1 引言 | 第1-19页 |
·猪瘟概述 | 第6页 |
·猪瘟的病原 | 第6-14页 |
·猪瘟病毒的培养特性 | 第7-8页 |
·猪瘟病毒的抗原性 | 第8-10页 |
·猪瘟病毒致病机制及病理学特征 | 第10页 |
·猪瘟病毒在宿主细胞中的繁殖过程 | 第10-11页 |
·猪瘟病毒的基因组结构 | 第11-12页 |
·猪瘟病毒蛋白结构及功能 | 第12-14页 |
·猪瘟的诊断 | 第14-16页 |
·猪瘟病毒疫苗研究 | 第16-17页 |
·本研究的目的与意义 | 第17-19页 |
2 实验研究内蒙古猪瘟野毒(NMHL)株与C株细胞毒E2基因的克隆 | 第19-30页 |
·材料与方法 | 第19-22页 |
·实验动物、病料与毒株 | 第19页 |
·主要仪器 | 第19页 |
·试剂及配制 | 第19-20页 |
·受体菌与质粒载体 | 第20-21页 |
·引物的设计 | 第21-22页 |
·实验流程 | 第22-23页 |
·实验方法 | 第23-30页 |
·猪瘟阳性病料的获取 | 第23页 |
·猪瘟兔化弱毒(细胞毒)的浓缩提纯 | 第23-24页 |
·提取RNA 前的准备 | 第24页 |
·猪瘟病毒内蒙野毒株与标准弱毒疫苗株病毒RNA 的提取 | 第24页 |
·提取病毒RNA的定量 | 第24页 |
·RNA完整性的鉴定 | 第24-25页 |
·反转录(RT) | 第25页 |
·PCR及nPCR反应 | 第25-27页 |
·E2基因的克隆 | 第27-28页 |
·克隆产物的鉴定 | 第28-30页 |
·重组质粒序列测定及分析 | 第30页 |
3 实验结果 | 第30-42页 |
·病猪的临床表现、病理剖检变化及病料实验室诊断结果 | 第30-31页 |
·提取RNA的定量结果 | 第31页 |
·取RNA完整性的鉴定 | 第31-32页 |
·RT-PCR产物的电泳结果 | 第32-33页 |
·重组质粒提取结果 | 第33页 |
·重组质粒的酶切鉴定 | 第33-34页 |
·重组质粒的PCR鉴定 | 第34页 |
·核苷酸序列测定 | 第34-41页 |
·同源性分析 | 第41-42页 |
·遗传进化树 | 第42页 |
4 分析和讨论 | 第42-49页 |
·病毒RNA的提取 | 第42页 |
·关于如何防止RNA降解 | 第42-44页 |
·关于Trizol法提取总RNA | 第44-45页 |
·关于Nested-PCR | 第45页 |
·关于RT-PCR模板和引物的使用量问题 | 第45-46页 |
·连接和转化 | 第46页 |
·重组质粒的初步鉴定a-互补 | 第46-47页 |
·序列分析 | 第47-49页 |
5 结论 | 第49-50页 |
致谢 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-56页 |
作者简介 | 第56页 |