| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-13页 |
| 第一章 黏膜佐剂疫苗和鼠疫疫苗的研究进展 | 第13-32页 |
| ·黏膜疫苗的概述 | 第13-14页 |
| ·黏膜佐剂的研究进展 | 第14-24页 |
| ·霍乱毒素B 亚单位（CTB）佐剂的研究进展 | 第14-15页 |
| ·蛋白体佐剂的研究进展 | 第15-21页 |
| ·Protollin 佐剂的研究进展 | 第21-23页 |
| ·脑膜炎双球菌外膜蛋白孔道蛋白的研究进展 | 第23-24页 |
| ·鼠疫疫苗的研究进展 | 第24-27页 |
| ·当今鼠疫流行态势 | 第25页 |
| ·传统鼠疫疫苗 | 第25页 |
| ·重组亚单位疫苗 | 第25-26页 |
| ·重组DNA 疫苗的研究 | 第26-27页 |
| ·结语 | 第27页 |
| ·黏膜免疫途径的研究进展 | 第27-30页 |
| ·黏膜免疫 | 第27-28页 |
| ·黏膜淋巴细胞的作用 | 第28-29页 |
| ·鼻黏膜免疫研究进展 | 第29-30页 |
| ·展望 | 第30-32页 |
| 第二章 蛋白体佐剂的制备和用于鼠疫黏膜疫苗的研究 | 第32-48页 |
| ·材料 | 第32-34页 |
| ·主要试剂 | 第32-33页 |
| ·菌种 | 第33页 |
| ·培养基和溶液 | 第33页 |
| ·主要仪器 | 第33-34页 |
| ·方法 | 第34-38页 |
| ·蛋白体制备条件的优化 | 第34-35页 |
| ·蛋白体某些物质的检测 | 第35页 |
| ·异常毒性试验 | 第35页 |
| ·蛋白体组分鉴定 | 第35页 |
| ·蛋白体的稳定性检测 | 第35页 |
| ·蛋白体多抗的制备 | 第35-36页 |
| ·动物试验蛋白体免疫佐剂的研究 | 第36-37页 |
| ·免疫保护力试验 | 第37-38页 |
| ·结果 | 第38-45页 |
| ·脑膜炎双球菌培养基的优化结果 | 第38页 |
| ·脑膜炎双球菌培养时间、速度和灭活条件的优化结果 | 第38-39页 |
| ·蛋白体提取过程的优化结果 | 第39-40页 |
| ·蛋白体的制备和纯化鉴定结果 | 第40页 |
| ·蛋白体组分鉴定结果 | 第40页 |
| ·蛋白体的稳定性检测结果 | 第40-41页 |
| ·蛋白体中某些物质的检测结果 | 第41-42页 |
| ·蛋白体多抗效价结果分析 | 第42页 |
| ·小鼠血清总IgG 水平的检测结果 | 第42页 |
| ·抗体亚型分类 | 第42-43页 |
| ·小鼠呼吸道及消化道特异性sIgA 的测定 | 第43-44页 |
| ·小鼠生殖道特异性sIgA 的测定 | 第44-45页 |
| ·淋巴细胞亚群分析 | 第45页 |
| ·免疫保护力试验结果 | 第45页 |
| ·讨论 | 第45-47页 |
| ·小结 | 第47-48页 |
| 第三章 Protollin 佐剂的制备及免疫佐剂的研究 | 第48-59页 |
| ·材料 | 第48页 |
| ·主要试剂 | 第48页 |
| ·菌种 | 第48页 |
| ·溶液 | 第48页 |
| ·方法 | 第48-51页 |
| ·LPS 的提取方法 | 第48-49页 |
| ·LPS 的脱毒 | 第49页 |
| ·LPS 的脱毒检测 | 第49页 |
| ·LPS 某些物质的检测 | 第49-50页 |
| ·异常毒性试验 | 第50页 |
| ·Protollin 佐剂的制备 | 第50页 |
| ·Protollin 佐剂疫苗的制备及免疫方案 | 第50页 |
| ·免疫评价 | 第50页 |
| ·T 淋巴细胞增殖试验（MTT） | 第50-51页 |
| ·结果 | 第51-56页 |
| ·蛋白质含量的测定结果 | 第51页 |
| ·糖含量的测定结果 | 第51-52页 |
| ·核酸含量测定结果 | 第52页 |
| ·异常毒性试验结果 | 第52页 |
| ·LPS 的脱毒检测结果 | 第52页 |
| ·免疫双扩试验结果 | 第52-56页 |
| ·讨论 | 第56-57页 |
| ·小结 | 第57-59页 |
| 第四章 蛋白体三分子的原核表达和纯化及免疫佐剂的研究 | 第59-84页 |
| ·材料 | 第59-62页 |
| ·菌株和质粒 | 第59页 |
| ·主要试剂及试剂盒 | 第59-60页 |
| ·实验动物 | 第60页 |
| ·主要仪器 | 第60页 |
| ·常用溶液的配制 | 第60-62页 |
| ·方法 | 第62-71页 |
| ·引物的设计与合成 | 第62-63页 |
| ·目的基因的PCR 扩增 | 第63页 |
| ·采用玻璃奶回收试剂盒回收扩增的DNA 片段 | 第63页 |
| ·PCR 产物与T 载体连接 | 第63-64页 |
| ·新鲜感受态细胞的制备(CaCl_2 法) | 第64页 |
| ·连接产物的转化 | 第64页 |
| ·重组质粒的小量提取 | 第64-65页 |
| ·重组质粒鉴定 | 第65页 |
| ·重组原核表达质粒的构建 | 第65-68页 |
| ·重组蛋白的表达及纯化 | 第68-69页 |
| ·SDS-PAGE 电泳鉴定外源蛋白的表达 | 第69页 |
| ·Western blotting 鉴定目的蛋白 | 第69-70页 |
| ·蛋白体-鼠疫F1-V 重组蛋白疫苗的制备 | 第70页 |
| ·实验动物和免疫方案 | 第70页 |
| ·ELISA 测血清效价 | 第70页 |
| ·抗体亚型分类 | 第70页 |
| ·ELISA 检测血清IgA 和呼吸道、消化道、生殖道特异性sIgA | 第70-71页 |
| ·T 淋巴细胞亚群分类 | 第71页 |
| ·T 淋巴细胞增殖试验（MTT） | 第71页 |
| ·免疫保护力试验 | 第71页 |
| ·结果 | 第71-81页 |
| ·PCR 产物的电泳结果 | 第71页 |
| ·重组质粒的PCR 鉴定结果 | 第71-72页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定结果 | 第72-73页 |
| ·测序结果分析 | 第73-76页 |
| ·pET28a(+)-PorA、pET28a(+)-PorB、pET28a(+)-Class 4 重组质粒在大肠杆菌中表达、纯化 | 第76-78页 |
| ·Western blotting 鉴定表达的重组蛋白 | 第78页 |
| ·小鼠血清总IgG 水平的检测结果 | 第78-79页 |
| ·抗体亚型分类结果 | 第79-80页 |
| ·小鼠血清IgA 和呼吸道、消化道、生殖道特异性sIgA 的测定结果 | 第80页 |
| ·淋巴细胞亚群分析结果 | 第80-81页 |
| ·MTT 结果 | 第81页 |
| ·讨论 | 第81-83页 |
| ·小结 | 第83-84页 |
| 第五章 CTB 佐剂的原核表达纯化和免疫佐剂的研究 | 第84-98页 |
| ·材料 | 第84页 |
| ·主要试剂 | 第84页 |
| ·菌种和质粒 | 第84页 |
| ·方法 | 第84-88页 |
| ·引物的设计与合成 | 第84-85页 |
| ·目的基因的PCR 扩增 | 第85页 |
| ·采用玻璃奶回收试剂盒回收扩增的DNA 片段 | 第85页 |
| ·PCR 产物与T 载体连接 | 第85-86页 |
| ·新鲜感受态细胞的制备(CaCl_2 法) | 第86页 |
| ·连接产物的转化 | 第86页 |
| ·重组质粒的小量提取 | 第86页 |
| ·重组质粒鉴定 | 第86页 |
| ·重组原核表达质粒的构建 | 第86页 |
| ·重组蛋白的表达及纯化 | 第86-88页 |
| ·SDS-PAGE 电泳鉴定外源蛋白的表达 | 第88页 |
| ·Western blotting 鉴定目的蛋白所表达的重组蛋白 | 第88页 |
| ·实验动物和免疫方案 | 第88页 |
| ·ELISA 测血清效价 | 第88页 |
| ·抗体亚型分类 | 第88页 |
| ·ELISA 检测血清IgA 和呼吸道、消化道、生殖道特异性sIgA | 第88页 |
| ·T 淋巴细胞亚群分类 | 第88页 |
| ·结果 | 第88-95页 |
| ·PCR 产物的电泳结果 | 第88-89页 |
| ·重组质粒的PCR 鉴定结果 | 第89页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定结果 | 第89-90页 |
| ·测序结果 | 第90-91页 |
| ·pET32a(+)-CTB 重组质粒在大肠杆菌中表达、纯化 | 第91页 |
| ·Western Blotting 鉴定表达的重组蛋白结果 | 第91-92页 |
| ·小鼠血清总IgG 和IgA 水平的测定 | 第92-93页 |
| ·抗体亚型分类 | 第93-94页 |
| ·小鼠呼吸道、消化道、生殖道特异性sIgA 的测定结果 | 第94-95页 |
| ·T 淋巴细胞亚群分析 | 第95页 |
| ·讨论 | 第95-97页 |
| ·小结 | 第97-98页 |
| 第六章 不同鼠疫佐剂疫苗滴鼻免疫小鼠诱导黏膜与系统免疫反应 | 第98-106页 |
| ·材料 | 第98页 |
| ·主要试剂 | 第98页 |
| ·实验动物和主要仪器 | 第98页 |
| ·方法 | 第98-99页 |
| ·实验动物和免疫方案 | 第98-99页 |
| ·黏膜冲洗液的收集和淋巴细胞的分离 | 第99页 |
| ·ELISA 测血清效价 | 第99页 |
| ·抗体亚型分类 | 第99页 |
| ·ELISA 检测血清IgA 和呼吸道、消化道、生殖道特异性sIgA | 第99页 |
| ·T 淋巴细胞亚群分类 | 第99页 |
| ·T 淋巴细胞增殖试验（MTT） | 第99页 |
| ·免疫保护力试验 | 第99页 |
| ·结果 | 第99-103页 |
| ·小鼠血清总IgG 水平的检测结果 | 第99-100页 |
| ·抗体亚型分类结果 | 第100页 |
| ·小鼠血清IgA 和呼吸道、消化道、生殖道特异性sIgA 的测定结果 | 第100-101页 |
| ·淋巴细胞亚群分析结果 | 第101-102页 |
| ·MTT 结果 | 第102-103页 |
| ·免疫保护力试验结果 | 第103页 |
| ·讨论 | 第103-104页 |
| ·小结 | 第104-106页 |
| 结论 | 第106-107页 |
| 参考文献 | 第107-115页 |
| 附录 | 第115-123页 |
| 缩略语英文对照表 | 第123-125页 |
| 致谢 | 第125-126页 |
| 作者简介 | 第126页 |
