目录 | 第1-10页 |
缩写词及专用名词 | 第10-11页 |
摘要 | 第11-13页 |
Abstract | 第13-15页 |
第一篇 综述 | 第15-43页 |
1 杂种优势利用及研究进展 | 第15-21页 |
·杂种优势利用 | 第15-16页 |
·小麦杂种优势利用国内外研究概况 | 第16-17页 |
·小麦的几种不同的杂种优势利用系统 | 第17-20页 |
·小麦杂种优势研究进展 | 第20-21页 |
2.植物细胞质雄性不育机理及研究进展 | 第21-26页 |
·细胞质雄性不育与线粒体有关 | 第21-22页 |
·CMS与能量代谢 | 第22-23页 |
·细胞质雄性不育与叶绿体 | 第23页 |
·细胞质雄性不育的分子机理研究 | 第23-26页 |
3 细胞质雄性不育育性恢复机制的研究及进展 | 第26-30页 |
·恢复基因的研究进展 | 第27-28页 |
·小麦T型细胞质雄性不育恢复基因定位的研究进展 | 第28-30页 |
·植物细胞质雄性不育育性恢复的分子机制研究 | 第30页 |
4 分子生物学育种的研究进展及其应用 | 第30-36页 |
·分子标记辅助育种 | 第31-32页 |
·分子育种的应用 | 第32-33页 |
·基因工程在杂种优势利用中的应用 | 第33-36页 |
5 基因克隆的几种技术 | 第36-43页 |
·减法杂交和差异筛选 | 第37页 |
·抑制性减法杂交 | 第37-39页 |
·扣除杂交 | 第39-40页 |
·cDNA差式分析法(representative difference analysis,RDA) | 第40-41页 |
·cDNA捕捉法 | 第41页 |
·mRNA差异显示反转录PCR技术 | 第41-43页 |
·前言 | 第43-45页 |
第二篇 实验部分 | 第45-75页 |
第一章 普通小麦T型细胞质雄性不育恢复基因的遗传分析 | 第45-59页 |
1 材料 | 第45页 |
2 方法 | 第45-49页 |
·育性统计 | 第45-46页 |
·近等基因系的培育 | 第46-49页 |
3 实验结果与分析 | 第49-56页 |
·F_1恢复情况 | 第49页 |
·F_2的育性分离情况 | 第49-51页 |
·F_3家系分析结果 | 第51-53页 |
·近等基因系的培育 | 第53-56页 |
4 讨论 | 第56-59页 |
·育性指标和育性的划分 | 第56-57页 |
·恢复基因的遗传分析 | 第57-58页 |
·连续多代考察育性的意义 | 第58-59页 |
第二章 小麦细胞质雄性不育育性恢复相关基因的克隆及分析 | 第59-75页 |
1.材料 | 第59页 |
·扣除杂交实验植物材料 | 第59页 |
·半定量RT—PCR实验植物材料 | 第59页 |
·菌株和质粒 | 第59页 |
2.仪器和药品 | 第59页 |
3.实验流程 | 第59-60页 |
4.方法: | 第60-75页 |
·BSA法建池 | 第60-61页 |
·RNA的提纯 | 第61-62页 |
·cDNA合成 | 第62-65页 |
·扣除杂交 | 第65页 |
·扣除产物的分离和分离产物的LD-PCR | 第65-66页 |
·重复扣除杂交 | 第66页 |
·扣除杂交终产物的纯化 | 第66-67页 |
·扣除文库的构建 | 第67-68页 |
·REVERSE NORTHERN杂交 | 第68-70页 |
·阳性克隆的测序和同源性比对及PCR鉴定 | 第70-72页 |
·半定量RT—PCR | 第72-73页 |
·利用反义抑制研究TaUBC2基因在雄性不育方面的功能 | 第73-75页 |
结果与分析 | 第75-96页 |
1 小麦花药RNA的提取与纯化 | 第75页 |
2 cDNA合成及纯化 | 第75-78页 |
·LD-PCR扩增 | 第75-77页 |
·纯化效率分析 | 第77-78页 |
3.扣除文库的构建 | 第78-79页 |
·快提质粒初步鉴定白斑 | 第78-79页 |
4 REVERSE NORTHERN杂交 | 第79-80页 |
5 阳性克隆的测序和BLAST比较 | 第80-90页 |
·B4的基因序列和BLAST比对结果 | 第80-83页 |
·92号克隆的测序和比对结果 | 第83-85页 |
·314号克隆的测序和BLAST结果 | 第85-88页 |
·398号克隆的测序和BLAST比对结果 | 第88-89页 |
·A34克隆的测序和BLAST比对结果 | 第89-90页 |
6 阳性克隆的PCR鉴定 | 第90-91页 |
7.半定量RT—PCR研究全长cDNA的表达 | 第91-94页 |
·RNA提取结果 | 第91页 |
·TaUBC2基因的表达分析 | 第91-92页 |
·TaRF1基因的表达分析 | 第92-94页 |
8.反义技术研究TaUBC2基因的功能 | 第94-96页 |
·反义表达载体的构建 | 第94-95页 |
·TaUBC2基因的反义表达载体TaU转化可育小麦 | 第95-96页 |
讨论 | 第96-101页 |
1.CMS育性恢复的基因控制 | 第96页 |
2 UBC基因与育性的关系 | 第96-97页 |
3 ATPase与细胞质雄性不育 | 第97-99页 |
4 BSA法构建RNA池 | 第99页 |
5 花粉作为实验材料的意义 | 第99-101页 |
结论 | 第101-102页 |
参考文献 | 第102-112页 |
附录:化学试剂及配方 | 第112-115页 |
致谢 | 第115-116页 |
个人简历 | 第116页 |