| 摘要 | 第1-3页 |
| Abstract | 第3-4页 |
| 中文文摘 | 第4-9页 |
| 第1章 绪论 | 第9-29页 |
| ·课题背景 | 第9-10页 |
| ·文献综述 | 第10-29页 |
| ·转基因水稻的研究概况 | 第11-14页 |
| ·水稻遗传转化技术 | 第11-12页 |
| ·转基因技术在水稻育种上的应用 | 第12页 |
| ·转基因水稻中标记基因的使用 | 第12-13页 |
| ·转入外源基因的表达调控 | 第13-14页 |
| ·转基因植物的安全性问题 | 第14-16页 |
| ·转基因植物选择标记基因的安全性问题 | 第14-15页 |
| ·转基因植物中转入的调控因子的生物安全性 | 第15页 |
| ·载体骨架序列的生物安全性 | 第15页 |
| ·转入目的基因本身的安全性 | 第15-16页 |
| ·目前解决转基因植物安全性问题的手段 | 第16-18页 |
| ·防止转基因植物中外源基因逃逸的手段 | 第16页 |
| ·转基因植物中外源基因的删除技术 | 第16-17页 |
| ·转基因植物中标记基因的删除技术 | 第17-18页 |
| ·位点特异性重组系统的概述 | 第18-23页 |
| ·Cre/loxp的结构及重组机制 | 第19-22页 |
| ·Flp/frt的结构及重组机制 | 第22-23页 |
| ·位点特异性重组系统在转基因植物中剔除选择标记的应用 | 第23-29页 |
| ·有性杂交或二次转化方式将Cre基因导入到转loxp结构的植株中剔除选择标记基因 | 第24页 |
| ·诱导Cre重组酶表达剔除选择标记基因 | 第24-26页 |
| ·利用组织特异性启动子诱导Cre重组酶基因表达在转基因植物中剔除选择标记基因 | 第26页 |
| ·Cre/loxp和Flp/frt协同作用在转基因植物中剔除选择标记利用 | 第26-29页 |
| 第2章 表达调控元件的改造修饰及功能确认 | 第29-43页 |
| ·材料与方法 | 第29-37页 |
| ·实验材料 | 第29-31页 |
| ·供试水稻品种 | 第29页 |
| ·菌株和质粒 | 第29-31页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第31页 |
| ·实验方法 | 第31-37页 |
| ·载体构建的一些基本方法 | 第31-33页 |
| ·农杆菌介导水稻转化 | 第33-34页 |
| ·组织GUS染色方法 | 第34页 |
| ·转基因水稻后代植株的潮霉素抗性检测 | 第34页 |
| ·转基因水稻后代植株的分子检测 | 第34-37页 |
| ·结果与分析 | 第37-43页 |
| ·水稻谷蛋白基因Glu-1启动子Gt1的功能确认 | 第37-40页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第37-38页 |
| ·遗传转化 | 第38页 |
| ·转基因植株的分子检测 | 第38-40页 |
| ·转基因植株的GUS组织化学检测 | 第40页 |
| ·结论 | 第40页 |
| ·重组酶基因Cre的改造修饰 | 第40-43页 |
| ·重组酶Cre改造的思路 | 第40-41页 |
| ·结果与分析 | 第41-42页 |
| ·结论 | 第42-43页 |
| 第3章 定点删除转基因水稻胚乳中外源基因表达载体的构建 | 第43-56页 |
| ·材料与方法 | 第44-46页 |
| ·实验材料 | 第44-46页 |
| ·供试水稻品种 | 第44页 |
| ·菌株和质粒 | 第44-46页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第46页 |
| ·实验方法 | 第46页 |
| ·结果与分析 | 第46-55页 |
| ·表达载体pCALHGt1CGUS(胚乳表达GUS)的构建 | 第46-52页 |
| ·表达载体pCLHGt1CreAGUS(胚乳不表达GUS)的构建 | 第52-55页 |
| ·结论 | 第55-56页 |
| 第四章 外源基因删除载体转化及转基因植株后代的分子检测 | 第56-60页 |
| ·材料与方法 | 第56页 |
| ·结果与分析 | 第56-59页 |
| ·转基因植株的获得 | 第56页 |
| ·转基因植株后代的检测 | 第56-59页 |
| ·标记基因(hpt)的检测 | 第56-58页 |
| ·转基因植株后代的目的基(Gt1/Cre)的PCR的检测 | 第58-59页 |
| ·结论 | 第59-60页 |
| 讨论 | 第60-70页 |
| 参考文献 | 第70-74页 |
| 攻读学位期间承担的科研任务与主要成果 | 第74-75页 |
| 致谢 | 第75-76页 |
| 个人简历 | 第76-77页 |
