| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 前言 | 第10-25页 |
| 一,溶菌酶的分类 | 第10-11页 |
| 二,N-乙酰胞壁酰-L-丙氨酸酰胺酶和内肽酶的研究进展 | 第11-15页 |
| 1.N-乙酰胞壁酰-L-丙氨酸酰胺酶研究进展 | 第11-12页 |
| 2.内肽酶研究进展 | 第12页 |
| 3.微生物中的N-乙酰胞壁酰-L-丙氨酸酰胺酶和内肽酶 | 第12-14页 |
| 4.N-乙酰胞壁酰-L-丙氨酰酰胺酶和内肽酶的应用 | 第14-15页 |
| 三,链霉菌溶菌酶的研究进展 | 第15-17页 |
| 1.球孢链霉菌(S.globisporus)及变溶菌素(Mutanolysin) | 第16页 |
| 2.白色链霉菌(S.albus) | 第16页 |
| 3.灰色链霉菌(S.griseus) | 第16-17页 |
| 4.其他链霉菌 | 第17页 |
| 四,本课题立题依据及前景分析 | 第17-20页 |
| 五,本课题的研究方法 | 第20-25页 |
| 1.CODEHOP技术 | 第20-21页 |
| 2.TAIL-PCR技术 | 第21-25页 |
| 第一章 链霉菌溶菌酶系基因保守区段DNA序列的克隆 | 第25-38页 |
| 1 材料与方法 | 第25-30页 |
| ·材料 | 第25-26页 |
| ·方法 | 第26-30页 |
| ·链霉菌染色体DNA的提取 | 第26-27页 |
| ·PCR扩增内肽酶，酰胺酶保守区 | 第27-28页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳及DNA片段的回收、纯化 | 第28页 |
| ·连接反应 | 第28页 |
| ·E.coli感受态细胞的制备及转化反应 | 第28-29页 |
| ·重组质粒的筛选,鉴定及测序 | 第29-30页 |
| 2 结果与讨论 | 第30-36页 |
| ·用于扩增保守区的CODEHOP引物的设计与PCR扩增保守区 | 第30-33页 |
| ·内肽酶、酰胺酶保守区段的克隆,鉴定及同源性分析 | 第33-36页 |
| 3 小结 | 第36-38页 |
| 第二章 全长内肽酶基因的克隆及序列分析 | 第38-52页 |
| 1 材料与方法 | 第38-40页 |
| ·材料 | 第38页 |
| ·方法 | 第38-40页 |
| 2 结果与讨论 | 第40-51页 |
| ·TAIL-PCR引物的设计及扩增保守区段的上下游序列 | 第40-43页 |
| ·测序结果分析 | 第43-51页 |
| 3 小结 | 第51-52页 |
| 第三章 内肽酶基因在大肠杆菌中的表达及重组内肽酶活性鉴定 | 第52-61页 |
| 1 材料与方法 | 第52-54页 |
| ·材料 | 第52页 |
| ·方法 | 第52-54页 |
| 2 结果与讨论 | 第54-60页 |
| ·内肽酶R4基因克隆至pET26-b(+)载体 | 第54-59页 |
| ·内肽酶R4基因在E.coli BL21(DE3)plySs中的诱导表达 | 第59页 |
| ·重组内肽酶R4的酶学性质分析 | 第59-60页 |
| 3 小结 | 第60-61页 |
| 第四章 S106 N,O-二乙酰胞壁质酶R2基因的调控序列研究 | 第61-67页 |
| 1 材料与方法 | 第61-62页 |
| ·材料 | 第61页 |
| ·方法 | 第61-62页 |
| 2 结果与讨论 | 第62-66页 |
| ·TAIL-PCR引物的设计及R2基因上游序列的扩增 | 第62-63页 |
| ·测序结果分析 | 第63-66页 |
| 3 小结 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第71页 |
