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柱状黄杆菌胞外和外膜蛋白及草鱼鳃粘液的蛋白质组学研究

中文摘要第1-6页
英文摘要第6-8页
缩略语表第8-14页
第一章 文献综述:蛋白质组学研究技术及其在病原菌研究中的应用第14-30页
 1. 蛋白质组和蛋白质组学的概念第14-16页
 2. 蛋白质组学研究技术第16-25页
   ·蛋白质组分离技术第16-18页
   ·蛋白质组鉴定技术第18-22页
     ·电喷雾(ESI)质谱第18-19页
     ·基质辅助激光解析(MALDI)质谱第19-20页
     ·一些新的鉴定技术第20-22页
   ·蛋白质相互作用的研究技术第22-25页
     ·酵母双杂交第22-23页
     ·噬菌体展示第23页
     ·生物分子相互作用分析质谱第23-24页
     ·以质谱为基础的蛋白质相互作用研究技术第24-25页
 3. 蛋白质组学在病原菌研究中的应用第25-29页
   ·细菌蛋白质组数据库第25-26页
   ·病原菌致病机理的研究第26-27页
   ·抗原性的研究第27-28页
   ·药物抗性的研究第28-29页
 4. 本研究的目的及内容第29-30页
第二章 柱状黄杆菌强毒株和弱毒株胞外蛋白的比较蛋白质组学研究第30-63页
 1. 前言第30-31页
 2. 材料与方法第31-35页
   ·菌株和培养条件第31-32页
     ·LD_(50)的测定第32页
   ·菌落形态观察第32页
   ·菌株G_(4R3)和G_(18)的生长曲线的测定第32-33页
   ·细菌胞外蛋白(ECPs)的制备第33页
   ·胞外蛋白的SDS-PAGE第33页
   ·双向电泳第33-34页
   ·胶内酶解第34页
   ·基质辅助的激光解吸离子化-飞行时间质谱(matrix assisted 1aser desorption /ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)及其串联质谱(MALDI-TOF MS析第34-35页
   ·液相层析-离子阱质谱(LC-MS)分析第35页
 3. 结果第35-59页
     ·G_(4R3)和G_(18)的毒力评价第35-36页
     ·菌落形态第36页
     ·G_(4R3)和G_(18)的ECPs的SDS-PAGE第36-39页
     ·G_(4R3)和G_(18)的ECPs的双向电泳第39-41页
     ·MALDI-TOF MS 和MALDI-TOF以及 ESI-MS 鉴定差异表达的蛋白第41-59页
 4. 讨论第59-63页
第三章 柱状黄杆菌的外膜蛋白的蛋白质组学研究第63-75页
 1. 前言第63-64页
 2. 材料和方法第64-65页
   ·菌株和培养条件第64页
   ·柱状黄杆菌外膜蛋白的提取第64页
   ·外膜蛋白的SDS-PAGE第64页
   ·胶内酶解第64-65页
   ·反相HPLC MS/MS Shotgun 分析第65页
   ·蛋白质鉴定和数据分析第65页
 3. 结果第65-73页
   ·外膜蛋白的SDS-PAGE第65-66页
   ·外膜蛋白的鸟枪法蛋白质组学分析第66-73页
 4. 讨论第73-75页
第四章草鱼鳃粘液的蛋白质组学研究第75-123页
 1. 前言第75-76页
 2. 材料和方法第76-82页
   ·草鱼来源与饲养第77页
   ·鳃粘液的收集与保存第77页
   ·凝胶过滤层析第77-78页
     ·凝胶过滤层析柱的制备第77-78页
     ·粘液样品的凝胶过滤层析(Gel Filtration Chromatography,GFC)第78页
     ·各组分的一维凝胶电泳第78页
   ·鳃粘液样品的双向电泳第78-80页
     ·样品裂解第79页
     ·双向电泳第79-80页
   ·图像的采集和双向电泳图谱的分析第80-81页
   ·质谱鉴定第81-82页
     ·胶内酶解第81页
     ·基质辅助的激光解吸离子化-飞行时间质谱(matrix assisted laser desorption mass spectrometry, MALDI-TOF MS) 及其串联质谱(MALDI-TOF/TOF MS)分析第81-82页
     ·液相层析-离子阱质谱(LC-MS)分析第82页
 3. 结果第82-118页
   ·凝胶过滤层析柱的检测第82-83页
   ·凝胶过滤层析对粘液样品分级第83页
   ·粘液样品的双向电泳第83-88页
   ·粘液样品的质谱鉴定第88-118页
 4. 讨论第118-123页
参考文献第123-138页
附录第138-139页
 攻读博士学位期间发表和待发表的论文第138-139页
致谢第139页

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