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栉孔扇贝和海湾扇贝G型溶菌酶基因及栉孔扇贝硒结合蛋白基因的克隆和表达研究

中文摘要第1-5页
ABSTRACT第5-11页
第一章 前言第11-27页
 第一节 我国贝类养殖现状和面临的问题第11-13页
 第二节 贝类的非特异性免疫防御体系第13-18页
  1.2.1 贝类的细胞免疫与免疫机制第14-16页
  1.2.2 贝类的体液免疫与免疫机制第16-18页
 第三节 贝类免疫系统中的氧化还原代谢平衡第18-19页
  1.3.1 贝类的抗氧化体系第18-19页
  1.3.2 硒:抗氧化和免疫体系中重要的一分子第19页
 第四节 基因克隆和表达研究的主要方法第19-24页
  1.4.1 表达序列标签第20页
  1.4.2 差异显示反转录第20-21页
  1.4.3 随机引物法克隆未知序列基因第21页
  1.4.4 代表性差异分析第21-22页
  1.4.5 用特异抗体克隆基因第22页
  1.4.6 基因表达系列分析第22页
  1.4.7 基因芯片第22-23页
  1.4.8 mRNA表达的定量检测技术第23-24页
 第五节 扇贝基因组及功能基因的研究现状第24-25页
 第六节 本论文研究目的第25-27页
第二章 材料与方法第27-37页
 第一节 样本的采集与处理第27-29页
  2.1.1 健康扇贝在实验室环境中的暂养第27页
  2.1.2 氧应激实验第27页
  2.1.3 微生物应激实验第27-29页
 第二节 RNA的提取第29-30页
  2.2.1 主要化学试剂与仪器第29页
  2.2.2 扇贝血淋巴RNA的提取第29-30页
 第三节 cDNA第一链的合成第30-31页
  2.3.1 主要化学试剂与仪器第30页
  2.3.2 合成扇贝cDNA一链的步骤第30-31页
 第四节 获得全长cDNA序列第31-33页
  2.4.1 zSeBP的克隆第31-32页
  2.4.2 栉孔扇贝g型溶菌酶基因cDNA的克隆第32页
  2.4.3 海湾扇贝g型溶菌酶基因cDNA的克隆第32-33页
 第五节 感受态细胞的制备及转化第33-34页
  2.5.1 感受态细胞的制备第33页
  2.5.2 转化第33-34页
 第六节 目的基因的生物信息学分析第34页
 第七节 基因在体内表达的研究第34页
 第八节 丙二醛(MDA)的测定第34-35页
 第九节 栉孔扇贝硒结合蛋白免疫相关性研究实验设计思路第35-37页
  2.9.1 硒结合蛋白是否和栉孔扇贝的免疫机制相关?第35页
  2.9.2 什么机制使硒结合蛋白参与栉孔扇贝的免疫应答?第35-37页
第三章 结果与讨论第37-57页
 第一节 栉孔扇贝硒结合蛋白基因(zSeBP)的克隆与免疫相关性研究第37-47页
  3.1.1 zSeBP的克隆与序列分析第37-39页
  3.1.2 zSeBP cDNA序列与其它物种硒结合蛋白序列的比对第39-40页
  3.1.3 栉孔扇贝不同徽生物应激后的MDA分析第40-41页
  3.1.4 栉孔扇贝不同微生物和氧应激后血淋巴中硒结合蛋白mRNA的表达与分析第41-43页
  3.1.5 讨论第43-47页
 第二节 栉孔扇贝和海湾扇贝g型溶菌酶基因cDNA的克隆与分析第47-57页
  3.2.1 栉孔扇贝g型溶菌酶基因cDNA的克隆第47页
  3.2.2 栉孔扇贝g型溶菌酶基因cDNA的序列分析第47-50页
  3.2.3 海湾扇贝g型溶菌酶基因cDNA的克隆第50页
  3.2.4 海湾扇贝g型溶菌酶基因cDNA的序列分析第50-52页
  3.2.5 栉孔扇贝和海湾扇贝g型溶菌酶基因的分子进化研究第52-54页
  3.2.6 讨论第54-57页
第四章 结论第57-59页
 第一节 栉孔扇贝硒结合蛋白基因(zSeBP)的克隆与免疫相关性研究第57-58页
 第二节 海湾扇贝和栉孔扇贝g型溶菌酶基因的克隆与分析第58-59页
参考文献第59-65页
已发表和已接收文章第65页
已在GenBank数据库中注册的序列第65页
已申请的国家发明专利第65-66页
附录第66-67页

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