫描电镜观察第56页
   ·透光率第56-57页
   ·含水量第57-58页
 3 结果第58-60页
   ·复合胶原凝胶支架石蜡切片的 HE 染色第58-59页
   ·复合胶原凝胶支架扫描电镜观察第59页
   ·复合胶原凝胶支架的透明度观察第59-60页
   ·复合胶原凝胶支架的透光率测定第60页
   ·复合胶原凝胶支架的含水量测定第60页
 4 讨论第60-62页
 5 结论第62-63页
第四章 复合胶原凝胶支架与人角膜基质细胞的生物相容性研究第63-73页
 1 材料与用品第63-66页
   ·主要仪器第63-64页
   ·主要试剂第64页
   ·主要试剂配制第64-66页
 2 实验方法第66-68页
   ·复合胶原凝胶支架的处理第66页
     ·复合胶原凝胶支架灭菌第66页
     ·复合胶原凝胶支架材料的干贴处理第66页
   ·人角膜基质细胞的接种与体外培养第66-67页
     ·接种细胞第66-67页
     ·细胞接种和体培养第67页
   ·生物相容性检测第67-68页
     ·冰冻切片与 HE 检测第67页
     ·DiI 荧光观察第67页
     ·免疫化学检测第67-68页
 3 结果第68-70页
   ·冰冻切片的 HE 染色第68-70页
   ·DiI 荧光观察第70页
   ·免疫化学检测第70页
 4 讨论第70-72页
 5 结论第72-73页
第五章 组织工程人角膜基质的体外重建、鉴定及新西兰兔移植初步观察第73-86页
 1 材料与用品第73-75页
   ·实验材料第73页
   ·主要仪器第73-74页
   ·主要试剂第74页
   ·主要试剂配制第74-75页
 2 实验方法第75-79页
   ·组织工程人角膜基质的体外重建第75-76页
     ·复合胶原凝胶支架灭菌第75-76页
     ·复合胶原凝胶支架材料的干贴处理第76页
     ·人角膜基质细胞的接种方法与体外培养第76页
   ·组织工程人角膜基质的性能检测第76-78页
     ·冰冻切片与 HE 检测第76-77页
     ·DiI 荧光观察第77页
     ·免疫化学检测第77页
     ·扫描电镜检测第77-78页
     ·透射电镜检测第78页
   ·新西兰兔带上皮角膜基质移植第78-79页
     ·去上皮层羊膜的制备第78页
     ·复合上皮角膜基质的体外重建第78页
     ·新西兰兔移植手术方法第78-79页
     ·术后护理及观察第79页
 3 结果第79-84页
   ·冰冻切片的 HE 检测第79页
   ·DiI 荧光观察第79-81页
   ·免疫化学检测第81页
   ·扫描电镜检测第81页
   ·透射电镜检测第81-82页
   ·去上皮羊膜的制备第82-83页
   ·复合上皮组织工程人角膜基质冰冻切片的 HE 检测第83页
   ·复合上皮组织工程人角膜基质的荧光标记观察第83-84页
   ·移植效果的在体观察第84页
 4 讨论第84-85页
 5 结论第85-86页
全文总结第86-88页
参考文献第88-95页
个人简历第95页
发表论文及专利第95-96页
致谢第96页

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