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GLRaV-Ⅲ RT-PCR检测体系及樱桃砧木茎尖培养技术的研究

缩略词第1-9页
引言第9-16页
第一部分 葡萄卷叶病毒(GLRaV-Ⅲ)RT-PCR 检测体系的建立、优化及病毒特异片段克隆测序研究第16-29页
 1 材料与方法第16-20页
   ·试验材料第16-17页
     ·植物材料第16页
     ·RNA 提取试剂第16页
     ·RT-PCR 试剂及特异引物第16-17页
     ·菌种与质粒第17页
     ·酶及试剂第17页
   ·试验方法第17-20页
     ·总RNA 的提取第17页
     ·总RNA 含量、纯度及完整性的检测第17-18页
     ·RT第18页
     ·PCR 扩增第18页
     ·cDNA 片段的回收纯化第18页
     ·特异DNA 片段的克隆与测序第18-20页
       ·构建重组质粒第18-19页
       ·大肠杆菌感受态细胞的制备第19页
       ·重组质粒的转化与培养第19页
       ·重组质粒的回收与纯化第19-20页
       ·重组质粒的酶切鉴定以及cDNA 片段的序列测定第20页
 2 结果与分析第20-27页
   ·果树组织中总RNA 完整性及纯度检验第20-21页
     ·果树组织中总RNA 完整性检验第20页
     ·果树组织中总RNA 的提取纯度第20-21页
   ·GLRaV-Ⅲ的RT-PCR 检测体系的建立及优化第21-26页
     ·GLRaV-Ⅲ的RT-PCR 检测体系的建立第21-22页
     ·GLRaV-Ⅲ的RT-PCR 检测体系的优化第22-26页
   ·特异DNA 片段的克隆第26页
   ·GLRaV-Ⅲ部分CPgene cDNA 片段的序列分析第26-27页
 3 讨论第27-29页
   ·关于 RNA 的提取第27页
   ·影响 RT-PCR 扩增的因素及反应条件第27-29页
     ·PCR 循环参数的选定第28页
     ·PCR 反应体系第28-29页
 4 结论第29页
第二部分 樱桃砧木 Colt 小茎尖培养体系的建立第29-38页
 1 试验材料和方法第29-31页
   ·试验材料第29页
   ·试验方法第29-30页
     ·试材的预处理和接种第29-30页
     ·培养基及培养条件第30页
   ·无菌培养物建立阶段第30页
     ·基本培养基的筛选第30页
     ·植物生长调节剂的种类与浓度第30页
   ·试管苗增殖培养第30-31页
     ·不同种类激素的浓度组合第30页
     ·pH第30-31页
     ·蔗糖浓度第31页
   ·试管苗生根第31页
 2 结果与分析第31-35页
   ·无菌培养物的建立第31-33页
     ·不同培养基对茎尖萌发的影响第31-32页
     ·植物生长调节剂对茎尖萌发的影响第32-33页
   ·试管苗增殖第33-35页
     ·激素种类和浓度对增殖的影响第33-34页
     ·培养基pH 值对茎尖增殖的影响第34页
     ·糖浓度对增殖的影响第34-35页
   ·试管苗生根第35页
 3 讨论第35-37页
   ·基本培养基的影响第35-36页
   ·激素的影响第36页
   ·影响组培苗增殖和生长的其他因素第36-37页
 4 结论第37-38页
致谢第38-39页
参考文献第39-44页
附图第44-46页
作者简介第46页

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