| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-5页 |
| 缩略词对照表 | 第5-8页 |
| 1 文献综述 | 第8-21页 |
| ·植物次生代谢产物及相关酶的空间特异性分布研究 | 第8-13页 |
| ·次生代谢与次生代谢产物的概念 | 第8页 |
| ·次生代谢产物的主要类型 | 第8-9页 |
| ·植物次生代谢产物的功能与其空间特异性分布的关系 | 第9-10页 |
| ·植物次生代谢相关酶与次生代谢产物空间特异性分布关系 | 第10-11页 |
| ·次生代谢途径相关酶类的器官、细胞及亚细胞定位研究方法 | 第11-13页 |
| ·柴胡皂苷研究 | 第13-18页 |
| ·柴胡皂苷化学成分及药理作用 | 第13-14页 |
| ·柴胡皂苷合成相关酶研究进展 | 第14-18页 |
| ·实时定量RT-PCR技术及在植物基因表达分析中的应用 | 第18-21页 |
| ·实时荧光定量PCR技术的原理 | 第18-19页 |
| ·实时荧光定量PCR数据分析的方法 | 第19页 |
| ·内对照的标准化 | 第19-20页 |
| ·实时定量RT-PCR在植物基因表达分析中的应用 | 第20-21页 |
| 2 柴胡皂苷合成相关基因片段的克隆及基因特性分析 | 第21-45页 |
| ·材料和方法 | 第21-28页 |
| ·材料 | 第21页 |
| ·总RNA的提取 | 第21-22页 |
| ·引物设计及RT-PCR | 第22-23页 |
| ·扩增片断的回收 | 第23页 |
| ·目的片段与克隆载体的连接 | 第23-24页 |
| ·重组质粒的转化与阳性克隆的筛选 | 第24页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第24-26页 |
| ·柴胡皂苷合成相关基因(HMGR/IPPI/FPS/B-AS)序列分析 | 第26页 |
| ·HMGR基因的拷贝数分析(SOUTHERN BLOT杂交) | 第26-28页 |
| ·B-AS基因片断的内含子分析 | 第28页 |
| ·结果与分析 | 第28-41页 |
| ·总RNA提取 | 第28-29页 |
| ·RT-PCR结果 | 第29页 |
| ·重组克隆载体的双酶切与PCR鉴定 | 第29-30页 |
| ·HMGR基因测序结果及基因特性分析 | 第30-31页 |
| ·IPPI基因测序结果及序列分析 | 第31-35页 |
| ·FPS基因测序结果及序列分析 | 第35-39页 |
| ·B-AS基因测序结果及基因特性分析 | 第39-41页 |
| ·讨论 | 第41-43页 |
| ·小结 | 第43-45页 |
| 3 实时荧光定量RT-PCR管家基因的克隆及组织稳定性表达 | 第45-56页 |
| ·材料和方法 | 第45-49页 |
| ·材料 | 第45页 |
| ·总RNA的提取及浓度检测 | 第45页 |
| ·引物设计及RT-PCR | 第45-47页 |
| ·扩增片断的回收、连接、转化及阳性克隆的鉴定 | 第47页 |
| ·重组质粒的核苷酸序列测定及比对 | 第47-48页 |
| ·实时荧光定量RT-PCR | 第48-49页 |
| ·结果与分析 | 第49-52页 |
| ·6个管家基因RT-PCR结果 | 第49页 |
| ·6个管家基因测序结果 | 第49页 |
| ·核苷酸序列一致性分析 | 第49页 |
| ·6个管家基因REAL TIME PCR扩增曲线、熔解曲线分析 | 第49-51页 |
| ·6个管家基因RNA转录水平分析 | 第51-52页 |
| ·6个管家基因的表达稳定性分析 | 第52页 |
| ·讨论 | 第52-54页 |
| ·小结 | 第54-56页 |
| 4 不同组织柴胡皂苷合成相关基因表达分析 | 第56-63页 |
| ·材料和方法 | 第56-57页 |
| ·材料 | 第56页 |
| ·总RNA的提取及浓度检测 | 第56页 |
| ·引物设计 | 第56页 |
| ·RT-PCR及扩增产物的测序 | 第56-57页 |
| ·实时荧光定量RT-PCR | 第57页 |
| ·结果与分析 | 第57-59页 |
| ·HMGR、IPPI、FPS、B-AS基因RT-PCR及测序结果 | 第57页 |
| ·HMGR、IPPI、FPS、B-AS基因REAL TIME PCR扩增曲线、熔解曲线及扩增效率分析 | 第57-58页 |
| ·北柴胡不同组织HMGR、IPPI、FPS、B-AS基因表达分析 | 第58-59页 |
| ·讨论 | 第59页 |
| ·小结 | 第59-63页 |
| 5 结论 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-70页 |
| 个人简介 | 第70-71页 |
| 导师简介 | 第71-72页 |
| 致谢 | 第72页 |
