摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-9页 |
1 引言 | 第9-13页 |
·玉米大斑病的发展概况 | 第9页 |
·真菌遗传转化的研究进展 | 第9-10页 |
·根癌农杆菌介导的真菌遗传转化的机理 | 第10-11页 |
·根癌农杆菌介导的丝状真菌转化的特点 | 第11-12页 |
·研究目的及意义 | 第12-13页 |
2 材料和方法 | 第13-23页 |
·供试菌株 | 第13页 |
·主要供试试剂及缓冲液 | 第13-14页 |
·培养基 | 第14页 |
·主要仪器和设备 | 第14页 |
·菌株的复壮 | 第14-15页 |
·农杆菌菌株的验证 | 第15-16页 |
·碱裂解法提取质粒 | 第15页 |
·质粒PCR检测 | 第15-16页 |
·ATMT转化条件的摸索 | 第16-17页 |
·抗生素对供试菌株的影响测定 | 第16页 |
·共培养时间对转化率的影响 | 第16-17页 |
·不同共培养方式及分生孢子状态对转化率的影响 | 第17页 |
·转化与筛选 | 第17页 |
·T-DNA插入的分子检测及稳定性分析 | 第17-20页 |
·转化子基因组DNA的提取 | 第17-18页 |
·琼脂糖凝胶电泳检测 | 第18页 |
·转化子PCR验证 | 第18-19页 |
·Southern blot分析及稳定性检测 | 第19-20页 |
·突变体的生物学研究 | 第20-21页 |
·转化子的菌落形态观察 | 第20-21页 |
·突变菌株生长速度的测定 | 第21页 |
·转化子的显微观察 | 第21页 |
·突变体产孢能力的测定 | 第21页 |
·突变菌株致病性鉴定 | 第21-23页 |
·玉米苗的种植 | 第21-22页 |
·菌种培养 | 第22页 |
·接菌菌饼的准备 | 第22页 |
·接种 | 第22页 |
·观察结果 | 第22页 |
·突变菌株致病力计算 | 第22-23页 |
3 结果与分析 | 第23-32页 |
·农杆菌菌株的验证 | 第23页 |
·转化条件的摸索 | 第23-26页 |
·潮霉素B对玉米大斑病菌分生孢子萌发和菌落生长的影响 | 第23-24页 |
·头孢噻肟钠、羧卞青霉素对农杆菌生长抑制的测定 | 第24-25页 |
·共培养时间对转化率的影响 | 第25页 |
·不同共培养方式及分生孢子活力对转化率的影响 | 第25-26页 |
·T-DNA插入的分子检测 | 第26-29页 |
·转化子的PCR验证 | 第27页 |
·转化子中的Southern blot检测验证 | 第27-28页 |
·转化子稳定性检测 | 第28-29页 |
·突变体的生物学研究 | 第29-32页 |
·玉米大斑病菌突变体的形态学观察与分析 | 第29-31页 |
·致病相关突变体的筛选结果 | 第31-32页 |
4 讨论 | 第32-35页 |
·关于不同转化体系的探讨 | 第32页 |
·关于农杆菌介导的遗传转化体系 | 第32-33页 |
·关于假阳性转化子现象的探讨 | 第33页 |
·关于致病相关突变体的筛选 | 第33页 |
·关于今后工作的设想 | 第33-35页 |
5 结论 | 第35-36页 |
参考文献 | 第36-42页 |
在读期间发表的学术论文 | 第42-43页 |
作者简历 | 第43-44页 |
致谢 | 第44-45页 |
附 发表文章 | 第45-46页 |