| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 前言 | 第11-26页 |
| 1 棉花纤维发育相关基因的研究进展 | 第11-19页 |
| ·概况 | 第11-13页 |
| ·与棉纤维起始有关的基因 | 第13-14页 |
| ·与棉纤维伸长相关的基因 | 第14-16页 |
| ·棉纤维与拟南芥毛刺 | 第16-18页 |
| ·MYB类转录因子 | 第16-17页 |
| ·其他毛刺相关基因 | 第17-18页 |
| ·赤霉素对棉花纤维细胞发育的影响 | 第18-19页 |
| 2 高等植物内含子对基因表达调控 | 第19-23页 |
| ·内含子影响基因表达模式 | 第19-20页 |
| ·内含子增强基因表达 | 第20-21页 |
| ·内含子驱动基因表达 | 第21-22页 |
| ·内含子调控基因表达机制研究展望 | 第22-23页 |
| 3 研究的目的意义 | 第23-25页 |
| 4 技术路线 | 第25-26页 |
| 材料和方法 | 第26-42页 |
| 1 材料 | 第26-27页 |
| 2 方法 | 第27-42页 |
| ·SuSy基因DNA全长及启动子的克隆 | 第27-31页 |
| ·CTAB-PVP法提取棉花基因组DNA | 第27页 |
| ·PCR扩增SuSy基因DNA片段 | 第27-28页 |
| ·基因组酶切并与Cassette连接 | 第28-29页 |
| ·引物设计 | 第29页 |
| ·PCR获取SuSy基因5'上游序列 | 第29-30页 |
| ·PCR产物的克隆及测序 | 第30页 |
| ·转化 | 第30-31页 |
| ·序列分析 | 第31页 |
| ·植物表达载体构建 | 第31-36页 |
| ·启动子5'缺失系列载体构建 | 第31-33页 |
| ·W-box突变载体构建 | 第33-34页 |
| ·内含子相关载体构建 | 第34-36页 |
| ·带有内含子的SuSy启动子全长片段获取 | 第34-35页 |
| ·内含子插入到pBI121 | 第35-36页 |
| ·重组农杆菌工程菌株的获得 | 第36-37页 |
| ·农杆菌GV3101感受态细胞制作 | 第36-37页 |
| ·农杆菌电击转化法 | 第37页 |
| ·重组农杆菌工程菌株鉴定 | 第37页 |
| ·拟南芥转化 | 第37-39页 |
| ·拟南芥培养 | 第37-38页 |
| ·农杆菌介导的DIP法转化拟南芥 | 第38页 |
| ·拟南芥种子抗性筛选及分离比例计算 | 第38页 |
| ·转基因T2代拟南芥培养 | 第38-39页 |
| ·GA处理转基因拟南芥 | 第39页 |
| ·GUS组织化学染色分析 | 第39-42页 |
| ·试剂配制 | 第39页 |
| ·直接染色 | 第39页 |
| ·GUS荧光测定法 | 第39-42页 |
| 结果与分析 | 第42-65页 |
| 1 棉花蔗糖合成酶基因DNA全长片段的获得及结构分析 | 第42-43页 |
| 2 棉花蔗糖合成酶启动子的克隆 | 第43-44页 |
| ·棉花基因组DNA酶切 | 第43页 |
| ·分离棉花蔗糖合成酶基因5'上游序列 | 第43-44页 |
| 3 序列分析 | 第44页 |
| 4 载体构建 | 第44-51页 |
| ·启动子5'端缺失载体构建 | 第44-47页 |
| ·-376到-165之间缺失载体构建 | 第47-48页 |
| ·W-box突变载体构建 | 第48-49页 |
| ·内含子相关载体构建 | 第49-51页 |
| 5 拟南芥转化及转基因植株筛选 | 第51-52页 |
| 6 启动子特性分析 | 第52-61页 |
| ·启动子在拟南芥中的表达模式 | 第52-54页 |
| ·不同长度启动子片段的表达分析 | 第54-56页 |
| ·不同启动子区域对GUS表达组织特异性的影响 | 第54-56页 |
| ·不同启动子区段对GUS活性的影响 | 第56页 |
| ·赤霉素对启动子活性的调控作用 | 第56-57页 |
| ·毛刺及花粉特异表达区域分析 | 第57-59页 |
| ·-96bp处W-box对启动子活性的影响 | 第59-60页 |
| ·启动子功能区分析 | 第60-61页 |
| 7 第一个内含子调控作用分析 | 第61-65页 |
| ·内含子特异抑制基因在花粉中表达 | 第61-62页 |
| ·内含子减弱基因的表达 | 第62页 |
| ·GA通过内含子影响基因表达 | 第62-64页 |
| ·35S启动子作用下内含子的调控作用 | 第64-65页 |
| 讨论 | 第65-71页 |
| 1 棉花SuSy基因结构、启动子克隆及活性分析 | 第65-66页 |
| 2 决定启动子在纤维中活性的序列 | 第66-67页 |
| 3 W-box在启动子中的作用 | 第67页 |
| 4 GA对SuSy表达的调控 | 第67-68页 |
| 5 内含子在基因表达调控中的作用 | 第68-69页 |
| 6 对棉花蔗糖合成酶基因表达调控的推测 | 第69-71页 |
| 结论 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-79页 |
| 致谢 | 第79页 |