| 提要 | 第1-10页 |
| 第一章 绪论 | 第10-44页 |
| ·乙酰辅酶A 羧化酶简介 | 第10-11页 |
| ·ACCase 的类型 | 第11-14页 |
| ·异质型ACCase | 第11-12页 |
| ·同质型ACCase | 第12-13页 |
| ·植物中的ACCase | 第13-14页 |
| ·ACCase 的基因 | 第14-16页 |
| ·异质型ACCase 的基因 | 第14-15页 |
| ·同质型ACCase 的基因 | 第15-16页 |
| ·ACCase 的结构 | 第16-23页 |
| ·生物素羧化酶（BC）的结构 | 第17-20页 |
| ·羧基转移酶（CT）的结构 | 第20-22页 |
| ·生物素载体蛋白（BCCP）的结构 | 第22-23页 |
| ·ACCase 的生物学功能 | 第23-27页 |
| ·ACCase 催化脂肪酸从头合成反应的第一步 | 第23-25页 |
| ·ACCase 是控制脂肪酸合成的关键限速酶 | 第25-26页 |
| ·不同细胞定位ACCase 的生物学功能 | 第26-27页 |
| ·ACCase 的酶学性质 | 第27-32页 |
| ·生物素羧化酶（BC）催化机理 | 第27-28页 |
| ·羧基转移酶（CT）催化机理 | 第28页 |
| ·ACCases 酶活力的影响因素 | 第28-30页 |
| ·ACCase 酶活性的调控 | 第30-32页 |
| ·ACCase 的抑制剂及其应用 | 第32-35页 |
| ·CT 功能域的抑制剂 | 第32-34页 |
| ·BC 功能域的抑制剂--Soraphen A | 第34-35页 |
| ·本研究意义及实验设计 | 第35-38页 |
| ·本研究意义 | 第35-37页 |
| ·实验设计 | 第37-38页 |
| ·参考文献 | 第38-44页 |
| 第二章 小麦质体ACCase CT功能域基因克隆 | 第44-77页 |
| ·引言 | 第44-45页 |
| ·实验设计 | 第45页 |
| ·实验材料 | 第45-48页 |
| ·实验方法 | 第48-65页 |
| ·小麦总RNA 提取 | 第48-50页 |
| ·小麦cDNA 文库的制备—逆转录反应 | 第50-51页 |
| ·PCR 扩增小麦ACCase CT 功能域基因 | 第51-55页 |
| ·目的基因片段的克隆与连接 | 第55-65页 |
| ·结果与讨论 | 第65-75页 |
| ·小麦ACCase CT 功能域基因的确定 | 第65-66页 |
| ·植物来源及基因特异性引物设计 | 第66-67页 |
| ·小麦栽培 | 第67-68页 |
| ·小麦幼苗总RNA 提取 | 第68-70页 |
| ·中国春小麦ACCase cDNA 合成 | 第70页 |
| ·PCR 扩增目的基因 | 第70-72页 |
| ·目的基因的T-A 克隆 | 第72-73页 |
| ·目的基因片段的连接及克隆 | 第73-75页 |
| ·目的基因的确定 | 第75页 |
| ·小结 | 第75-76页 |
| ·参考文献 | 第76-77页 |
| 第三章 序列分析及蛋白性质预测 | 第77-88页 |
| ·引言 | 第77-78页 |
| ·生物信息学工具 | 第78页 |
| ·分子生物学软件 | 第78页 |
| ·网络资源 | 第78页 |
| ·结果与讨论 | 第78-87页 |
| ·RCP18-5 与中国春小麦CT 功能域序列比较 | 第78-80页 |
| ·ACCase 基因序列同源性分析 | 第80-82页 |
| ·RCP18-5 编码蛋白序列生成及序列比对 | 第82页 |
| ·RCP18-5 编码蛋白基本性质预测 | 第82-87页 |
| ·小结 | 第87-88页 |
| 第四章 基因表达 | 第88-107页 |
| ·前言 | 第88页 |
| ·实验设计 | 第88-89页 |
| ·实验材料 | 第89-92页 |
| ·实验方法 | 第92-98页 |
| ·RCP18-5 重组质粒转化大肠杆菌 | 第92-93页 |
| ·目的基因的诱导表达 | 第93页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第93-95页 |
| ·表达条件的优化 | 第95-98页 |
| ·结果与讨论 | 第98-105页 |
| ·表达载体 | 第98-99页 |
| ·重组质粒的表达 | 第99-100页 |
| ·表达条件的优化 | 第100-105页 |
| ·小结 | 第105-107页 |
| 第五章 重组蛋白的纯化 | 第107-115页 |
| ·前言 | 第107-108页 |
| ·实验材料 | 第108-109页 |
| ·实验方法 | 第109-112页 |
| ·细胞破碎及蛋白提取 | 第109页 |
| ·Ni-亲合层析纯化 | 第109-111页 |
| ·凝胶过滤层析纯化目标蛋白 | 第111-112页 |
| ·结果与讨论 | 第112-114页 |
| ·亲合层析纯化蛋白 | 第112-113页 |
| ·凝胶过滤层析纯化蛋白 | 第113-114页 |
| ·小结 | 第114-115页 |
| 第六章 重组蛋白的性质 | 第115-138页 |
| ·前言 | 第115-116页 |
| ·实验材料 | 第116-118页 |
| ·实验方法 | 第118-124页 |
| ·重组蛋白的稳定性 | 第118-119页 |
| ·重组蛋白的聚合形式 | 第119-120页 |
| ·底物及除草剂与重组蛋白的相互作用 | 第120-122页 |
| ·不同长度基因的表达 | 第122-124页 |
| ·结果与讨论 | 第124-136页 |
| ·蛋白稳定性 | 第124-126页 |
| ·重组蛋白的聚合形式 | 第126-127页 |
| ·底物及除草剂与重组蛋白的相互作用 | 第127-132页 |
| ·不同长度基因的表达 | 第132-136页 |
| ·小结 | 第136-137页 |
| ·参考文献 | 第137-138页 |
| 全文总结 | 第138-141页 |
| 1. 已取得成果 | 第138-139页 |
| 2. 研究中存在的问题 | 第139页 |
| 3. 展望 | 第139-140页 |
| 参考文献 | 第140-141页 |
| 附录 | 第141-144页 |
| 博士论文期间主要成果 | 第144-146页 |
| 中文摘要 | 第146-151页 |
| Abstract | 第151-155页 |
| 作者简历 | 第155-156页 |
| 致谢 | 第156页 |