| 目录 | 第1-6页 |
| 缩写 | 第6-7页 |
| 中文摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-27页 |
| 第一节 含氮杂环农药—吡虫啉 | 第13-16页 |
| 一、吡虫啉的理化性质 | 第14页 |
| 二、吡虫啉的作用机制和特点 | 第14-15页 |
| 三、吡虫啉的抗性和安全性 | 第15-16页 |
| 第二节 吡虫啉代谢研究进展 | 第16-19页 |
| 一、吡虫啉的代谢途径 | 第16-17页 |
| 二、吡虫啉代谢的机理研究 | 第17页 |
| 三、细胞色素P450 | 第17-19页 |
| 第三节 生物转化技术 | 第19-27页 |
| 一、生物转化技术的发展 | 第20页 |
| 二、生物转化技术的应用 | 第20-23页 |
| 三、微生物转化技术 | 第23-27页 |
| 第二章 高效转化菌株的筛选和鉴定 | 第27-39页 |
| 1 材料和方法 | 第27-31页 |
| 1．1 材料 | 第27-28页 |
| 1．2 菌种筛选 | 第28页 |
| 1．3 转化 | 第28页 |
| 1．4 形态特征的观察 | 第28-29页 |
| 1．5 生理生化特征测定 | 第29页 |
| 1．6 16S rDNA的PCR扩增和系统进化树的构建 | 第29-30页 |
| 1．7 转化产物提取 | 第30页 |
| 1．8 转化产物结构鉴定 | 第30-31页 |
| 2 结果 | 第31-37页 |
| 2．1 转化IMI菌株的筛选 | 第31-32页 |
| 2．2 菌种的鉴定 | 第32-34页 |
| 2．2．1 形态与培养特征 | 第32页 |
| 2．2．2 生理生化特征 | 第32页 |
| 2．2．3 NJ2菌株的16s rDNA的分析 | 第32-34页 |
| 2．3 转化产物的结构鉴定 | 第34-37页 |
| 2．4 NJ2和现有转化菌株NJ的初步比较 | 第37页 |
| 3．讨论 | 第37-38页 |
| 本章小结 | 第38-39页 |
| 第三章 发酵和转化条件的研究 | 第39-64页 |
| 第一节 发酵条件的优化 | 第39-46页 |
| 1．材料和方法 | 第39-41页 |
| 1．1 菌种 | 第39页 |
| 1．2 培养基 | 第39-40页 |
| 1．3 试剂和仪器 | 第40页 |
| 1．4 培养和转化方法 | 第40页 |
| 1．5 生物量的测定 | 第40页 |
| 1．6 HPLC分析 | 第40-41页 |
| 1．7 5-hydroxy IMI和IMI标准工作曲线的制定 | 第41页 |
| 2．结果 | 第41-44页 |
| 2．1 标准工作曲线的制定 | 第41-42页 |
| 2．2 不同碳源对酶形成的影响 | 第42页 |
| 2．3 不同乙酸钠浓度对酶形成的影响 | 第42-43页 |
| 2．4 不同氮源对酶形成的影响 | 第43-44页 |
| 3．讨论 | 第44-46页 |
| 第二节 转化条件的优化 | 第46-57页 |
| 1．材料和方法 | 第46-48页 |
| 1．1 菌种 | 第46页 |
| 1．2 培养基 | 第46页 |
| 1．3 试剂和仪器 | 第46页 |
| 1．4 HPLC分析 | 第46页 |
| 1．5 培养和转化方法 | 第46-47页 |
| 1．6 不同促进剂对羟基化酶活性的影响 | 第47页 |
| 1．7 蔗糖对生长细胞和静息转化的影响 | 第47页 |
| 1．8 转化液中糖含量的测定 | 第47页 |
| 1．9 添加NADH对羟基化酶活性的影响 | 第47页 |
| 1．10 转化液中的氮源对IMI羟基化酶活性的影响 | 第47页 |
| 1．11 添加助溶剂对IMI羟基化酶活性的影响 | 第47-48页 |
| 1．12 超声波处理底物对IMI羟基化酶活性的影响 | 第48页 |
| 2．结果 | 第48-55页 |
| 2．1 不同促进剂对羟基化酶活性的影响 | 第48-49页 |
| 2．2 蔗糖对IMI转化的影响 | 第49-51页 |
| 2．3 添加NADH对羟基化酶活性的影响 | 第51页 |
| 2．4 氮源对IMI羟基化酶活性的影响 | 第51-52页 |
| 2．5 固体投料对羟基化酶活性的影响 | 第52页 |
| 2．6 添加助溶剂对羟基化酶活性的影响 | 第52-54页 |
| 2．7 超声处理底物羟基化酶活性的影响 | 第54-55页 |
| 3．讨论 | 第55-57页 |
| 第三节 综合优化和发酵罐小试实验 | 第57-63页 |
| 1．材料和方法 | 第57-59页 |
| 1．1 菌种 | 第57页 |
| 1．2 培养基 | 第57页 |
| 1．3 试剂和仪器 | 第57页 |
| 1．4 HPLC分析 | 第57-58页 |
| 1．5 培养和转化方法 | 第58页 |
| 1．6 均匀设计试验 | 第58页 |
| 1．7 NJ2菌株的IMI转化曲线 | 第58页 |
| 1．8 发酵罐培养和转化方法 | 第58-59页 |
| 2．结果 | 第59-63页 |
| 2．1 均匀设计实验 | 第59-60页 |
| 2．2 NJ2菌株的IMI转化曲线 | 第60-61页 |
| 2．3 发酵罐小试结果 | 第61-63页 |
| 3．讨论 | 第63页 |
| 本章小结 | 第63-64页 |
| 第四章 S.maltophilia的IMI羟基化酶的初步研究 | 第64-73页 |
| 1 材料和方法 | 第64-66页 |
| 1．1 材料 | 第64-65页 |
| 1．1．1 菌种 | 第64页 |
| 1．1．2 试剂和仪器 | 第64页 |
| 1．1．3 培养基和培养条件 | 第64-65页 |
| 1．2 静息细胞制备和转化 | 第65页 |
| 1．3 PBO对IMI羟基化酶的抑制 | 第65页 |
| 1．4 诱导剂对IMI羟基化酶的诱导作用 | 第65页 |
| 1．5 5-hydroxy IMI对IMI羟基化酶的抑制 | 第65页 |
| 1．6 IMI羟基化酶的定位 | 第65-66页 |
| 1．7 转化产物的HPLC分析 | 第66页 |
| 1．8 数据统计 | 第66页 |
| 2 结果和讨论 | 第66-71页 |
| 2．1 PBO对IMI羟基化酶的影响 | 第66-67页 |
| 2．2 诱导剂对IMI羟基化酶的诱导作用 | 第67-68页 |
| 2．3 产物5-hydroxy IMI对酶活性的影响 | 第68-69页 |
| 2．4 IMI羟基化酶定位 | 第69-71页 |
| 本章小结 | 第71-73页 |
| 总结 | 第73-75页 |
| 参考文献 | 第75-83页 |
| 致谢 | 第83-84页 |
| 附录 | 第84-85页 |
| 附录一：在读期间主要科研成果 | 第84-85页 |
| 附录二：NJ2 16s rDNA序列 | 第85页 |
