摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-15页 |
前言 | 第15-18页 |
第一章 哺乳动物异种体细胞核移植的研究进展 | 第18-39页 |
·异种核移植技术的发展史 | 第18-23页 |
·自然界的种间杂交 | 第18-19页 |
·低等脊椎动物的异种间核移植 | 第19页 |
·哺乳动物的异种受精和胚胎移植 | 第19-20页 |
·哺乳动物异种间的胚胎移植 | 第20-21页 |
·异种胚胎细胞核移植 | 第21-22页 |
·异种体细胞核移植 | 第22-23页 |
·异种核移植的理论背景 | 第23-24页 |
·异种核移植的研究机理 | 第24-29页 |
·细胞周期 | 第24-26页 |
·MPF 的调控 | 第26-27页 |
·Ca~(2+)启动核的再程序化 | 第27页 |
·线粒体问题 | 第27页 |
·卵胞质对供体核的再程序化作用 | 第27-28页 |
·DNA 甲基/去甲基化 | 第28页 |
·X 染色体失活 | 第28页 |
·核质运输 | 第28-29页 |
·影响异种核移植效率的因素 | 第29-30页 |
·供体细胞周期 | 第29页 |
·不同胞质受体或核供体 | 第29-30页 |
·重构胚的性别 | 第30页 |
·异种核移植遗传物质的检测 | 第30-34页 |
·染色体分析 | 第30-31页 |
·核DNA 分析 | 第31-32页 |
·线粒体DNA 分析 | 第32-33页 |
·端粒DNA 分析 | 第33-34页 |
·异种核移植技术的应用前景 | 第34-36页 |
·在医学领域中的应用 | 第34页 |
·在畜牧业生产上的应用 | 第34-35页 |
·拯救濒危动物 | 第35-36页 |
·异种核移植存在的问题和解决办法 | 第36-38页 |
·存在的问题 | 第36-37页 |
·解决方法 | 第37-38页 |
·展望 | 第38-39页 |
第二章 哺乳动物线粒体的研究进展 | 第39-51页 |
·动物线粒体结构和功能 | 第39-40页 |
·线粒体的D-loop 结构 | 第39-40页 |
·线粒体功能 | 第40页 |
·MTDNA | 第40-43页 |
·mtDNA 拷贝数 | 第40页 |
·mtDNA 的复制 | 第40-41页 |
·mtDNA 的转录 | 第41-42页 |
·线粒体蛋白质基因的翻译 | 第42-43页 |
·线粒体基因与核基因相互作用 | 第43-44页 |
·动物线粒体遗传学特点 | 第44-45页 |
·母性遗传 | 第44-45页 |
·父性遗传 | 第45页 |
·核移植中线粒体的命运 | 第45-48页 |
·胚胎细胞核移植中线粒体的命运 | 第46页 |
·同种体细胞核移植中线粒体的命运 | 第46-47页 |
·异种核移植中线粒体的命运 | 第47-48页 |
·线粒体的分布与功能的关系 | 第48-49页 |
·线粒体移植 | 第49-50页 |
·研究前景 | 第50-51页 |
第三章 牛、绵羊MTDNA RQ-PCR 检测标准的构建 | 第51-62页 |
·材料和方法 | 第52-57页 |
·质粒和菌种 | 第52页 |
·试剂和仪器 | 第52-53页 |
·PCR 模板的制备 | 第53页 |
·特异性引物设计 | 第53-54页 |
·PCR 扩增 | 第54页 |
·目的片段的克隆、鉴定 | 第54-57页 |
·荧光定量PCR | 第57页 |
·试验结果 | 第57-59页 |
·特异性引物扩增结果 | 第57页 |
·转化后鉴定结果 | 第57-58页 |
·OD 值测定及质粒浓度换算 | 第58-59页 |
·荧光定量PCR 扩增后标准曲线的形成 | 第59页 |
·讨论 | 第59-61页 |
·小结 | 第61-62页 |
第四章 牛卵母细胞内线粒体的量与质量的关系 | 第62-68页 |
·材料和方法 | 第63-64页 |
·试验材料 | 第63页 |
·试剂与仪器 | 第63页 |
·卵母细胞的采集与培养 | 第63页 |
·牛mtDNA 定量PCR 标准曲线的制备 | 第63页 |
·孤雌激活 | 第63-64页 |
·模板的制备 | 第64页 |
·mtDNA 定量PCR | 第64页 |
·数据统计 | 第64页 |
·结果 | 第64-65页 |
·mtDNA 定量 | 第64-65页 |
·孤雌激活胚胎的发育 | 第65页 |
·讨论 | 第65-67页 |
·小结 | 第67-68页 |
第五章 线粒体移植对牛孤雌胚和ICSI 胚发育的影响 | 第68-77页 |
·材料与方法 | 第69-71页 |
·材料 | 第69页 |
·卵母细胞的采集 | 第69页 |
·显微注射用玻璃针的制备 | 第69-70页 |
·线粒体分离 | 第70页 |
·线粒体染色 | 第70页 |
·线粒体移植和ICSI | 第70-71页 |
·线粒体移植和孤雌激活 | 第71页 |
·胚胎培养和囊胚细胞计数 | 第71页 |
·统计分析 | 第71页 |
·结果 | 第71-73页 |
·线粒体注射对ICSI 胚的影响 | 第71页 |
·线粒体注射对孤雌激活胚的影响 | 第71-72页 |
·胚胎发育过程中线粒体荧光变化 | 第72-73页 |
·囊胚细胞数 | 第73页 |
·讨论 | 第73-76页 |
·小结 | 第76-77页 |
第六章 牛体细胞核移植胚中线粒体命运 | 第77-84页 |
·材料与方法 | 第78-79页 |
·试剂与材料 | 第78页 |
·卵母细胞培养 | 第78页 |
·供体细胞的准备 | 第78-79页 |
·核移植和胚胎培养 | 第79页 |
·统计分析 | 第79页 |
·结果 | 第79-81页 |
·供体细胞培养 | 第79页 |
·供体细胞类型对核移植胚的影响 | 第79-80页 |
·荧光探针对胚胎发育的影响 | 第80-81页 |
·荧光探针的检测 | 第81页 |
·讨论 | 第81-83页 |
·小结 | 第83-84页 |
第七章 牛-绵羊异种核移植早期胚胎的发育 | 第84-90页 |
·材料与方法 | 第84-86页 |
·试剂与仪器 | 第84-85页 |
·绵羊胎儿成纤维细胞培养 | 第85页 |
·卵母细胞成熟培养 | 第85页 |
·核移植和胚胎培养 | 第85页 |
·胚胎质量分析 | 第85页 |
·染色体分析 | 第85-86页 |
·统计分析 | 第86页 |
·结果 | 第86-88页 |
·胚胎发育潜力 | 第86页 |
·胚胎形态学特点 | 第86-87页 |
·染色体数目 | 第87页 |
·囊胚细胞数 | 第87-88页 |
·讨论 | 第88-89页 |
·小结 | 第89-90页 |
第八章 牛-绵羊异种核移植胚中线粒体的命运 | 第90-96页 |
·材料与方法 | 第91-92页 |
·材料与试剂 | 第91页 |
·核移植 | 第91页 |
·牛、绵羊特异性引物设计和RQ-PCR 标准品制备 | 第91页 |
·分离卵裂球 | 第91页 |
·mtDNA 模板的制备 | 第91-92页 |
·RQ-PCR 分析 | 第92页 |
·统计分析 | 第92页 |
·结果 | 第92-93页 |
·两种线粒体的分配 | 第92页 |
·同一胚胎中mtDNA 的变化 | 第92-93页 |
·讨论 | 第93-95页 |
·小结 | 第95-96页 |
参考文献 | 第96-117页 |
结论 | 第117-119页 |
致谢 | 第119-120页 |
作者简介 | 第120页 |