摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-13页 |
第一章 引言 | 第13-19页 |
·猪细小病毒研究进展 | 第13-16页 |
·病原学 | 第13-14页 |
·基因组结构 | 第14页 |
·基因组的复制与转录 | 第14-15页 |
·基因组的编码蛋白与功能 | 第15-16页 |
·干扰素抗病毒机制研究进展 | 第16-17页 |
·干扰素简介 | 第16页 |
·干扰素的产生途径 | 第16-17页 |
·干扰素的信号传导通路 | 第17页 |
·病毒拮抗宿主 I 型干扰素的研究进展 | 第17-18页 |
·研究目的与意义 | 第18-19页 |
第二章 猪 I 型干扰素及信号传导因子 TaqMan 荧光定量 PCR 检测方法的建立 | 第19-28页 |
·材料与方法 | 第19页 |
·细胞 | 第19页 |
·主要试剂 | 第19页 |
·主要仪器 | 第19页 |
·方法 | 第19-22页 |
·猪 I 型干扰素及信号传导因子基因引物的设计 | 第19页 |
·猪源细胞总 RNA 的提取与反转录 | 第19-20页 |
·猪 I 型干扰素及信号传导因子基因的重组质粒的构建 | 第20-21页 |
·荧光定量 PCR 标准曲线的建立及特异性鉴定 | 第21页 |
·敏感性试验 | 第21页 |
·重复性试验 | 第21页 |
·统计分析 | 第21-22页 |
·结果 | 第22-26页 |
·猪 I 型干扰素及信号传导因子重组质粒的制备及引物特异性鉴定 | 第22-23页 |
·猪 I 型干扰素及信号传导因子荧光定量 PCR 标准曲线的建立 | 第23-26页 |
·敏感性分析 | 第26页 |
·重复性分析 | 第26页 |
·讨论 | 第26-28页 |
第三章 PPV 感染引起 I 型干扰素及信号传导因子 mRNA 转录水平的变化 | 第28-34页 |
·材料 | 第28页 |
·病毒与细胞 | 第28页 |
·主要试剂 | 第28页 |
·主要仪器 | 第28页 |
·方法 | 第28-29页 |
·PPV 增殖实验 | 第28页 |
·总 RNA 的提取及反转录 | 第28页 |
·病毒 DNA 的提取 | 第28-29页 |
·PPV 增殖曲线的建立 | 第29页 |
·荧光定量 PCR 方法检测 PPV 感染后细胞因子的转录时相 | 第29页 |
·统计分析 | 第29页 |
·结果 | 第29-32页 |
·PPV 的增殖曲线 | 第29-30页 |
·PPV 感染后 IFN- 和 IFN-β的转录时相 | 第30页 |
·PPV 感染后 RIG-1 和 TLR-9 的转录时相 | 第30-31页 |
·PPV 感染后 IRF-3 和 IRF-7 的转录时相 | 第31页 |
·PPV 感染后 JAK-1 和 JAK-2 的转录时相 | 第31-32页 |
·PPV 感染后 STAT-1 和 STAT-2 的转录时相 | 第32页 |
·讨论 | 第32-34页 |
第四章 PPV 对宿主抗病毒免疫拮抗作用的研究 | 第34-39页 |
·材料 | 第34页 |
·病毒、质粒与细胞 | 第34页 |
·主要试剂 | 第34页 |
·主要仪器 | 第34页 |
·方法 | 第34-35页 |
·重组质粒的大量提取 | 第34页 |
·荧光素酶双报告基因检测方法 | 第34-35页 |
·荧光素酶活性检测 | 第35页 |
·结果 | 第35-37页 |
·荧光素酶活性检测 PPV 感染后 IFN-β的表达 | 第35-36页 |
·荧光素酶活性检测 PPV 感染对 Poly(I:C)介导的 IFN-β表达的影响 | 第36页 |
·PPV 编码蛋白与 IFN-β的相互作用 | 第36-37页 |
·讨论 | 第37-39页 |
第五章 结论 | 第39-40页 |
参考文献 | 第40-44页 |
致谢 | 第44-45页 |
作者简介 | 第45页 |