| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 第1章 引言 | 第9-18页 |
| ·自身免疫性疾病及其诊断 | 第9-10页 |
| ·ENA的研究进展 | 第10-15页 |
| ·ENA的种类 | 第10页 |
| ·U1RNP-70的免疫学特性 | 第10-14页 |
| ·SSA的免疫学特性及分子组成 | 第14页 |
| ·SSB的免疫学特性 | 第14-15页 |
| ·pMAL载体系统的特点 | 第15-16页 |
| ·本研究的前期工作基础 | 第16页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第16-18页 |
| 第一部分 U1RNP-70基因的克隆与表达 | 第18-45页 |
| 第2章 材料与方法 | 第18-29页 |
| ·实验材料 | 第18-21页 |
| ·一般药品 | 第18-19页 |
| ·配制试剂 | 第19-20页 |
| ·标准分子量 | 第20页 |
| ·实验仪器 | 第20-21页 |
| ·实验方法 | 第21-29页 |
| ·U1RNP-70基因的获得 | 第21-22页 |
| ·构建测序载体及鉴定 | 第22-24页 |
| ·pMAL-c-U1RNP-70基因表达载体的构建 | 第24-26页 |
| ·U1RNP-70基因在大肠杆菌DH5a中的诱导表达及产物分析 | 第26-29页 |
| 第3章 实验结果与讨论 | 第29-45页 |
| ·U1RNP-70基因的获得 | 第29页 |
| ·构建测序载体及鉴定 | 第29-35页 |
| ·蛋白酶K处理PCR扩增产物提高酶切效率 | 第29-30页 |
| ·U1RNP-70基因转化pGEM-T载体 | 第30页 |
| ·蓝白斑筛选 | 第30-31页 |
| ·质粒分子大小的鉴定 | 第31页 |
| ·重组子的PCR鉴定 | 第31-32页 |
| ·重组子的序列测定 | 第32-35页 |
| ·pMAL-c-U1RNP-70基因表达载体的构建 | 第35-38页 |
| ·U1RNP-70基因大肠杆菌表达系统载体的选择与构建 | 第35-36页 |
| ·U1RNP-70基因表达载体在大肠杆菌中的转化 | 第36页 |
| ·pMAL-c-U1RNP-70基因表达载体重组质粒的鉴定 | 第36-38页 |
| ·U1RNP-70基因在大肠杆菌中的诱导表达 | 第38-40页 |
| ·SDS-聚丙烯酰氨凝胶电泳(SDS-PAGE)检验 | 第38-39页 |
| ·U1RNP-70融合蛋白的纯化 | 第39-40页 |
| ·构建pMAL-c-2X-U1RNP-70表达载体 | 第40-43页 |
| ·换载体pMAL-c-2X | 第40页 |
| ·pMAL-c-2X-U1RNP-70基因的诱导表达 | 第40-41页 |
| ·Factor X a切割MBP-U1RNP-70 | 第41-42页 |
| ·pMAL-c-2X-U1RNP-70抗原性的鉴定(Western blotting) | 第42页 |
| ·pMAL-c-2X-U1RNP-70抗原性的鉴定(ELISA法) | 第42-43页 |
| ·讨论 | 第43-45页 |
| 第二部分 SSA、SSB重组菌的表达、纯化及ELISA检测 | 第45-53页 |
| 第4章 材料与方法 | 第45-47页 |
| ·实验材料 | 第45页 |
| ·实验方法 | 第45-47页 |
| ·诱导表达重组菌SSA、SSB | 第45页 |
| ·表达产物的纯化 | 第45页 |
| ·表达、纯化产物的SDS一聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第45页 |
| ·表达、纯化产物的抗原特异性研究 | 第45-47页 |
| 第5章 实验结果与讨论 | 第47-52页 |
| ·重组菌SSA、SSB的诱导、表达和纯化 | 第47-48页 |
| ·SDS-聚丙烯酰氨凝胶电泳(SDS-PAGE)检验 | 第47-48页 |
| ·重组菌SSA、SSB的抗原性的鉴定 | 第48-51页 |
| ·重组SSA、SSB抗原性的鉴定(Western blotting) | 第48-49页 |
| ·重组SSA、SSB抗原性的鉴定(ELISA) | 第49-50页 |
| ·Factor X a切割MBP-SSA | 第50-51页 |
| ·讨论 | 第51-52页 |
| 第6章 结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-58页 |
| 硕士期间发表的论文 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59页 |
