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农杆菌介导玉米大斑病菌的遗传转化

摘要第1-5页
Abstract第5-9页
1 引言第9-13页
   ·玉米大斑病的发展概况第9页
   ·真菌遗传转化的研究进展第9-10页
   ·根癌农杆菌介导的真菌遗传转化的机理第10-11页
   ·根癌农杆菌介导的丝状真菌转化的特点第11-12页
   ·研究目的及意义第12-13页
2 材料和方法第13-23页
   ·供试菌株第13页
   ·主要供试试剂及缓冲液第13-14页
   ·培养基第14页
   ·主要仪器和设备第14页
   ·菌株的复壮第14-15页
   ·农杆菌菌株的验证第15-16页
     ·碱裂解法提取质粒第15页
     ·质粒PCR检测第15-16页
   ·ATMT转化条件的摸索第16-17页
     ·抗生素对供试菌株的影响测定第16页
     ·共培养时间对转化率的影响第16-17页
     ·不同共培养方式及分生孢子状态对转化率的影响第17页
   ·转化与筛选第17页
   ·T-DNA插入的分子检测及稳定性分析第17-20页
     ·转化子基因组DNA的提取第17-18页
     ·琼脂糖凝胶电泳检测第18页
     ·转化子PCR验证第18-19页
     ·Southern blot分析及稳定性检测第19-20页
   ·突变体的生物学研究第20-21页
     ·转化子的菌落形态观察第20-21页
     ·突变菌株生长速度的测定第21页
     ·转化子的显微观察第21页
     ·突变体产孢能力的测定第21页
   ·突变菌株致病性鉴定第21-23页
     ·玉米苗的种植第21-22页
     ·菌种培养第22页
     ·接菌菌饼的准备第22页
     ·接种第22页
     ·观察结果第22页
     ·突变菌株致病力计算第22-23页
3 结果与分析第23-32页
   ·农杆菌菌株的验证第23页
   ·转化条件的摸索第23-26页
     ·潮霉素B对玉米大斑病菌分生孢子萌发和菌落生长的影响第23-24页
     ·头孢噻肟钠、羧卞青霉素对农杆菌生长抑制的测定第24-25页
     ·共培养时间对转化率的影响第25页
     ·不同共培养方式及分生孢子活力对转化率的影响第25-26页
   ·T-DNA插入的分子检测第26-29页
     ·转化子的PCR验证第27页
     ·转化子中的Southern blot检测验证第27-28页
     ·转化子稳定性检测第28-29页
   ·突变体的生物学研究第29-32页
     ·玉米大斑病菌突变体的形态学观察与分析第29-31页
     ·致病相关突变体的筛选结果第31-32页
4 讨论第32-35页
   ·关于不同转化体系的探讨第32页
   ·关于农杆菌介导的遗传转化体系第32-33页
   ·关于假阳性转化子现象的探讨第33页
   ·关于致病相关突变体的筛选第33页
   ·关于今后工作的设想第33-35页
5 结论第35-36页
参考文献第36-42页
在读期间发表的学术论文第42-43页
作者简历第43-44页
致谢第44-45页
附 发表文章第45-46页

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