中文摘要 | 第1-8页 |
英文摘要 | 第8-10页 |
文献综述 | 第10-25页 |
1. GDF11 的研究现状 | 第10-17页 |
·GDF11 的发现 | 第10页 |
·GDF11 的结构,同源性分析及染色体定位 | 第10-11页 |
·GDF11 的功能研究 | 第11-14页 |
·GDF11 在整个胚体和各个组织器官发育中的表达情况 | 第14-16页 |
·GDF11 的信号传导通路 | 第16页 |
·GDF11 的表达调控 | 第16-17页 |
2. DNA 甲基化的研究概况 | 第17-24页 |
·表观遗传学发展简史及其概述 | 第17-18页 |
·哺乳动物DNA 甲基化的研究概况 | 第18-19页 |
·哺乳动物DNA 甲基化的研究方法 | 第19-21页 |
·DNA甲基化抑制剂5-azaC和5-aza-dC在表观遗传学研究中的应用 | 第21-24页 |
3. 本研究的目的与意义 | 第24-25页 |
第一部分 DNA甲基化抑制剂5-azaC对猪LLC-PK1细胞 GDF11表达的影响 | 第25-40页 |
1. 材料与方法 | 第25-31页 |
·实验材料 | 第25-26页 |
·实验方法 | 第26-31页 |
2. 结果 | 第31-37页 |
·LLC-PK1 细胞的生长行为及形态观察 | 第31页 |
·5-azaC 处理后细胞的生长行为及形态观察 | 第31-33页 |
·总RNA 的提取与检测 | 第33-34页 |
·猪GDF11 表达的半定量PCR 分析 | 第34-37页 |
3. 讨论 | 第37-40页 |
第二部分 猪GDF11 蛋白羧基末端多肽在大肠杆菌内的表达及表达产物的初步纯化 | 第40-58页 |
1. 材料与方法 | 第40-49页 |
·实验材料 | 第40-41页 |
·实验方法 | 第41-49页 |
2. 结果 | 第49-54页 |
·表达质粒pGEX-6p-1-GDF11 构建及鉴定 | 第49-50页 |
·PCR 引物的位置及扩增序列 | 第50-51页 |
·猪GDF11 部分编码区序列的PCR 扩增 | 第51-52页 |
·表达质粒pGEX-6p-1-GDF11 的酶切鉴定 | 第52-53页 |
·表达质粒pGEX-6p-1-GDF11 的测序鉴定 | 第53页 |
·GST-GDF11 融合蛋白的表达 | 第53-54页 |
·GST-GDF11 融合蛋白的初步纯化 | 第54页 |
·GST-GDF11 融合蛋白浓度测定 | 第54页 |
3. 讨论 | 第54-58页 |
结论 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-64页 |
附录 | 第64-66页 |
致谢 | 第66-68页 |
在读期间发表论文情况 | 第68页 |