应用RNAi技术培育抗条纹叶枯病水稻新品系
| 中文摘要 | 第1-7页 |
| 英文摘要 | 第7-9页 |
| 缩略语中英文对照 | 第9-11页 |
| 1 前言 | 第11-21页 |
| ·水稻条纹叶枯病的发生历史和当前流行现状 | 第11-12页 |
| ·病害症状及寄主范围 | 第12-13页 |
| ·病害的外部症状 | 第12页 |
| ·病害的内部症状 | 第12页 |
| ·寄主范围 | 第12-13页 |
| ·病原病毒及其特性 | 第13页 |
| ·病毒基因组结构与编码策略 | 第13-14页 |
| ·病毒基因组的编码蛋白 | 第14-16页 |
| ·依赖RNA 的RNA 聚合酶 | 第14页 |
| ·CP 蛋白和SP 蛋白 | 第14-15页 |
| ·可能编码移动蛋白的基因片段 | 第15-16页 |
| ·RSV 编码的其它蛋白 | 第16页 |
| ·利用RNA干扰防治植物病毒策略 | 第16-20页 |
| ·RNA 干扰机制 | 第16-19页 |
| ·RNAi 技术在植物抗病毒基因工程中的应用 | 第19-20页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第20-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-31页 |
| ·供试材料 | 第21-23页 |
| ·水稻条纹叶枯病毒 | 第21页 |
| ·传毒介体灰飞虱 | 第21页 |
| ·转基因受体水稻品种 | 第21页 |
| ·4 供试生物工程菌株 | 第21页 |
| ·载体 | 第21页 |
| ·工具酶其他生化试剂 | 第21-22页 |
| ·供试培养基 | 第22-23页 |
| ·实验方法 | 第23-31页 |
| ·病叶总RNA 的提取 | 第23-24页 |
| ·转基因水稻植株DNA 的提取 | 第24页 |
| ·引物设计 | 第24页 |
| ·病毒基因序列的一步法RT-PCR 扩增 | 第24-25页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳及DNA 片段的回收 | 第25页 |
| ·碱裂解法小量提取质粒 | 第25页 |
| ·病毒基因的克隆测序 | 第25页 |
| ·大肠杆菌转化 | 第25-26页 |
| ·干扰载体pUCCRNAi 的构建 | 第26页 |
| ·表达载体的构建 | 第26-28页 |
| ·农杆菌转化 | 第28页 |
| ·水稻胚性愈伤组织的诱导 | 第28页 |
| ·愈伤组织的农杆菌侵染及共培养转化 | 第28-29页 |
| ·抗性愈伤组织的筛选 | 第29页 |
| ·抗性愈伤组织的分化 | 第29页 |
| ·转基因苗的扩繁和生根 | 第29页 |
| ·转基因水稻植株对条纹叶枯病的抗性鉴定 | 第29-30页 |
| ·转基因植株PCR 分析 | 第30-31页 |
| 3 结果与分析 | 第31-43页 |
| ·CP、SP 基因片段的RT-PCR 产物的鉴定 | 第31-32页 |
| ·RNAi 载体的组装与测序比对 | 第32-34页 |
| ·表达载体的组装 | 第34-35页 |
| ·转化质粒在农杆菌中的稳定性 | 第35页 |
| ·植物遗传转化与转基因植株的获得 | 第35页 |
| ·转化植株的PCR 分析 | 第35-37页 |
| ·转基因苗的抗病性鉴定分析 | 第37页 |
| ·接虫传毒后转基因水稻植株的RT-PCR分析 | 第37-41页 |
| ·转基因水稻植株的几个主要农艺性状调查 | 第41页 |
| ·转基因植株后代的遗传分析 | 第41-43页 |
| 4 讨论 | 第43-46页 |
| 参考文献 | 第46-58页 |
| 致谢 | 第58页 |
