图目录 | 第1-9页 |
表目录 | 第9-10页 |
缩写词 | 第10-11页 |
摘要 | 第11-14页 |
ABSTRACT | 第14-18页 |
第一章 文献综述 | 第18-40页 |
1 小麦白粉病和抗白粉病基因 | 第18-21页 |
2 分子标记类型及小麦分子标记遗传图谱构建 | 第21-26页 |
·小麦研究中常用的分子标记类型 | 第21-24页 |
·小麦分子标记遗传图谱构建 | 第24-26页 |
·普通小麦的分子标记遗传图谱 | 第24-25页 |
·小麦近缘物种的分子标记遗传图谱 | 第25-26页 |
3 小麦基因克隆策略及研究进展 | 第26-32页 |
·同源基因克隆技术 | 第27-28页 |
·基于同源序列的候选基因法 | 第27页 |
·cDNA末端快速扩增技术(Rapid amplification of cDNA ends,RACE) | 第27-28页 |
·图位克隆法 | 第28-32页 |
·小麦基因组中应用图位克隆方法的限制性 | 第29-30页 |
·小麦基因组中图位克隆的策略 | 第30-32页 |
4 植物抗病基因的结构特征及其在染色体上的存在形式 | 第32-38页 |
·植物抗病基因的结构 | 第32-33页 |
·植物受体蛋白激酶与抗病反应 | 第33-34页 |
·植物生育期与植物抗病 | 第34-35页 |
·植物抗病基因在染色体上的存在形式 | 第35-38页 |
5 本研究的目的和意义 | 第38-40页 |
第二章 小麦抗白粉病基因Pm6的精细定位 | 第40-58页 |
1 材料与方法 | 第41-47页 |
·植物材料 | 第41-42页 |
·研究方法 | 第42-47页 |
·白粉病抗性鉴定 | 第42页 |
·分子标记开发 | 第42-44页 |
·分子标记遗传作图 | 第44-46页 |
·比较基因组分析及基因预测 | 第46-47页 |
2 结果与分析 | 第47-55页 |
·携带Pm6基因的材料在不同生长时期的白粉病抗性鉴定 | 第47页 |
·Pm6基因在两个作图群体中的遗传分析 | 第47-49页 |
·与Pm6基因连锁的两侧标记及重组单株的筛选 | 第49-50页 |
·基于比较基因组学的开发用于Pm6基因精细定位的分子标记 | 第50-51页 |
·Pm6基因的精细定位 | 第51页 |
·Pm6区域对应的水稻和短柄草的共线区域的比较分析及基因预测 | 第51-54页 |
·与Pm6基因连锁的两侧标记CINAU123和CINAU127在分子标记辅助育种中的有效性检测 | 第54-55页 |
3 讨论 | 第55-58页 |
第三章 Pm6候选基因的克隆 | 第58-90页 |
1 实验材料和方法 | 第59-74页 |
·植物材料 | 第59页 |
·试验方法 | 第59-74页 |
·用于基因克隆和表达谱分析的植物材料种植、处理方法和取样方案 | 第59-60页 |
·植物基因组DNA提取 | 第60页 |
·STS标记的PCR扩增及检测 | 第60页 |
·总RNA的提取及其纯度检测 | 第60-61页 |
·半定量RT-PCR和实时荧光定量PCR(Q-PCR) | 第61-63页 |
·PCR产物的回收纯化 | 第63-64页 |
·PCR回收产物的连接 | 第64页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第64-65页 |
·热击转化实验 | 第65页 |
·阳性克隆的菌液PCR鉴定 | 第65页 |
·质粒DNA的小量制备 | 第65-66页 |
·重组克隆的酶切鉴定 | 第66页 |
·5'RACE和3'RACE | 第66-69页 |
·目的基因的亚细胞定位分析 | 第69-72页 |
·引物设计 | 第72页 |
·本研究生物信息学分析所用到的网站网址 | 第72-74页 |
2 结果与分析 | 第74-87页 |
·总RNA样品的质量检测 | 第74页 |
·水稻和短柄草共线区域内LRR-RLK基因及其同源的麦类EST的比较分析 | 第74-75页 |
·IGVI-465中LRR-RLK基因的克隆和序列分析 | 第75-80页 |
·小麦中TaLRR-RLK基因的系统进化关系分析 | 第80-81页 |
·抗、感亲本中TaLRR-RLK基因的序列比较 | 第81-83页 |
·TaLRR-RLK基因的表达特征分析 | 第83-85页 |
·TaLRR-RLK的亚细胞定位 | 第85-87页 |
3 讨论 | 第87-90页 |
第四章 Pm6基因附近一个保守的类受体蛋白激酶基因TaRPK的克隆 | 第90-118页 |
1 实验材料和方法 | 第90-96页 |
·植物材料 | 第90-92页 |
·实验方法 | 第92-96页 |
2 结果与分析 | 第96-114页 |
·大麦中保守的类受体蛋白激酶基因(HvRPK)的序列分析及STS标记开发 | 第96-97页 |
·RPK基因的染色体定位 | 第97-98页 |
·普通小麦中RPK基因与Pm6基因的连锁关系分析 | 第98-99页 |
·RPK基因在小麦近缘属物种中的保守性分析 | 第99-101页 |
·利用BAC文库筛选在普通小麦品种小偃54中克隆TaRPK基因 | 第101-104页 |
·渐渗系IGVI-465中TaRPK1基因的克隆及其序列特征分析 | 第104-109页 |
·TaRPK1-2G的系统进化关系分析 | 第109-110页 |
·TaRPK1-2G基因的表达特征分析 | 第110-112页 |
·TaRPK1-2G的亚细胞定位 | 第112-114页 |
3 讨论 | 第114-118页 |
全文结论 | 第118-120页 |
创新点 | 第120-122页 |
参考文献 | 第122-138页 |
附录1 | 第138-139页 |
附录2 | 第139-142页 |
致谢 | 第142-144页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第144页 |