| 缩略词表 | 第1-9页 |
| 摘要 | 第9-11页 |
| ABSTRACT | 第11-14页 |
| 第一章 综述 | 第14-42页 |
| 1．1 课题的提出 | 第14-15页 |
| 1．2 前人研究进展 | 第15-40页 |
| 1．2．1 马铃薯加工品质育种目标和现状 | 第15-19页 |
| 1．2．2 马铃薯块茎炸片质量的影响因素 | 第19-23页 |
| 1．2．3 马铃薯贮藏块茎“低温糖化”的生理生化机理 | 第23-28页 |
| 1．2．4 马铃薯块茎低温贮藏相关基因表达的研究 | 第28-29页 |
| 1．2．5 马铃薯抗“低温糖化”的策略 | 第29-36页 |
| 1．2．6 转化酶抑制子的研究进展 | 第36-40页 |
| 1．3 本研究的目的和意义 | 第40-42页 |
| 第二章 材料与方法 | 第42-53页 |
| 2．1 RNA与 DNA的提取 | 第42-45页 |
| 2．1．1 烟草叶片 RNA的提取(用于反转录和 Northern分析) | 第42页 |
| 2．1．2 马铃薯块茎总 RNA的提取(用于反转录和 Northern分析) | 第42-43页 |
| 2．1．3 马铃薯叶片 DNA小量抽提(用于转基因植株 PCR检测) | 第43-44页 |
| 2．1．4 马铃薯植株 DNA的抽提与纯化(用于 Southern杂交) | 第44-45页 |
| 2．2 转化酶抑制子全长cDNA的克隆 | 第45-46页 |
| 2．2．1 cDNA第一链的合成 | 第45页 |
| 2．2．2 转化酶抑制子全长cDNA克隆 | 第45-46页 |
| 2．3 质粒的抽提及其向农杆菌的转化 | 第46-48页 |
| 2．3．1 质粒 DNA小量制备 | 第46页 |
| 2．3．2 质粒 DNA大量制备 | 第46-47页 |
| 2．3．3 大肠杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第47页 |
| 2．3．4 农杆菌感受态的制备及转化 | 第47-48页 |
| 2．3．5 农杆菌介导的基因转化 | 第48页 |
| 2．4 转基因植株的Northern杂交 | 第48-50页 |
| 2．5 转基因植株的 Southern杂交 | 第50-53页 |
| 第三章 马铃薯贮藏块茎碳水化合物代谢路径及其主要调节因子分析 | 第53-62页 |
| 3．1 前言 | 第53页 |
| 3．2 材料与方法 | 第53-56页 |
| 3．2．1 供试材料与预处理 | 第53-54页 |
| 3．2．2 块茎炸片的加工及色泽确定 | 第54页 |
| 3．2．3 块茎还原糖和可溶性总糖分析 | 第54页 |
| 3．2．4 酶的提取和活性测定 | 第54-56页 |
| 3．3 结果与分析 | 第56-60页 |
| 3．3．1 贮藏温度对块茎还原糖、总糖含量及炸片色泽的影响 | 第56-57页 |
| 3．3．2 淀粉代谢酶活性变化及其对贮藏块茎还原糖含量的影响 | 第57-59页 |
| 3．3．3 蔗糖代谢酶活性变化及其对贮藏块茎还原糖含量的影响 | 第59-60页 |
| 3．4 讨论 | 第60-62页 |
| 第四章 烟草液泡转化酶抑制子的克隆及其在马铃薯中的表达 | 第62-75页 |
| 4．1 前言 | 第62-63页 |
| 4．2 材料和方法 | 第63-65页 |
| 4．2．1 植物材料 | 第63页 |
| 4．2．2 菌株、酶和试剂 | 第63页 |
| 4．2．3 烟草液泡转化酶抑制子的克隆和表达载体的构建 | 第63-64页 |
| 4．2．4 马铃薯的遗传转化 | 第64页 |
| 4．2．5 再生植株的分子鉴定 | 第64-65页 |
| 4．2．6 马铃薯转基因株系转化酶活性和还原糖含量分析 | 第65页 |
| 4．3 结果与分析 | 第65-73页 |
| 4．3．1 烟草Nt-inhh基因的克隆、表达载体的构建及序列分析 | 第65-68页 |
| 4．3．2 外源基因的遗传转化与转基因植株的 PCR鉴定 | 第68-70页 |
| 4．3．3 转基因植株的 Southern杂交分析 | 第70-71页 |
| 4．3．4 转基因植株 Northern杂交分析 | 第71页 |
| 4．3．5 转基因马铃薯块茎贮藏后还原糖和酶活性的变化 | 第71-73页 |
| 4．4 讨论 | 第73-75页 |
| 第五章 马铃薯转化酶抑制子St-inh cDNA克隆及在大肠杆菌中的表达和功能测定 | 第75-86页 |
| 5．1 前言 | 第75-76页 |
| 5．2 材料和方法 | 第76-78页 |
| 5．2．1 材料 | 第76页 |
| 5．2．2 方法 | 第76-78页 |
| 5．3 结果与分析 | 第78-84页 |
| 5．3．1 St-inh cDNA克隆 | 第78-79页 |
| 5．3．2 基因序列分析 | 第79-82页 |
| 5．3．3 St-inh在大肠杆菌中的表达 | 第82-83页 |
| 5．3．4 St-INH蛋白对转化酶的抑制作用 | 第83-84页 |
| 5．4 讨论 | 第84-86页 |
| 第六章 马铃薯转化酶抑制子的功能分析 | 第86-98页 |
| 6．1 前言 | 第86-87页 |
| 6．2 材料与方法 | 第87-89页 |
| 6．2．1 植物材料 | 第87页 |
| 6．2．2 菌株和质粒 | 第87页 |
| 6．2．3 低温诱导启动子 LTP克隆 | 第87页 |
| 6．2．4 载体构建 | 第87-88页 |
| 6．2．5 转基因株系的获得 | 第88页 |
| 6．2．6 转基因株系的分子鉴定以及还原糖含量、酶活性检测 | 第88-89页 |
| 6．3 结果与分析 | 第89-97页 |
| 6．3．1 低温诱导启动子 LTP的克隆 | 第89-90页 |
| 6．3．2 表达载体的构建 | 第90-91页 |
| 6．3．3 转基因马铃薯抗性植株的获得和 PCR检测 | 第91-92页 |
| 6．3．4 转基因植株的 Southern杂交 | 第92-93页 |
| 6．3．5 转基因植株 Northern杂交分析及试管苗叶片转化酶活性测定 | 第93-95页 |
| 6．3．6 贮藏转基因马铃薯块茎还原糖含量和转化酶活性变化 | 第95-97页 |
| 6．4 讨论 | 第97-98页 |
| 第七章 讨论 | 第98-104页 |
| 7．1 马铃薯块茎低温贮藏期间还原糖积累的主要调节酶类 | 第98-99页 |
| 7．2 转化酶抑制子与其对转化酶的抑制作用 | 第99-101页 |
| 7．3 马铃薯“低温糖化”机理研究与抗性改良 | 第101-104页 |
| 参考文献 | 第104-124页 |
| 附录A: Nt-inhh基因 GenBank登记信息 | 第124-125页 |
| 附录B: St-inh基因 GenBank登记信息 | 第125-126页 |
| 附录C: 低温诱导的启动子 LTP GenBank登记信息 | 第126-127页 |
| 附录D: pET-28a(+)载体图谱 | 第127-128页 |
| 附录E: 发表和已经准备的论文 | 第128-129页 |
| 致谢 | 第129页 |
