| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 第一部分 引言 | 第10-46页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-37页 |
| 第一节 VEGF与肿瘤的关系及研究进展 | 第10-16页 |
| 1 血管生成与肿瘤 | 第10-12页 |
| 2 VEGF的生物学功能 | 第12页 |
| 3 VEGF的生物学特性及信号转导 | 第12-14页 |
| 4 VEGF的表达调控 | 第14-15页 |
| 5 VEGF在肿瘤治疗研究中的研究进展及存在的问题 | 第15-16页 |
| 第二节 斑马鱼作为模式生物的优势及其研究进展 | 第16-23页 |
| 1 斑马鱼模式生物在新药研发中的应用研究 | 第17-18页 |
| 2 斑马鱼抗肿瘤模型生物的研究进展 | 第18-20页 |
| 3 斑马鱼心血管障碍模型的研究进展 | 第20页 |
| 4 以斑马鱼为模型研究造血系统疾病 | 第20-23页 |
| 第三节 RNA干扰及其研究进展 | 第23-33页 |
| 1 RNAi的作用机制 | 第23-25页 |
| 2 RNAi的分子生物学特性 | 第25页 |
| 3 RNAi的制备 | 第25-27页 |
| 4 RNAi的转导 | 第27-28页 |
| 5 RNAi技术在斑马鱼中的研究进展 | 第28-29页 |
| 6 RNAi在其它生物中的的应用研究进展 | 第29-31页 |
| ·RNAi在反向遗传学中的应用 | 第29-30页 |
| ·RNAi在高通量基因功能研究中的应用 | 第30页 |
| ·RNAi在信号转导通路中的应用 | 第30-31页 |
| ·RNAi在疾病基因治疗中的应用 | 第31页 |
| 7 问题和展望 | 第31-33页 |
| 第四节 斑马鱼VEGF基因的研究进展及应用RNA干扰技术沉默斑马鱼VEGF基因的重要意义 | 第33-37页 |
| 1 斑马鱼VEGF基因的研究进展 | 第33-34页 |
| 2 应用RNA干扰技术沉默斑马鱼VEGF基因的重要意义 | 第34-36页 |
| 3 研究的技术路线 | 第36-37页 |
| 参考文献 | 第37-46页 |
| 第二部分 靶向VEGF干扰质粒的构建、有效序列筛选及其对斑马鱼胚胎血管发育的影响 | 第46-112页 |
| 前言 | 第46-49页 |
| 第二章 斑马鱼VEGF shRNA表达载体的构建 | 第49-66页 |
| 1 材料和方法 | 第49-57页 |
| ·实验材料 | 第49-50页 |
| ·实验方法 | 第50-57页 |
| 2 结果 | 第57-61页 |
| ·含VEGF siRNA特异序列的寡核苷酸单链的设计与合成 | 第57-59页 |
| ·表达质粒的构建 | 第59-61页 |
| ·表达质粒的测序鉴定 | 第61页 |
| ·表达质粒的制备 | 第61页 |
| 3 讨论 | 第61-63页 |
| 参考文献 | 第63-66页 |
| 第三章 VEGF shRNA有效序列筛选及其对斑马鱼胚胎血管发育的影响 | 第66-109页 |
| 第一节 shRNA有效序列筛选 | 第68-75页 |
| 1 材料和方法 | 第68-70页 |
| ·实验材料 | 第68-69页 |
| ·实验方法 | 第69-70页 |
| 2 实验结果 | 第70-72页 |
| ·shRNA的导入 | 第70-71页 |
| ·不同靶序列对VEGF基因表达的抑制作用 | 第71-72页 |
| 3 讨论 | 第72-75页 |
| 第二节 shRNA对斑马鱼VEGF基因的沉默作用 | 第75-91页 |
| 1 材料和方法 | 第75-79页 |
| ·实验材料 | 第75页 |
| ·实验方法 | 第75-79页 |
| 2 实验结果 | 第79-87页 |
| ·pS1-VEGF对斑马鱼胚胎形态发育的影响 | 第79页 |
| ·pS1-VEGF对斑马鱼胚胎血管生成影响的定量碱性磷酸酶检测 | 第79-80页 |
| ·pS1-VEGF对斑马鱼血管生长影响的NBT/BCIP血管染色检测 | 第80-81页 |
| ·不同剂量的pS1-VEGF对斑马鱼肠下静脉生长的影响 | 第81页 |
| ·不同剂量的pS1-VEGF对斑马鱼节间血管生长的影响 | 第81-84页 |
| ·斑马鱼表型缺陷与pS1-VEGF的剂量关系 | 第84页 |
| ·不同剂量的pS1-VEGF对VEGF基因表达的影响及最佳剂量确定 | 第84-85页 |
| ·pS1-VEGF干扰效果的特异性研究 | 第85-87页 |
| 3 讨论 | 第87-91页 |
| 第三节 VEGF siRNA对斑马鱼VEGF及NRP1 基因表达影响的原位杂交检测 | 第91-104页 |
| 1 材料和方法 | 第91-99页 |
| ·实验材料 | 第91页 |
| ·实验方法 | 第91-99页 |
| 2 实验结果 | 第99-103页 |
| ·VEGF基因探针制备 | 第99-100页 |
| ·NRP1 基因探针制备 | 第100-101页 |
| ·pS1-VEGF对VEGF基因表达的影响 | 第101-102页 |
| ·pS1-VEGF对NRP1 基因表达的影响 | 第102-103页 |
| 3 讨论 | 第103-104页 |
| 参考文献 | 第104-109页 |
| 第四章 结语 | 第109-112页 |
| 1 主要实验结果和结论 | 第109-110页 |
| 2 创新点和研究意义 | 第110-112页 |
| 发表文章目录 | 第112-113页 |
| 致谢 | 第113页 |
