摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-7页 |
第一章 丙二酸代谢和TRAP转运系统 | 第7-23页 |
1 丙二酸代谢 | 第7-17页 |
·与丙二酸代谢有关的酶 | 第8-13页 |
·与丙二酸代谢相关的基因 | 第13-17页 |
2 TRAP 转运系统 | 第17-22页 |
·TRAP 转运蛋白的特点 | 第17-19页 |
·Rhodobacter capsulatus 中的dctPQM 转运系统 | 第19-20页 |
·Haemophilus influenzae中的siaPQM转运系统 | 第20-21页 |
·Wolinella succinogenes 中的4碳二羧基酸盐TRAP转运系统 | 第21-22页 |
3 本课题研究意义 | 第22-23页 |
第二章 gtrA 和gtrB 是共生固氮所必需的基因 | 第23-31页 |
1 材料与方法 | 第24-26页 |
·植物种子 | 第24页 |
·菌株和质粒 | 第24-25页 |
·培养基、抗生素及菌体的培养 | 第25页 |
·植物结瘤试验 | 第25页 |
·固氮酶活测定 | 第25-26页 |
2 结果与讨论 | 第26-31页 |
·gtrA1 和gt181 与苜蓿作用的共生表型 | 第26-31页 |
第三章 gtrA 基因调控机理的初步研究 | 第31-63页 |
1 材料与方法 | 第31-42页 |
·菌株 | 第31-32页 |
·培养基、抗生素及菌体的培养 | 第32-33页 |
·PCR 片段的回收 | 第33页 |
·质粒制备及转化 | 第33-34页 |
·突变体的构建 | 第34-35页 |
·PCR 鉴定突变菌株 | 第35页 |
·启动子融合质粒的构建 | 第35页 |
·原核表达载体的构建及诱导表达 | 第35-38页 |
·β-半乳糖苷酶活力的测定 | 第38-39页 |
·共生条件下的β-半乳糖苷酶活性的测定 | 第39-40页 |
·生长曲线的测定 | 第40页 |
·所用引物 | 第40-42页 |
2 结果与讨论 | 第42-63页 |
·基因gtrA 、matP、matQ、matMA和matB的序列分析 | 第42-44页 |
·matP 基因的诱导表达 | 第44-51页 |
·基因matP、matQ、matMA 和matB 在苜蓿中华根瘤菌Rm1021 中参与丙二酸的利用 | 第51-53页 |
·MatQ 和MatM 跨膜区域的预测及分析 | 第53-57页 |
·EMSA 实验和MatA、MatB 酶活性的测定 | 第57-63页 |
总结 | 第63-64页 |
参考文献 | 第64-71页 |
附录 | 第71-77页 |
致谢 | 第77-78页 |
作者简介 | 第78页 |