| 缩略语表 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 1 文献综述 | 第12-32页 |
| ·油菜隐性细胞核雄性不育的研究 | 第12-17页 |
| ·隐性细胞核雄性不育的应用研究 | 第13页 |
| ·隐性细胞核雄性不育基因的定位 | 第13-15页 |
| ·隐性细胞核雄性不育的机理研究 | 第15-17页 |
| ·隐性细胞核雄性不育的细胞学研究 | 第15-16页 |
| ·隐性细胞核雄性不育的分子机理研究 | 第16-17页 |
| ·质量性状精细定位的分子标记 | 第17-23页 |
| ·特异引物PCR标记的来源途径 | 第18-20页 |
| ·分子标记开发的直接途径 | 第18-19页 |
| ·分子标记开发的间接途径 | 第19-20页 |
| ·特异引物PCR标记的类型 | 第20-23页 |
| ·SCAR标记 | 第20-21页 |
| ·SSR标记 | 第21页 |
| ·STS标记 | 第21-22页 |
| ·一种新型的分子标记——扩增共有序列遗传标记 | 第22-23页 |
| ·植物基因分离中的图位克隆技术 | 第23-32页 |
| ·图位克隆的原理与技术环节 | 第23-24页 |
| ·图位克隆中的关键点及应对措施 | 第24-25页 |
| ·图位克隆技术的新发展和新策略 | 第25-28页 |
| ·大基因组植物应用图位克隆策略的局限性 | 第28-29页 |
| ·大基因组植物中的图位克隆策略 | 第29-32页 |
| 2 本研究的目的和意义 | 第32-33页 |
| 3 材料与方法 | 第33-41页 |
| ·实验材料 | 第33页 |
| ·BSA与AFLP分析 | 第33-34页 |
| ·样品采集及DNA提取 | 第33页 |
| ·单株育性调查 | 第33-34页 |
| ·DNA混合池的构建 | 第34页 |
| ·AFLP分析 | 第34页 |
| ·AFLP标记的克隆、测序及分析 | 第34-36页 |
| ·差异片段的回收 | 第34-35页 |
| ·连接反应 | 第35页 |
| ·感受态细胞的制备及转化 | 第35页 |
| ·重组子的筛选、鉴定 | 第35页 |
| ·测序序列分析及比对 | 第35-36页 |
| ·AFLP标记的SCAR转化 | 第36-37页 |
| ·直接转化法 | 第36页 |
| ·间接转化法 | 第36-37页 |
| ·PCR-walking分离侧翼序列 | 第36页 |
| ·比较测序 | 第36-37页 |
| ·ms3基因的精细定位及遗传图谱的绘制 | 第37页 |
| ·ms3位点连锁标记与拟南芥基因组序列的相似性分析 | 第37页 |
| ·ACGM标记的开发 | 第37-38页 |
| ·BAC文库的筛选 | 第38-39页 |
| ·探针制备 | 第38页 |
| ·Southern杂交 | 第38页 |
| ·杂交信号的读取 | 第38页 |
| ·BAC克隆的阳性验证 | 第38-39页 |
| ·BAC克隆间重叠关系的确定 | 第39-40页 |
| ·BAC克隆质粒的抽提 | 第39页 |
| ·质粒的酶切、转膜、探针制备及Southern杂交 | 第39页 |
| ·BAC克隆重叠群的构建 | 第39-40页 |
| ·BAC克隆的测序 | 第40-41页 |
| ·BAC克隆亚克隆文库的构建 | 第40页 |
| ·亚克隆片段的测序 | 第40-41页 |
| 4 结果与分析 | 第41-60页 |
| ·定位群体单株的育性调查 | 第41页 |
| ·AFLP标记的筛选 | 第41-43页 |
| ·AFLP标记差异片段的回收、测序和SCAR转化 | 第43-48页 |
| ·直接源于AFLP序列的SCAR标记 | 第43-44页 |
| ·依据AFLP标记侧翼序列的SCAR标记 | 第44-46页 |
| ·标记侧翼序列的PCR-Walking分离 | 第44-46页 |
| ·依据侧翼序列的SCAR标记转化 | 第46页 |
| ·基于比较测序的SCAR标记 | 第46-48页 |
| ·目标位点连锁标记与拟南芥序列的同源性BLAST | 第48-49页 |
| ·ms3基因的精细遗传定位 | 第49-51页 |
| ·目标基因区域遗传距离的进一步缩小 | 第51-54页 |
| ·基于序列同源性比较的ACGM标记的开发 | 第52-53页 |
| ·ACGM标记在交换单株中的分析 | 第53-54页 |
| ·Tapiaor BAC文库的筛选及BAC克隆的阳性验证 | 第54-56页 |
| ·含有ms3基因的BAC重叠群的确定 | 第56-58页 |
| ·BAC克隆O的亚克隆文库的构建、测序 | 第58-60页 |
| 5 讨论 | 第60-69页 |
| ·与目标基因连锁更紧密标记的筛选 | 第60页 |
| ·SCAR标记的转化 | 第60-62页 |
| ·基于共线性比较的ACGM标记的开发 | 第62-64页 |
| ·ms3基因定位结果的比较分析 | 第64-66页 |
| ·研究中物理距离与遗传距离的对应关系问题 | 第66-67页 |
| ·进一步精细定位ms3基因的设想 | 第67-69页 |
| 参考文献 | 第69-83页 |
| 附录:部分实验的详细操作步骤 | 第83-86页 |
| 致谢 | 第86页 |
