| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 第一章 前言 | 第12-28页 |
| 1 沙田柚生产概况 | 第12-13页 |
| 2 植物遗传转化的研究进展 | 第13-18页 |
| ·利用载体系统遗传转化 | 第13-15页 |
| ·直接遗传转化 | 第15-18页 |
| 3 柑橘遗传转化的研究进展 | 第18-24页 |
| 4 本研究目的及意义 | 第24-27页 |
| ·无核研究目的及意义 | 第24-26页 |
| ·矮化研究目的及意义 | 第26-27页 |
| 5 本研究的主要内容 | 第27-28页 |
| 第二章 沙田柚离体再生体系的建立 | 第28-36页 |
| 1 实验材料 | 第28-29页 |
| ·植物材料 | 第28页 |
| ·生化试剂 | 第28页 |
| ·主要仪器和设备 | 第28页 |
| ·培养基 | 第28-29页 |
| 2 实验方法 | 第29-30页 |
| ·沙田柚无菌苗繁殖体系的建立 | 第29页 |
| ·外植体不定芽再生能力的比较 | 第29页 |
| ·基本培养基对上胚轴不定芽再生能力的影响 | 第29页 |
| ·6-BA浓度对上胚轴不定芽再生能力的影响 | 第29-30页 |
| ·激素组合对上胚轴不定芽再生能力的影响 | 第30页 |
| ·活性炭对上胚轴不定芽再生能力的影响 | 第30页 |
| 3 结果与分析 | 第30-34页 |
| ·外植体不定芽再生率的影响 | 第30-31页 |
| ·基本培养基对上胚轴不定芽再生率的影响 | 第31-32页 |
| ·6-BA浓度对上胚轴不定芽再生率的影响 | 第32-33页 |
| ·激素组合对上胚轴不定芽再生率的影响 | 第33-34页 |
| ·活性炭对上胚轴不定芽再生的影响 | 第34页 |
| 4 讨论 | 第34-36页 |
| 第三章 沙田柚遗传转化体系的建立与优化 | 第36-51页 |
| 1 实验材料 | 第36页 |
| ·植物受体材料 | 第36页 |
| ·质粒和农杆菌菌株 | 第36页 |
| ·生化试剂 | 第36页 |
| ·主要仪器和设备 | 第36页 |
| 2 实验方法 | 第36-39页 |
| ·根癌农杆菌的活化及工程菌液的制备 | 第36-37页 |
| ·上胚轴不定芽诱导对卡拉霉素筛选剂的敏感性 | 第37页 |
| ·抗生素对农杆菌的抑制作用 | 第37页 |
| ·转化方法和转化条件的优化 | 第37-38页 |
| ·外值体的预培养 | 第37-38页 |
| ·适宜共培养时间的确定 | 第38页 |
| ·共培培养基中加入乙酰丁香酮对转化效果的影响 | 第38页 |
| ·菌液浓度对转化效果的影响 | 第38页 |
| ·侵染时间对转化效果的影响 | 第38页 |
| ·农杆菌介导的基因转化 | 第38-39页 |
| 3 结果与分析 | 第39-47页 |
| ·农杆菌菌株对转化的影响 | 第39页 |
| ·上胚轴不定芽诱导对卡拉霉素筛选剂的敏感性 | 第39-40页 |
| ·头孢霉素和羧苄青霉素对农杆菌的抑菌效果 | 第40-42页 |
| ·预培养对转化的影响 | 第42-43页 |
| ·适宜共培养时间的确定 | 第43-44页 |
| ·乙酰丁香酮对转化效果的影响 | 第44页 |
| ·农杆菌菌液浓度对转化的影响 | 第44-45页 |
| ·侵染时间对转化效果的影响 | 第45-46页 |
| ·抗性芽的获得 | 第46-47页 |
| 4 抗性芽的成苗 | 第47页 |
| 5 讨论 | 第47-51页 |
| ·抗生素的使用 | 第47-48页 |
| ·预培养的作用 | 第48-49页 |
| ·乙酰丁香酮的作用 | 第49-50页 |
| ·小结 | 第50-51页 |
| 第四章 转基因植株的分子检测 | 第51-57页 |
| 1 实验材料 | 第51-52页 |
| ·植物材料 | 第51页 |
| ·生化试剂 | 第51页 |
| ·扩增引物 | 第51页 |
| ·主要仪器和设备 | 第51-52页 |
| 2 实验方法 | 第52-54页 |
| ·质粒 DNA的提取 | 第52页 |
| ·转化植株基因组 DNA提取 | 第52-53页 |
| ·PCR分子检测 | 第53-54页 |
| ·PCR反应体系 | 第53-54页 |
| ·npt II、DefH9-iaaM5、Rol B和 Rol C基因 PCR扩增程序 | 第54页 |
| ·Rol A基因 PCR扩增程序 | 第54页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第54页 |
| 3 结果分析 | 第54-55页 |
| ·适合于 PCR的 DNA的制备 | 第54页 |
| ·转化植株 PCR检测结果 | 第54-55页 |
| 4 讨论 | 第55-57页 |
| 第五章 总结 | 第57-59页 |
| 参考文献 | 第59-68页 |
| 附录 常用培养基配方 | 第68-71页 |
| 图版 | 第71-73页 |
| 致谢 | 第73页 |