| 中文摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-16页 |
| 第1章 引言 | 第16-23页 |
| 药物基因组学与个体化用药 | 第16-17页 |
| 华法林的药理机制及临床应用 | 第17-18页 |
| 影响华法林用量个体差异的因素 | 第18-20页 |
| 华法林个体化用药新进展 | 第20-21页 |
| 本研究的目的 | 第21-23页 |
| 第2章 实验材料 | 第23-27页 |
| ·研究对象及样品 | 第23页 |
| ·基因分型方法建立及标准基因型样品 | 第23页 |
| ·方法学评价所用样品 | 第23页 |
| ·回顾性研究对象及样品 | 第23页 |
| ·前瞻性研究对象及样品 | 第23页 |
| ·试剂 | 第23-25页 |
| ·酚/氯仿法外周血基因组DNA提取试剂 | 第23-24页 |
| ·试剂盒外周血基因组DNA提取试剂 | 第24页 |
| ·常规PCR和荧光real-time PCR试剂 | 第24-25页 |
| ·DHPLC试剂 | 第25页 |
| ·电泳试剂 | 第25页 |
| ·仪器 | 第25-26页 |
| ·软件与生物医学数据库 | 第26-27页 |
| ·软件 | 第26页 |
| ·生物医学数据库 | 第26-27页 |
| 第3章 实验方法 | 第27-43页 |
| ·本研究所采取的技术路线 | 第27-28页 |
| ·DNA模板的制备 | 第28-29页 |
| ·酚/氯仿法外周血基因组DNA提取 | 第28页 |
| ·试剂盒法外周血基因组DNA提取 | 第28-29页 |
| ·DNA浓度和纯度的测定 | 第29页 |
| ·基因分型方法的建立及评价 | 第29-38页 |
| ·基于DHPLC的分型方法 | 第29-34页 |
| ·DHPLC基因分型的原理 | 第29-30页 |
| ·引物的设计及纯度分析 | 第30-32页 |
| ·PCR扩增体系和循环参数 | 第32页 |
| ·扩增片段的解链温度和洗脱梯度的预测 | 第32-34页 |
| ·VKORC1和CYP2C9基因型分析 | 第34页 |
| ·基于Real-time PCR的分型方法 | 第34-37页 |
| ·Real-time PCR基因分型的原理 | 第34-35页 |
| ·引物的设计及纯度分析 | 第35-36页 |
| ·PCR扩增体系和循环参数 | 第36-37页 |
| ·VKORC1和CYP2C9基因型分析 | 第37页 |
| ·两种基因分型方法的比较 | 第37-38页 |
| ·两种基因分型方法的盲法分析 | 第37页 |
| ·两种基因分型方法的成本及用时的比较 | 第37-38页 |
| ·等位基因的计算和Hardy-Weinberg平衡分析 | 第38页 |
| ·病例入选标准和排除标准 | 第38-39页 |
| ·入选标准 | 第38页 |
| ·排除标准 | 第38页 |
| ·目标INR值和华法林稳定剂量的定义 | 第38-39页 |
| ·回顾性研究实施方案 | 第39-40页 |
| ·病例资料和标本收集 | 第39-40页 |
| ·多元回归分析及华法林稳定剂量算法的建立 | 第40页 |
| ·前瞻性研究实施方案 | 第40-42页 |
| ·病例资料收集和随机分组方法 | 第40-41页 |
| ·前瞻性研究临床实施方案 | 第41-42页 |
| ·前瞻性研究的观察指标 | 第42页 |
| ·统计方法和统计软件 | 第42-43页 |
| 第4章 实验结果 | 第43-83页 |
| ·DNA样品的质量 | 第43页 |
| ·引物质量分析结果 | 第43-44页 |
| ·DHPLC检测VKORC1和CYP2C9基因型结果 | 第44-48页 |
| ·PCR扩增VKORC1和CYP2C9基因电泳分析 | 第44页 |
| ·DHPLC分析VKORC1和CYP2C9基因型 | 第44-48页 |
| ·Real-time PCR检测VKORC1和CYP2C9基因型结果 | 第48-51页 |
| ·Real-time PCR分析VKORC1和CYP2C9基因型 | 第48-50页 |
| ·Real-time PCR基因型分型方法的稳定性 | 第50-51页 |
| ·两种基因分型方法的比较 | 第51-53页 |
| ·两种基因分型方法的盲法分析 | 第51-52页 |
| ·两种基因分型方法的成本和用时比较 | 第52-53页 |
| ·人群中VKORC1和CYP2C9等位基因频率和基因型分布 | 第53-54页 |
| ·华法林个体化用药回顾性研究 | 第54-70页 |
| ·回顾性研究病例资料 | 第54-56页 |
| ·各因素对华法林稳定剂量的影响 | 第56-68页 |
| ·非遗传因素的影响 | 第56-62页 |
| ·遗传因素的影响 | 第62-68页 |
| ·多元回归分析及华法林稳定剂量预测算法 | 第68-70页 |
| ·华法林个体化用药前瞻性研究 | 第70-83页 |
| ·前瞻性研究病例资料 | 第70-73页 |
| ·主要观察指标分析 | 第73-79页 |
| ·次要观察指标分析 | 第79-81页 |
| ·华法林稳定剂量预测算法的预测效能 | 第81-83页 |
| 第5章 分析与讨论 | 第83-93页 |
| ·VKORC1和CYP2C9的基因分型及其在人群中的频率分布 | 第83-85页 |
| ·华法林稳定剂量预测算法的建立 | 第85-88页 |
| ·前瞻性随机病例-对照研究 | 第88-90页 |
| ·本研究的缺陷与不足 | 第90-91页 |
| ·小结与展望 | 第91-93页 |
| 第6章 参考文献 | 第93-101页 |
| 攻读博士学位期间所发表论文 | 第101-102页 |
| 附录 | 第102-110页 |
| 致谢 | 第110-111页 |
| 英文缩略词表 | 第111-113页 |
