中文摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-11页 |
第一章 前言 | 第11-27页 |
第一节 我国贝类养殖现状和面临的问题 | 第11-13页 |
第二节 贝类的非特异性免疫防御体系 | 第13-18页 |
1.2.1 贝类的细胞免疫与免疫机制 | 第14-16页 |
1.2.2 贝类的体液免疫与免疫机制 | 第16-18页 |
第三节 贝类免疫系统中的氧化还原代谢平衡 | 第18-19页 |
1.3.1 贝类的抗氧化体系 | 第18-19页 |
1.3.2 硒:抗氧化和免疫体系中重要的一分子 | 第19页 |
第四节 基因克隆和表达研究的主要方法 | 第19-24页 |
1.4.1 表达序列标签 | 第20页 |
1.4.2 差异显示反转录 | 第20-21页 |
1.4.3 随机引物法克隆未知序列基因 | 第21页 |
1.4.4 代表性差异分析 | 第21-22页 |
1.4.5 用特异抗体克隆基因 | 第22页 |
1.4.6 基因表达系列分析 | 第22页 |
1.4.7 基因芯片 | 第22-23页 |
1.4.8 mRNA表达的定量检测技术 | 第23-24页 |
第五节 扇贝基因组及功能基因的研究现状 | 第24-25页 |
第六节 本论文研究目的 | 第25-27页 |
第二章 材料与方法 | 第27-37页 |
第一节 样本的采集与处理 | 第27-29页 |
2.1.1 健康扇贝在实验室环境中的暂养 | 第27页 |
2.1.2 氧应激实验 | 第27页 |
2.1.3 微生物应激实验 | 第27-29页 |
第二节 RNA的提取 | 第29-30页 |
2.2.1 主要化学试剂与仪器 | 第29页 |
2.2.2 扇贝血淋巴RNA的提取 | 第29-30页 |
第三节 cDNA第一链的合成 | 第30-31页 |
2.3.1 主要化学试剂与仪器 | 第30页 |
2.3.2 合成扇贝cDNA一链的步骤 | 第30-31页 |
第四节 获得全长cDNA序列 | 第31-33页 |
2.4.1 zSeBP的克隆 | 第31-32页 |
2.4.2 栉孔扇贝g型溶菌酶基因cDNA的克隆 | 第32页 |
2.4.3 海湾扇贝g型溶菌酶基因cDNA的克隆 | 第32-33页 |
第五节 感受态细胞的制备及转化 | 第33-34页 |
2.5.1 感受态细胞的制备 | 第33页 |
2.5.2 转化 | 第33-34页 |
第六节 目的基因的生物信息学分析 | 第34页 |
第七节 基因在体内表达的研究 | 第34页 |
第八节 丙二醛(MDA)的测定 | 第34-35页 |
第九节 栉孔扇贝硒结合蛋白免疫相关性研究实验设计思路 | 第35-37页 |
2.9.1 硒结合蛋白是否和栉孔扇贝的免疫机制相关? | 第35页 |
2.9.2 什么机制使硒结合蛋白参与栉孔扇贝的免疫应答? | 第35-37页 |
第三章 结果与讨论 | 第37-57页 |
第一节 栉孔扇贝硒结合蛋白基因(zSeBP)的克隆与免疫相关性研究 | 第37-47页 |
3.1.1 zSeBP的克隆与序列分析 | 第37-39页 |
3.1.2 zSeBP cDNA序列与其它物种硒结合蛋白序列的比对 | 第39-40页 |
3.1.3 栉孔扇贝不同徽生物应激后的MDA分析 | 第40-41页 |
3.1.4 栉孔扇贝不同微生物和氧应激后血淋巴中硒结合蛋白mRNA的表达与分析 | 第41-43页 |
3.1.5 讨论 | 第43-47页 |
第二节 栉孔扇贝和海湾扇贝g型溶菌酶基因cDNA的克隆与分析 | 第47-57页 |
3.2.1 栉孔扇贝g型溶菌酶基因cDNA的克隆 | 第47页 |
3.2.2 栉孔扇贝g型溶菌酶基因cDNA的序列分析 | 第47-50页 |
3.2.3 海湾扇贝g型溶菌酶基因cDNA的克隆 | 第50页 |
3.2.4 海湾扇贝g型溶菌酶基因cDNA的序列分析 | 第50-52页 |
3.2.5 栉孔扇贝和海湾扇贝g型溶菌酶基因的分子进化研究 | 第52-54页 |
3.2.6 讨论 | 第54-57页 |
第四章 结论 | 第57-59页 |
第一节 栉孔扇贝硒结合蛋白基因(zSeBP)的克隆与免疫相关性研究 | 第57-58页 |
第二节 海湾扇贝和栉孔扇贝g型溶菌酶基因的克隆与分析 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-65页 |
已发表和已接收文章 | 第65页 |
已在GenBank数据库中注册的序列 | 第65页 |
已申请的国家发明专利 | 第65-66页 |
附录 | 第66-67页 |