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体细胞核移植及线粒体命运的研究

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-15页
前言第15-18页
第一章 哺乳动物异种体细胞核移植的研究进展第18-39页
   ·异种核移植技术的发展史第18-23页
     ·自然界的种间杂交第18-19页
     ·低等脊椎动物的异种间核移植第19页
     ·哺乳动物的异种受精和胚胎移植第19-20页
     ·哺乳动物异种间的胚胎移植第20-21页
     ·异种胚胎细胞核移植第21-22页
     ·异种体细胞核移植第22-23页
   ·异种核移植的理论背景第23-24页
   ·异种核移植的研究机理第24-29页
     ·细胞周期第24-26页
     ·MPF 的调控第26-27页
     ·Ca~(2+)启动核的再程序化第27页
     ·线粒体问题第27页
     ·卵胞质对供体核的再程序化作用第27-28页
     ·DNA 甲基/去甲基化第28页
     ·X 染色体失活第28页
     ·核质运输第28-29页
   ·影响异种核移植效率的因素第29-30页
     ·供体细胞周期第29页
     ·不同胞质受体或核供体第29-30页
     ·重构胚的性别第30页
   ·异种核移植遗传物质的检测第30-34页
     ·染色体分析第30-31页
     ·核DNA 分析第31-32页
     ·线粒体DNA 分析第32-33页
     ·端粒DNA 分析第33-34页
   ·异种核移植技术的应用前景第34-36页
     ·在医学领域中的应用第34页
     ·在畜牧业生产上的应用第34-35页
     ·拯救濒危动物第35-36页
   ·异种核移植存在的问题和解决办法第36-38页
     ·存在的问题第36-37页
     ·解决方法第37-38页
   ·展望第38-39页
第二章 哺乳动物线粒体的研究进展第39-51页
   ·动物线粒体结构和功能第39-40页
     ·线粒体的D-loop 结构第39-40页
     ·线粒体功能第40页
   ·MTDNA第40-43页
     ·mtDNA 拷贝数第40页
     ·mtDNA 的复制第40-41页
     ·mtDNA 的转录第41-42页
     ·线粒体蛋白质基因的翻译第42-43页
   ·线粒体基因与核基因相互作用第43-44页
   ·动物线粒体遗传学特点第44-45页
     ·母性遗传第44-45页
     ·父性遗传第45页
   ·核移植中线粒体的命运第45-48页
     ·胚胎细胞核移植中线粒体的命运第46页
     ·同种体细胞核移植中线粒体的命运第46-47页
     ·异种核移植中线粒体的命运第47-48页
   ·线粒体的分布与功能的关系第48-49页
   ·线粒体移植第49-50页
   ·研究前景第50-51页
第三章 牛、绵羊MTDNA RQ-PCR 检测标准的构建第51-62页
   ·材料和方法第52-57页
     ·质粒和菌种第52页
     ·试剂和仪器第52-53页
     ·PCR 模板的制备第53页
     ·特异性引物设计第53-54页
     ·PCR 扩增第54页
     ·目的片段的克隆、鉴定第54-57页
     ·荧光定量PCR第57页
   ·试验结果第57-59页
     ·特异性引物扩增结果第57页
     ·转化后鉴定结果第57-58页
     ·OD 值测定及质粒浓度换算第58-59页
     ·荧光定量PCR 扩增后标准曲线的形成第59页
   ·讨论第59-61页
   ·小结第61-62页
第四章 牛卵母细胞内线粒体的量与质量的关系第62-68页
   ·材料和方法第63-64页
     ·试验材料第63页
     ·试剂与仪器第63页
     ·卵母细胞的采集与培养第63页
     ·牛mtDNA 定量PCR 标准曲线的制备第63页
     ·孤雌激活第63-64页
     ·模板的制备第64页
     ·mtDNA 定量PCR第64页
     ·数据统计第64页
   ·结果第64-65页
     ·mtDNA 定量第64-65页
     ·孤雌激活胚胎的发育第65页
   ·讨论第65-67页
   ·小结第67-68页
第五章 线粒体移植对牛孤雌胚和ICSI 胚发育的影响第68-77页
   ·材料与方法第69-71页
     ·材料第69页
     ·卵母细胞的采集第69页
     ·显微注射用玻璃针的制备第69-70页
     ·线粒体分离第70页
     ·线粒体染色第70页
     ·线粒体移植和ICSI第70-71页
     ·线粒体移植和孤雌激活第71页
     ·胚胎培养和囊胚细胞计数第71页
     ·统计分析第71页
   ·结果第71-73页
     ·线粒体注射对ICSI 胚的影响第71页
     ·线粒体注射对孤雌激活胚的影响第71-72页
     ·胚胎发育过程中线粒体荧光变化第72-73页
     ·囊胚细胞数第73页
   ·讨论第73-76页
   ·小结第76-77页
第六章 牛体细胞核移植胚中线粒体命运第77-84页
   ·材料与方法第78-79页
     ·试剂与材料第78页
     ·卵母细胞培养第78页
     ·供体细胞的准备第78-79页
     ·核移植和胚胎培养第79页
     ·统计分析第79页
   ·结果第79-81页
     ·供体细胞培养第79页
     ·供体细胞类型对核移植胚的影响第79-80页
     ·荧光探针对胚胎发育的影响第80-81页
     ·荧光探针的检测第81页
   ·讨论第81-83页
   ·小结第83-84页
第七章 牛-绵羊异种核移植早期胚胎的发育第84-90页
   ·材料与方法第84-86页
     ·试剂与仪器第84-85页
     ·绵羊胎儿成纤维细胞培养第85页
     ·卵母细胞成熟培养第85页
     ·核移植和胚胎培养第85页
     ·胚胎质量分析第85页
     ·染色体分析第85-86页
     ·统计分析第86页
   ·结果第86-88页
     ·胚胎发育潜力第86页
     ·胚胎形态学特点第86-87页
     ·染色体数目第87页
     ·囊胚细胞数第87-88页
   ·讨论第88-89页
   ·小结第89-90页
第八章 牛-绵羊异种核移植胚中线粒体的命运第90-96页
   ·材料与方法第91-92页
     ·材料与试剂第91页
     ·核移植第91页
     ·牛、绵羊特异性引物设计和RQ-PCR 标准品制备第91页
     ·分离卵裂球第91页
     ·mtDNA 模板的制备第91-92页
     ·RQ-PCR 分析第92页
     ·统计分析第92页
   ·结果第92-93页
     ·两种线粒体的分配第92页
     ·同一胚胎中mtDNA 的变化第92-93页
   ·讨论第93-95页
   ·小结第95-96页
参考文献第96-117页
结论第117-119页
致谢第119-120页
作者简介第120页

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